腺病毒介导的野生型p53基因对人肺腺癌细胞放疗敏感性的影响

目的:研究腺病毒介导的野生型p53基因(Ad-p53)对人肺腺癌细胞生长及放疗敏感性的影响。方法:将重组的含野生型p53基因的腺病毒导入A549细胞,通过免疫细胞化学方法检测p53基因的表达。A549细胞分为4组:对照组、转染组、放疗组、转染联合放疗组。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和流式细胞仪检测p53基因以及联合放射治疗(2,4,6 Gy)对A549细胞生长抑制及凋亡的影响。结果:通过免疫细胞化学方法证实了p53基因在A549细胞中的表达。MTT法检测发现p53基因对A549细胞的生长抑制率为(50.60±5.69)%。当放射剂量为2,4,6 Gy时,A549细胞的生长抑制率分别为(16.06±4.35)%、(16.39±1.67)%、(17.73±4.68)%。当p53基因与放疗(2,4,6 Gy)联合作用时,抑制率分别为(80.60±5.35)%,(89.30±1.67)%、(90.30±2.01)%(P<0.01)。p53基因转染所产生的A549细胞凋亡率为(10.38±1.68)%。放疗(2,4,6 Gy)引起的细胞凋亡率分别为(3.98±0.72)%、(4.84±0.60)%、(5.40±0.70)%。当p53基因与放疗(2,4,6 Gy)联合作用时,凋亡率分别为(17.80±1.30)%、(19.03±0.54)%、(21.34±2.51)%(P<0.01)。结论:野生型p53基因与放疗对人肺腺癌细胞生长有协同抑制作用,增加了人肺腺癌细胞对放射治疗的敏感性     

内皮抑素联合放射治疗对裸鼠Lewis肺癌血管抑制作用的实验研究

目的探讨内皮抑素联合放射治疗对荷Lewis肺癌小鼠的体内抑瘤效应,分析对肿瘤血管生成的抑制作用。方法32只荷Lewis肺癌的小鼠随机分为对照组、放射治疗组(1Gy/次,14d)、内皮抑素治疗组(10mg/kg,14d)和内皮抑素联合放疗治疗组,观察各组小鼠照射后不同时间肿瘤体积变化,第15天用免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度。结果内皮抑素联合放射治疗组小鼠肿瘤体积明显小于对照组、放疗组及内皮抑素治疗组,第15天肿瘤组织微血管密度明显低于放疗组及内皮抑素治疗组。结论内皮抑素联合放射治疗抑瘤效应明显优于单纯放射治疗及内皮抑素治疗组,其机理可能是两者对抗肿瘤血管生成具有协同作用。     

原发性肝脏神经内分泌肿瘤13例临床病理分析

目的：原发性肝脏神经内分泌肿瘤（primary hepatic neuroendocrine neoplasm,PHNEN）是罕见肿瘤。本研究通过对13例 PHNEN 的诊治过程进行分析总结,并结合相关文献深入探讨诊治要点。方法回顾性分析2012-03-01－2014-07-31中国人民解放军第八一医院诊治的13例 PHNEN 患者临床资料。结果根据2010版消化系统肿瘤 WHO分类标准,分为神经内分泌瘤（neuroendocrine tumor,NET）G11例,NET G26例,神经内分泌癌（neuroendocrine carci-noma,NEC）6例。根据 AJCC 第7版肝细胞癌分期标准,分为Ⅰ期1例,ⅢA 期6例,ⅣA 期2例,ⅣB 期4例。2例患者接受肝脏姑息性切除手术,5例接受全身化疗,5例接受肝动脉化疗栓塞（transcatheter arterial chemoembolization,TA-CE）治疗,其他治疗方法包括放疗、舒尼替尼或奥曲肽微球等。所有患者均接受长期随访,截至末次随访日期,9例患者死亡,4例患者生存,中位生存时间12个月。1例接受 TACE 治疗的 PHNET G1患者生存期为12个月;6例 PHNET G2患者已有3例死亡,中位生存期12个月;6例 PHNEC 患者中有4例接受化疗,其中3例获得 PR,6例 PHNEC 患者的中位生存期为12个月。结论 PHNEN 是一类罕见的异质性肿瘤,病理组织学和免疫组化是确诊的主要方法,综合治疗方法有助于延长患者的生存时间。     

口腔颌面头颈部鳞癌超声热化疗中国专家共识

口腔颌面头颈部鳞癌确诊时多为中晚期,单纯化疗难以使晚期患者总生存获益。超声热化疗是常规治疗手段之外,目前发展较快的一种新的针对恶性肿瘤的有效治疗方法。然而,目前超声热化疗在口腔颌面头颈部恶性肿瘤治疗中尚未普及,为推广和规范超声热化疗在此领域的临床实践,特制订口腔颌面头颈部鳞癌超声热化疗专家共识, 以提高患者远期生存率和生活质量。     

hMLH1、hMSH2单核苷酸多态性与NSCLC铂类药物化疗后生存期的关系

目的 探讨hMLH1、hMSH2单核苷酸多态性(SNPs)与非小细胞肺癌(NSCLC)铂类为主的方案化疗后生存期的关系.方法 经病理学确诊的晚期NSCLC患者120例,采用铂类为主的两药联合化疗方案,化疗前采集患者的外周血.根据cDNA芯片原理制作目的基因芯片,利用双色荧光探针杂交进行多态性的基因分型,并随机抽取10%的样本进行测序来验证该方法的准确性,比较不同基因型与铂类药物化疗后生存期的关系.结果 成功进行基因分型,野生型、杂合型和突变型的叠加荧光分别显示为绿色、黄色和红色,与基因测序结果完全吻合.中位随访11个月.携带hMLHl T/T和T/A+A/A基因型患者铂类化疗后中位生存期(MST)为11.2个月和14.2个月,1年、2年、3年生存率分别为40.5%、11.9%、7.1%和63.6%、9.1%、4.5%(P＞0.05);携带hMSH2 T/T和T/C+C/C基因型患者MST、1年生存率分别为13.4个月、57.7%和10.7个月、33.3% (P＜0.05),2年及3年生存率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 hMLH1、hMSH2基因多态性与NSCLC患者铂类药物化疗后的生存期无显著相关性.     

单核苷酸多态性与NSCLC铂类化疗敏感性的关系

目的探讨ERCC1(C118T)、XRCC1(G399A)的单核苷酸多态性(SNP)与非小细胞肺癌(NSCLC)对铂类为主化疗方案敏感性的关系。方法经病理学确诊的晚期NSCLC患者120例,采用铂类为主的两药联合化疗方案,2～3个周期后进行临床疗效评价。根据cDNA芯片原理制作目的基因芯片,利用双色荧光探针杂交进行ERCC1、XRCC1的多态性的基因分型,比较不同基因型与化疗敏感性的关系。结果 ERCC1(C118T)至少携带1个T等位基因型的患者化疗有效率为44.7%,显著高于C/C基因型的19.2%(P<0.05);携带XRCC1(G399A)G/G基因型者化疗有效率为43.8%,高于至少携带1个A等位基因的19.4%(P<0.05)。结论 ERCC1、XRCC1基因多态性与NSCLC患者对铂类药物化疗的敏感性相关。     

国产聚乙烯亚胺应用于基因转染的研究

目的:观察国产聚乙烯亚胺(polyethylenimine, PEI)对肿瘤细胞的基因转染效率及细胞毒作用,探讨国产PEI转染Bcl-2反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)对增强顺铂(cisplatin, DDP)诱导胃癌细胞株SGC7901凋亡的影响.方法:分别以国产和进口的PEI为载体,将携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent proteins ,EGFP)报告基因的质粒转入肺腺癌A549细胞、胃癌SGC7901细胞和宫颈癌HeLa细胞中,FCM法检测转染效率,MTT法检测不同浓度PEI作用下A549细胞、SGC7901细胞和HeLa细胞的存活率.以国产PEI为载体将Bcl-2 ASODN 转染SGC7901细胞后,不同质量浓度DDP处理转染细胞,FCM法检测转染细胞的凋亡率.结果:国产和进口PEI介导的EGFP报告基因转染肿瘤细胞的效率相当.不同浓度的国产PEI对肿瘤细胞的存活率均无明显影响.以国产PEI为载体转染获得的SGC7901/Bcl-2 ASODN细胞,在质量浓度为0～4 μg/mL DDP作用后,凋亡率明显上升.结论:国产PEI是一种安全有效的基因转染载体. Bcl-2 ASODN能够上调DDP对胃癌SGC7901细胞的凋亡率.     

共面与非共面的VMAT在肺癌放疗中的剂量学比较

目的:探讨共面与非共面的容积调强（VMAT）技术在中央型肺癌和周围型肺癌中的剂量学差异。 方法:选择14例单一病灶的肺癌患者,其中7例为中央型肺癌、7例为周围型肺癌,分别制定共面的VMAT计划以及非共面的VMAT计划。比较两种计划的靶区适形指数（CI）、均匀性指数（HI）和梯度指数（GI）;危及器官比较:双肺V1、V2.5、V5、V20、Dmean,健侧肺V1和V5,心脏Dmean,食管Dmean,脊髓Dmax,胸壁V30及Dmean。 结果:对于靶区GI、胸壁V30和双肺V20,非共面的VMAT计划均要好于共面的VMAT计划。在中央型肺癌中,差异更加明显,结果具有统计学意义（P<0.05）。双肺及健侧肺的V1中,非共面的VMAT计划高于共面的VMAT计划（P<0.05）。对于心脏Dmean,非共面VMAT计划高于共面的计划,但差异无统计学意义（P>0.05）。非共面VMAT计划的机器跳数高于共面的VMAT计划（P<0.05）。 结论:非共面的VMAT计划较共面的VAMT计划剂量梯度更陡,对于保护胸壁和肺更有优势,在中央型肺癌中更加明显。本研究结果为肺癌的计划设计提供了一种新思路。     

多聚乙烯亚胺介导肿瘤细胞基因转染

目的:利用阳离子多聚物多聚乙烯亚胺(PEI)纳米凝胶将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,EGFP)转入同步化的肿瘤细胞中并检测绿色荧光蛋白的表达率,探讨PEI作为载体介导肿瘤细胞基因转染中细胞周期对转染效率的影响?方法:通过6 MV X线照射及药物阻滞使Hela及A549细胞同步化,在5个PEI/DNA梯度比(2/2?4/2?6/2?8/2?10/2 ?滋g/?滋g)下利用PEI介导EGFP报告基因转染进入上述同步化细胞,流式细胞仪和荧光显微镜下测定绿色荧光蛋白表达率,通过梯度试验分析细胞周期时相与表达率之间的关系?结果:在不同增殖状态及PEI/DNA比值梯度下,一定剂量-时间的X射线和顺铂可以使Hela细胞同步化于S期,一定剂量-时间的艾素可以使A549细胞同步化于G2/M期,而血清饥饿法培养则可以使细胞阻滞于G0/G1期,在不同细胞周期时相下EGFP的转染效率不同,两种同步化细胞均表现出S期及G2/M期细胞的转染率显著高于对照组(P < 0.05)和G0/G1期细胞(P < 0.0001)?结论:PEI导入基因的表达效率受细胞周期制约,PEI介导的基因转染受到宿主细胞摄取?转运入核及转录能力的影响,而该进程都是细胞周期依赖性的?     

人参皂苷Rg3对食管癌细胞放射增敏作用的初步研究

目的 探讨人参皂苷Rg3（简称Rg3）对食管癌EC109细胞的放射增敏作用。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法观察不同浓度的Rg3（10、20、50、100、200、400、600mmol/L）作用EC109细胞24、48及72h的细胞存活率,克隆形成实验及单击多靶模型计算10mmol/L Rg3预处理24h经0、1、3、6和9Gy X射线照射后的辐射增敏比（SER）。根据实验设计分为对照组、单纯照射组及Rg3+照射组,流式细胞仪及Foci焦点形成实验分别检测3组经8Gy X射线照射48h的细胞凋亡率和DNA分子损伤情况。结果在10～600mmol/L范围内,Rg3可降低EC109细胞的存活率,呈剂量和时间依赖性;10mmol/L Rg3处理EC109细胞的SER为1.28。Rg3+照射组的凋亡率为（62.33±4.60）%,高于对照组的（6.46±1.23）%和单纯照射组的（30.68±3.55）%,差异有统计学意义（P＜0.05）;Rg3+照射组的Foci焦点细胞数为（64±12）个,亦高于对照组的（6±3）个和单纯照射组的（32±6）个,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论Rg3对食管癌EC109细胞有放射增敏作用,能够抑制细胞活性并诱导细胞凋亡与DNA分子损伤。