镉胁迫对昆虫的毒性效应及昆虫防御机制的研究进展

镉是重要的重金属污染物之一,其毒性大,蓄积性强,易对人类健康造成严重危害,这种危害也涉及到无脊椎动物,尤其是镉胁迫对昆虫的影响已引起人们关注。环境中的镉可通过摄食和呼吸等途径进入昆虫体内,影响昆虫的生长发育,并通过氧化损伤等途径诱导细胞凋亡。昆虫对镉胁迫有一定的防御能力,可在一定程度上依靠金属结合蛋白、抗氧化酶、热休克蛋白的保护作用及排泄行为的解毒作用减少镉对机体的损害。镉的毒性效应可能随昆虫种类不同而不同。本文就镉胁迫对昆虫生长和发育的影响、诱导细胞凋亡的分子机制以及昆虫对镉胁迫的防御机制等研究进展进行回顾综述。     

窖蛋白-1在肺腺癌A549细胞凋亡中的作用及其分子机制

目的 探讨窖蛋白1（caveolin-1，Cav-1）在肺腺癌A549细胞凋亡中的作用及其分子机制。方法 体外培养A549细胞，100nM星形孢菌素（staurosporine，STS）处理6、12和24h后，流式细胞术检测STS处理后细胞周期的改变和凋亡率，Westernblot方法检测STS诱导细胞凋亡过程中Cav-1、caspase-3、PI3K蛋白表达的变化。结果FACS检测显示100nMSTS作用后，出现G2/M阻滞和细胞凋亡，促凋亡作用于用药后6h出现，持续至24h，G2/M阻滞的作用在12h达到峰值，凋亡率在24h达到峰值。Westernblot结果显示经100nMSTS处理A549细胞6、12和24h后，Cav-1蛋白含量逐渐增加，组间比较差异均有统计学意义（P＜0.01）；caspase-3蛋白显示32kDa和17kDa条带，caspase-3含量逐渐增加，与对照组相比，STS处理12h和24h后，差异有统计学意义（P＜0.01）；PI3K含量逐渐下降，与对照组相比，差异均有统计学意义（P＜0.05）。采用caspase-3的抑制剂能阻止STS诱导的细胞凋亡。结论Cav-1在STS诱导的A549细胞凋亡中起正调控作用。     

黄芩素对阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的调节作用

目的:探讨黄芩素对阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的调节作用。方法:18只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(正常组,n=6)、阿霉素肾病组(模型组,n=6)和黄芩素治疗组(治疗组,n=6),模型组和治疗组一次性尾静脉注射阿霉素2.0mg/kg诱导阿霉素肾病动物模型,正常组注射等量生理盐水。造模后第1天开始,治疗组予黄芩素300 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组予等量蒸馏水灌胃,共治疗8周。8周时留取各组大鼠24 h尿液标本及肾脏组织标本,使用TUNEL检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组化检测肾组织中caspase-3表达,western Blot方法检测肾皮质中Bcl-2及caspase-3蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组24 h尿蛋白定量明显升高(P0.05),肾小管上皮细胞凋亡数量明显增加(P0.05),肾皮质中caspase-3蛋白水平明显增加(P0.05),Bcl-2蛋白水平明显下降(P0.05)。与模型组比较,治疗组24 h尿蛋白定量明显下降(P0.05),TUNEL阳性肾小管上皮细胞数量明显减少(P0.05),肾皮质中caspase-3蛋白水平明显下降(P0.05),Bcl-2蛋白水平明显增加(P0.05)。结论:黄芩素对阿霉素肾病具有一定的保护作用,其作用机制可能与调节肾小管上皮细胞凋亡有关。     

五味子乙素对苯并芘致不育模型小鼠精液质量的影响

目的探讨五味子乙素(Sch B)对苯并芘(Bap)所致不育模型小鼠精液质量降低的保护作用及其机制。方法选取性成熟雄性美国癌症研究所小鼠60只,随机分为对照组、Bap组和Sch B+Bap组,每组20只。Bap用橄榄油配成0.2 g·L-1混悬液,Sch B用9 g·L-1氯化钠注射液配成20 g·L-1混悬液。Bap组小鼠给予Bap 2 mg·kg-1·d-1灌胃,Sch B+Bap组小鼠给予Bap(2 mg·kg-1·d-1)及Sch B(200 mg·kg-1·d-1)灌胃,对照组小鼠给予相同剂量的9 g·L-1氯化钠注射液与橄榄油灌胃,30 d后处死小鼠取出睾丸组织,观察各组小鼠的精子密度、活率及动态参数曲线运动速度(VCL)、直线运动速度(VSL)、平均路径速度(VAP)、平均移动角度(MAD)、精子头侧摆幅度(ALH)、鞭打频率(BCF)、直线性(LIN)、摆动性(WOB)、向前性(STR),并测定睾丸组织细胞色素P450(CYP450)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及凋亡相关基因Bax、Bcl-2 mRNA表达水平。结果与对照组小鼠比较,Bap组小鼠的精子密度、活率以及a级精子与b级精子活率均显著降低(P<0.05);Sch B+Bap组小鼠的精子密度、活率、a级精子与b级精子活率显著高于Bap组(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠精子密度低于对照组(P<0.05),但2组小鼠间精子活率比较差异无统计学意义(P>0.05)。Bap组小鼠的各项精子动态参数均低于对照组(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠的各项精子动态参数均高于Bap组(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠精子的ALH、STR、BCF均显著低于对照组(P<0.05),VCL、VSL、VAP、LIN、MAD、WOB与对照组小鼠比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组小鼠比较,Bap组、Sch B+Bap组小鼠睾丸组织中CYP450活性显著增高(P<0.05),GSH-PX、SOD活性显著降低(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠睾丸组织中CYP450活性显著低于Bap组(P<0.05),GSH-PX、SOD活性显著高于Bap组(P<0.05)。与对照组小鼠比较,Bap组、Sch B+Bap组小鼠睾丸组织中Bcl-2 mRNA水平显著降低(P<0.05),Bax mRNA水平及Bax/Bcl-2显著增高(P<0.05)。Sch B+Bap组小鼠睾丸组织中Bcl-2 mRNA水平显著高于Bap组(P<0.05),Bax mRNA水平及Bax/Bcl-2显著低于Bap组(P<0.05)。结论五味子乙素可以改善苯并芘导致的小鼠精液质量降低,其作用可能是通过提高抗氧化酶活力及调节凋亡相关因子而实现。     

死亡结构域相关蛋白及其在宫颈病变中的研究进展

宫颈癌对妇女健康构成严重威胁,人乳头瘤病毒感染与宫颈病变及宫颈癌的发生密切相关。关于宫颈癌发生发展的机制仍在研究中。近年研究发现一种多功能核蛋白,即死亡结构域相关蛋白(death domain associated protein,Daxx),其与细胞内蛋白或病毒蛋白相互作用,参与调节细胞凋亡、转录调控、抗病毒等细胞活动,在不同途径中发挥不同的生理或病理作用。通过对Daxx功能及其作用机制的研究有助于进一步阐明宫颈癌发生发展的机制,有助于发现新的预防和治疗方法。综述Daxx的一般特性和研究现况及其在宫颈病变的研究进展。     

维生素D衍生物EB1089对宫颈癌细胞凋亡与侵袭的影响

目的:探讨维生素D衍生物EB1089对宫颈癌细胞株凋亡及侵袭的影响。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测45例宫颈炎症、39例宫颈上皮内瘤变(CIN)和44例宫颈鳞癌患者的血25-羟维生素D水平。流式细胞技术检测细胞凋亡,Transwell试验检测细胞侵袭能力。结果:宫颈鳞癌组中血清25-羟维生素D水平显著低于宫颈炎症组和CIN组,差异有统计学意义(P0.05)。与0.1nmol/L EB1089组比较,10nmol/L EB1089组和100nmol/L EB1089组的宫颈癌细胞凋亡率均明显增加,而细胞侵袭能力均显著下降,呈显著剂量依赖性。结论:维生素D衍生物EB1089抑制宫颈癌的发生发展,这为宫颈癌防治探索了新途径。     

中药三七对缺血/再灌注损伤的保护作用及应用前景

心肌缺血/再灌注损伤是缺血心肌获得最佳疗效的主要障碍,目前临床中还无有效药物进行预防和治疗。三七是传统的化瘀止痛药物,临床中常用于治疗心绞痛、冠心病等,随着研究的深入,发现三七及其提取物能够调控多种信号通路,对心肌缺血/再灌注损伤产生保护作用,具有较广阔的应用前景。该文综述了近年来三七及其活性成分对心肌缺血/再灌注损伤的治疗作用及作用机制,以期为后期药物开发提供参考。     

Ｔｏｌｌ 样受体９ 在宫颈癌细胞中的表达及抗凋亡作用

目的　研究宫颈癌Ｈｅｌａ 细胞中Ｔｏｌｌ 样受体９（ＴＬＲ９）的表达情况及ＴＬＲ９ 对宫颈癌Ｈｅｌａ 细胞抗凋亡能力的影响，     

丙酮酸乙酯对肝细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制研究

目的:探讨丙酮酸乙酯在肝细胞氧化应激损伤中的作用及机制。方法:通过对人肝细胞系L-02进行缺氧/复氧处理各1 h建立氧化应激损伤模型。将L-02根据干预措施分为对照组(Control组)、乳酸钠林格液组(LR组)、丙酮酸乙酯组(EP组)。应用日本日立公司7020全自动分析仪检测细胞培养上清液中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)浓度;采用Hoechst 33342/碘化丙啶双标记荧光染色以及原位缺口末端标记法(TUNEL)检测各组细胞的凋亡和坏死情况;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测各组caspase-9、caspase-3与多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达;采用荧光素发光法测量各组肝细胞内ATP浓度。结果:EP组细胞培养上清液中AST和ALT浓度均低于Control组和LR组(P0.05);EP组坏死细胞比例低于Control组和LR组(P0.05),但凋亡细胞比例高于Control组和LR组(P0.05)。EP组活化形式的caspase-9、caspase-3与PARP蛋白表达水平高于Control组和LR组(P0.05)。EP组细胞内ATP浓度显著高于Control组和LR组(P0.05)。结论:EP对肝细胞氧化应激损伤有保护作用,能减少坏死细胞数量,增加凋亡细胞数量,改变坏死及凋亡细胞比例。EP的细胞保护作用机制可能在于改善能量代谢,提高细胞内ATP浓度,激活"凋亡/坏死共同通路",激活凋亡过程。     

Caspase-8、Caspase-9在急性百草枯中毒大鼠肾组织中的表达及作用研究

目的观察Caspase-8、Caspase-9在急性百草枯中毒大鼠肾组织中的表达情况,并探讨二者在百草枯中毒肾损伤中所起的作用。方法将140只SD大鼠(雌雄各半)随机分成对照组70只、染毒组70只,对照组给予生理盐水灌胃,染毒组给予50 mg/kg百草枯灌胃染毒。2组分别于灌胃后1,3,7,14,21,28,35d取肾组织标本行光镜下观察肾组织病理变化,用免疫组化染色法测定Caspase-8、Caspase-9的表达情况,原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞。结果染毒组大鼠肾组织中Caspase-8从第1天就明显表达,第3天达到高峰,第35天虽有下降,但仍高于对照组;而Caspase-9的表达第1天明显增加,第14天达到高峰,第35天仍明显高于对照组。染毒组第3天凋亡指数增加,第21天达到高峰,第35天仍高于对照组。结论 Caspase-8、Caspase-9在百草枯中毒大鼠肾组织的表达发生改变,细胞凋亡是百草枯导致肾损伤的机制之一。