DNA extraction from fresh-frozen and formalin-fixed, paraffinembedded human brain tissue

Both fresh-frozen and formalin-fixed,paraffinembedded（FFPE）human brain tissues are invaluable resources for molecular genetic studies of central nervous system diseases,especially neurodegenerative disorders.To identify the optimal method for DNA extraction from human brain tissue,we compared methods on differently-processed tissues.Fragments of LRRK2 and MAPT（257 bp and 483 bp/245 bp）were amplified for evaluation.We found that for FFPE samples,the success rate of DNA extraction was greater when using a commercial kit than a laboratory-based method（successful DNA extraction from 76%versus 33%of samples）.PCR amplicon size and storage period were key factors influencing the success rate of DNA extraction from FFPE samples.In the fresh-frozen samples,the DNA extraction success rate was 100%using either a commercial kit（QIAamp DNA Micro）or a laboratorybased method（sample boiling in 0.1 mol/L NaOH,followed by proteinase K digestion,and then DNA extraction using Chelex-100）regardless of PCR amplicon length or tissue storage time.Although the present results demonstrate that PCR-amplifiable genomic DNA can be extracted from both fresh-frozen and FFPE samples,fresh brain tissue is recommended for DNA extraction in future neuropathological studies.     

动脉瘤性蛛网膜下腔出血病人Lindegaard比值与脑组织氧分压的相关性

目的 探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血（aSAH）病人经颅多普勒超声（TCD）检测Lindegaard比值（LR）与脑组织氧分压（PbtO2）的相关性。方法 2019年8月至2022年2月前瞻性收集aSAH共46例。使用LICOX-Ⅱ型脑组织氧分压监测系统,采用氧分压探针（Clark型微型电极）记录大脑中动脉供血脑组织PbtO2,其中PbtO2<20 mmHg且持续时间≥10 min定义为局部组织缺氧。TCD检测PbtO2探针同侧MCA和颈内动脉（ICA）颅外段,LR指同侧MCA与ICA颅外段平均血流速度比值,LR≥3存在脑血管痉挛。结果 根据PbtO2监测结果,16例出现脑组织缺氧（缺氧组）,30例无脑组织缺氧（非缺氧组）;与非缺氧组相比,缺氧组入院GCS评分较低（P=0.041）,脑血管痉挛发生率呈增高趋势（P=0.057）。LR判断存在脑血管痉挛37例,无脑血管痉挛9例。LR与PbtO2呈显著负相关（r=-0.305,P=0.039）。LR≥3预测脑组织缺氧的特异性很高（93.3%）,但敏感性较低（56.3%）;LR对脑组织缺氧的阳性预测值和阴性预测值分别为81.8%和80.0%。结论 aSAH病人在预防性迟发性脑缺血监测时,TCD检测LR是预测脑组织缺氧较好的非侵入性方法,但其敏感性低,不能单纯通过LR结果正常而排除发生迟发性脑缺血的可能。     

IL-1RA-PEP融合蛋白的构建及其对脑缺血再灌注后细胞凋亡的抑制作用研究

目的 构建白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)与细胞渗透肽(PEP-1)融合蛋白,探讨其对脑缺血再灌注(I/R)后神经细胞凋亡的抑制作用.方法 构建IL-1 RA与PEP-1融合基因,通过诱导表达和分离纯化,制备IL-1 RA-PEP融合蛋白.建立大鼠大脑中动脉阻断模型(MCAo),形成I/R损伤,静脉注射IL-1 RA-PEP,24 h后检测其在大鼠脑组织的分布,以及脑组织梗死体积,炎性细胞浸润和神经细胞凋亡情况,并分析相关凋亡蛋白的表达变化.结果IL-1 RA-PEP融合蛋白具有拮抗IL-1的生物学活性,其能有效地渗透进入I/R大鼠脑组织.给药24 h后,缺血半球脑梗死体积和神经细胞凋亡数量减少,胱天蛋白酶(caspase)3和9等凋亡蛋白表达水平下降,同时Bcl-xL抗凋亡蛋白表达水平升高.结论IL-1RA-PEP融合蛋白能有效地渗透I/R大鼠脑组织,通过对相关凋亡蛋白的调控,抑制了I/R后脑组织神经细胞凋亡,对I/R损伤具有治疗作用.     

脑CT灌注成像联合CTA在超早期急性缺血性脑血管病诊断中的应用

急性缺血性脑血管病 (ａｃｕｔｅｉｓｃｈｅｍｉｃｃｅｒｅｂｒａｌｖａｓｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅ ,ＡＩＣＶＤ)是严重危害人类健康的常见病 ,具有较高的发病率、致残率和死亡率等特点 ,严重危害人们的身心健康。如何早期明确诊断 ,争取及时有效的治疗 ,最大程度减少缺血性坏死的范围 ,一直是人们关注的热点问题。近年来 ,随着医学影像技术的发展 ,脑ＣＴ灌注成像引起了人们的关注 ,它能在缺血性脑血管病发病的超早期(6ｈ内 )显示出缺血性病变的部位和范围 ,评价缺血脑组织的血流灌注情况 ,并且从影像学方面证实了半暗带的存在[1 3 ] ;…     

大鼠胎脑神经细胞与胶原复合体移植对脑损伤的修复

目的:评价胶原蛋白(Collagen)的细胞相容性;研究胶原蛋白(C)与大鼠胎脑神经细胞(FBN)复合体(C-FBN)脑内移植对脑损伤的修复作用。方法:将大鼠FBN与胶原蛋白联合体外培养,进行光镜、扫描电镜观察。并将体外联合培养3～5d的C-FBN(移植前48h培养液中加入BrdU)移植到大脑皮质损伤模型的大鼠脑损伤部位,术后3,6,10,15及30d光镜、BrdU免疫细胞化学染色(ICC)、透射电镜观察脑组织对移植物的反应、移植细胞生长状态及载体在体内的降解情况等。结果:胶原蛋白对FBN生长无不良影响;脑组织对移植物无明显的免疫排斥反应;胶原蛋白与周围脑组织整合好,有血管长入移植物中;载体内有大量存活神经细胞,而且术后各时段都检出BrdU阳性细胞;移植区有突触形成;胶原蛋白海绵吸收、降解快,可诱导组织再生。结论:胶原具有良好的细胞相容性和组织相容性,是神经组织工程的一种较为理想的生物载体材料;生物材料与胎脑神经细胞联合培养移植是治疗脑损伤较有前途的新方法。     

癫痫患者脑组织中SCG10的表达及其与耐药的相关性分析

目的：探讨癫痫患者脑组织中SCG10的表达及其与耐药的相关性。方法选取本院收治的38例耐药性癫痫患者作为观察组,同时选取18例神经外科减压或清创患者作为对照组,对其临床资料进行回顾性分析。结果观察组患者的SCG10及MAPK表达均明显高于对照组（P〈0.05）,且癫痫患者脑组织中SCG10及MAPK表达位于同一细胞上。结论耐药性癫痫患者脑组织中的SCG10及MAPK表达增加,且两者间的共同表达表明,耐药性癫痫的发生发展可能与SCG10及MAPK的相互作用有关。     

损害宝宝智力的那些病

宝宝健康、聪明是全家人共同的心愿。可是,有些看似不起眼的小病,不仅影响宝宝的身体,甚至影响到宝宝智力,妈妈们不可不防哦。贫血是小儿时期常见的一种综合征,指单位体积周围血液中红细胞、血红蛋白和红细胞压积低于正常值,或其中一项明显低于正常值。贫血不但影响小儿生长发育,并且是一些感染性疾病的诱因。由于脑组织缺氧,或因缺铁或维生素B12缺乏,致神经细胞代谢障碍,必然会影响脑功能和智力发育。     

Neuroprotective effects of vagus nerve stimulation on traumatic brain injury

Previous studies have shown that vagus nerve stimulation can improve the prognosis of traumatic brain injury. The aim of this study was to elucidate the mechanism of the neuroprotective effects of vagus nerve stimulation in rabbits with brain explosive injury. Rabbits with brain explosive injury received continuous stimulation(10 V, 5 Hz, 5 ms, 20 minutes) of the right cervical vagus nerve. Tumor necrosis factor-α, interleukin-1β and interleukin-10 concentrations were detected in serum and brain tissues, and water content in brain tissues was measured. Results showed that vagus nerve stimulation could reduce the degree of brain edema, decrease tumor necrosis factor-α and interleukin-1β concentrations, and increase interleukin-10 concentration after brain explosive injury in rabbits. These data suggest that vagus nerve stimulation may exert neuroprotective effects against explosive injury via regulating the expression of tumor necrosis factor-α, interleukin-1β and interleukin-10 in the serum and brain tissue.     

朊病毒病实验室生物安全风险控制特点分析

朊病毒病（prion disaese）或可传播性海绵状脑病（transmissible spongiform encephalopathies,TSEs）是一类侵袭人类及多种动物中枢神经系统的退行性脑病,潜伏期长,100％病死率.人类的朊病毒病有克-雅病（Creutzfeldt-Jacob disease,CJD）,包括散发型、家族遗传型、医源型、变异型CJD（variant CJD,vCJD）,另外还有库鲁病（Kuru）、GSS综合征（Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome）、致死性家族型失眠症（fatal familial insomnia,FFI）,其致病因子是朊病毒.朊病毒为微小的蛋白感染颗粒,不包含核酸,与常规病毒不同[1].目前认为朊病毒是由在正常哺乳动物脑组织中存在的PrP蛋白（PrPC）经过构象转变而形成,又称PrPSc.在朊病毒患者中枢神经组织中可以检出异常致病蛋白PrPSc的沉积[1],但不同的朊病毒病具有不同的特点,主要表现在临床特征、潜伏期、脑组织中prpsc的分布、脑组织损伤的特点、能否诱导淀粉样变化,以及朊病毒的分子特征等,具有明显的＆quot;毒株＆quot;差异.鉴于朊病毒不同于传统病毒,具有独特的实验室检测技术[2],因此存在独特的生物风险形式.本文从朊病毒病原学特点和常见实验检测技术方面分析朊病毒实验活动中的生物风险形式,并提出相应的预防措施.