胶质细胞源性神经营养因子基因修饰神经干细胞移植短暂性脑缺血再灌注损伤大鼠半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达

背景：以往对脑缺血再灌注后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific protease 3,Caspase-3)的表达均缺乏长时间的动态观察。 目的：探讨胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞移植对暂时性脑缺血大鼠脑组织Caspase-3表达的影响。 设计：随机对照动物实验。 材料：清洁级成年SD大鼠60只,随机分为4组：正常对照组5只、缺血再灌注组5只、单纯细胞移植组25只、基因修饰细胞移植组25只。另取清洁级新生SD大鼠数只,用于分离培养神经干细胞。 方法：除正常对照组外,其余3组大鼠按改良性线栓法制备暂时性脑缺血模型。再灌注3 d,单纯细胞移植组从右侧侧脑室每只注入20 μL神经干细胞悬液,含(4.0~5.0)×105个神经干细胞;基因修饰细胞移植组每只注入等量胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞悬液;缺血再灌注组每只注入20 μL生理盐水。正常对照组、缺血再灌注组在缺血再灌注1周麻醉处死动物,单纯细胞移植组、基因修饰细胞移植组分别在缺血再灌注1,2,3,5,7周麻醉处死动物,5只/时间点。 主要观察指标：采用免疫组织化学SP法观察Caspase-3在海马和额顶皮质表达及分布特点。 结果：免疫组织化学染色显示,Caspase-3免疫阳性产物位于细胞核、细胞质和部分突起。在海马：单纯细胞移植组、基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数均随再灌注时间的延长而逐渐减少;除缺血再灌注第1周外,其余各时间点基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数均明显少于单纯细胞移植组(P < 0.05)。在额顶皮质：单纯细胞移植组、基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数亦均随再灌注时间的延长而逐渐减少;除缺血再灌注第1,2周外,其余各时间点基因修饰细胞移植组Caspase-3阳性细胞数均明显少于单纯细胞移植组(P < 0.05)。 结论：胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的神经干细胞移植通过降低Caspase-3的表达,减少神经元凋亡,从而抑制缺血性脑损伤的进行性恶化,其移植效果优于单纯神经干细胞移植。     

心外膜脂肪组织体积与钙化积分评价冠状动脉狭窄程度的价值比较

目的 对比心外膜脂肪组织体积及钙化积分评价冠状动脉狭窄程度的差异.方法 行冠状动脉64层多排螺旋CT检查的临床疑似冠心病患者210例为研究对象.冠状动脉造影证实冠状动脉狭窄＜50％为非冠心病组145例,≥50％为冠心病组65例.均在西门子definition工作站测量心外膜脂肪组织体积及钙化积分.结果 非冠心病组平均心外膜脂肪组织体积（100.0±46.5） cm^3,钙化积分（36.2±18.5）分;冠心病组平均心外膜脂肪体积（117.3±57.6） cm^3;钙化积分（413.3±67.5）分.两组间平均心外膜脂肪组织体积和钙化积分比较差异均有统计学意义（t值分别为2.316、6.564,P＜0.05、P＜0.01）.ROC曲线表明,钙化积分对诊断冠心病狭窄的敏感性、特异性均高于心外膜脂肪体积.结论 钙化积分对预测冠状动脉狭窄程度的敏感性和特异性均高于心外膜脂肪组织体积.     

RNAi沉默Megalin基因对尿白蛋白激活肾小管上皮细胞的影响

目的探讨Megalin基因对尿白蛋白刺激肾小管上皮细胞(HK-2)后释放趋化因子的影响。方法构建长期下调人Megalin基因表达的慢病毒载体,并包装慢病毒感染人HK-2细胞,以此获取Megalin表达下调的HK-2细胞株,用尿白蛋白刺激此细胞株,检测对照组和干扰组细胞释放MCP-1、RANTES、Fractalkine等趋化因子的表达变化。结果与对照组相比,干扰组MCP-1、Fractalkine的表达有显著性下降,RANTES的表达没有明显变化。结论 Megalin受体在介导肾小管上皮细胞白蛋白内吞的同时,能刺激趋化因子的释放;Megalin受体表达下调能显著抑制趋化因子的释放从而缓解炎症刺激。     

海藻硫酸多糖及其与Fe~(3+)络合物对氧化应激THP-1细胞的防护作用

目的探讨海藻硫酸多糖(sulfated polysaccharide,SP)及其与Fe3+反应生成海藻多糖铁络合物(seaweed sulfated polysaccharide iron complex,SPIC)对氧化应激THP-1细胞的作用。方法用化学检测法比较SP和SPIC主要成分。在此基础上,用分光光度法检测SPIC中铁离子的离解;用电子自旋共振(electron spin resonance,ESR)自旋捕捉技术对络合前后物质的羟自由基清除作用进行对比;用ESR自旋捕捉技术检测氧化应激细胞呼吸爆发的变化;用MTT(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法观察络合反应前后对正常THP-1细胞和对氧化应激THP-1细胞的存活率的影响。结果 SP与Fe3+反应形成络合物SPIC后,主要作用成分有较大变化,主要是Fe3+浓度含量显著升高,硫酸根和蛋白含量明显下降,而总多糖变化较小。Fe3+离解实验表明4h内SPIC中的铁能全部溶出;ESR自旋捕捉技术表明,络合前后对羟自由基清除作用与浓度密切相关;与SP相比,在相同浓度时SPIC对氧化应激后的细胞存活更高些。结论 SPIC络合上Fe3+后,在一定浓度时对氧化应激细胞的保护作用更佳,主要与络合后的离子性质和浓度密切相关。     

一氧化氮吸入治疗麻疹肺炎合并急性呼吸窘迫综合征患儿的护理

目的:探讨麻疹肺炎合并急性呼吸窘迫综合征患儿吸入外源性一氧化氮治疗后呼吸功能变化及护理对策。方法:对12例麻疹肺炎合并急性呼吸窘迫综合征患儿在进行药物治疗、机械通气的同时采用外源性一氧化氮吸入治疗,一氧化氮起始治疗浓度为10×10-6,分别监测吸入前,吸入后1、6、12、24、48 h不同时间点的血氧饱和度、动脉血氧分压、氧合指数,直至某个时间点一氧化氮治疗效果不明显时,则将浓度降低50%,每2 h递减50%,直至停用。结果:吸入一氧化氮24 h内,血氧饱和度、动脉血氧分压、氧合指数与吸入前比较均明显升高(P<0.05);50 h吸入一氧化氮浓度降低50%后与48 h相比,各指标前均有统计学意义(P<0.05);52 h一氧化氮浓度再减50%后与50 h相比,则无显著性差异(P>0.05)。结论:一定时间内吸入适宜浓度的外源性一氧化氮可有效改善麻疹肺炎合并急性呼吸窘迫综合征患儿的气体交换功能。     

30例PICC置管并发症原因分析与对策

目的 为了探讨留置PICC并发症的处理,增强护理人员的维护意识.方法 采用美国ARROW PICC导管经外周静脉穿刺入中心静脉置管.结果 本组PICC穿刺中及后期维护所遇到的并发症30例,通过及时的护理措施和处理后有一例穿刺未成功和一例因血管变异穿刺后送管未成功外,其余28例均得到及时纠正和好转至治疗结束拔管.结论 寻找问题的最佳解决办法,使 PICC更好运用于临床.     

聚集蛋白聚糖基因多态性与腰椎间盘突出症的关联性

背景:课题组以往研究表明,中国南方地区汉族人群聚集蛋白聚糖基因存在串联重复序列多态性.目的:观察聚集蛋白聚糖基因多态性与腰椎间盘突出症的关联性.方法:纳入椎间盘突出症患者和非椎间盘突出症患者各51 例.应用聚合酶链反应检测两组聚集蛋白聚糖基因多态性分布情况.采用分层χ2 检验分析聚集蛋白聚糖基因多态性在非椎间盘突出症组合腰椎间盘突出症组之间的分布差异.结果与结论:两组聚集蛋白聚糖基因多态性分布情况检测发现,聚集蛋白聚糖等位基因分布以中等长度串联重复序列片段最多见,短和长串联重复序列片段较少见,两组中出现频率最多的基因型是等位基因27,两组聚集蛋白聚糖等位基因多态性频率分布差异无显著性意义(P > 0.05).在基因型的分布上两组变化趋势基本相同,非椎间盘突出症患者和椎间盘突出症患者分别得出7 和6 种长短不同的串联重复序列.结果证实,聚集蛋白聚糖基因多态性与腰椎间盘突出症尚无明确关联.     

Numb基因在大鼠肾小管上皮细胞转分化过程中的作用

目的 探讨Numb在大鼠肾小管上皮细胞转分化过程中的作用。 方法 重组人转化生长因子β1（TGF-β1）刺激大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E细胞),不同浓度TGF-β1 （0、1、5、10、15、20 μg/L）作用48 h与TGF-β1 10 μg/L作用不同时间(0、24、48、72 h)后,采用RT-PCR、Western印迹和免疫荧光染色分别检测NRK52E细胞内E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Numb 的表达。采用RNA干扰技术下调Numb表达,Western印迹观察改变Numb水平对E-cadherin、α-SMA蛋白水平的影响。 结果 TGF-β1以剂量及时间依赖的方式诱导NRK52E细胞E-cadherin 蛋白表达下调,α-SMA 蛋白表达增高。Numb蛋白的表达随TGF-β1浓度的增加而增高,在5、10、15和20 μg/L时分别为0 μg/L时的1.33倍（P = 0.024)、1.39倍（P = 0.035）、1.45倍（P = 0.025）和1.51倍（P = 0.000)。而Numb蛋白和mRNA的表达亦随TGF-β1作用时间的延长而增高,作用24 h、48 h、72 h,Numb蛋白分别为0 h的1.48倍（P = 0.046)、1.54倍（P = 0.011）、1.79倍（P = 0.028）,Numb mRNA分别为0 h的1.56倍（P = 0.012)、1.82倍（P = 0.008）、1.82倍（P = 0.002）;同时Numb的分布也发生了改变,大量聚集在胞质中。下调Numb表达可以显著抑制TGF-β1诱导的α-SMA表达上调（为Numb表达正常时的18.1%,P = 0.004）、E-cadherin表达下调（为Numb表达正常时的2.19倍,P = 0.004）。 结论 Numb可以促进肾小管上皮细胞发生转分化。     

CT诊断肺Wegener肉芽肿

目的探讨肺Wegener肉芽肿的CT表现及其诊断价值。方法回顾性分析经手术切除（n=3）、肺穿刺活检（n=13）或支气管镜活检（n=2）确诊的18例肺Wegener肉芽肿患者的临床及CT资料。结果18例肺Wegener肉芽肿CT表现为肺内多发性结节和肿块15例,单发肿块2例,结节或肿块伴空洞13例,肺实变5例,肺梗死2例,支气管管壁增厚、管腔狭窄2例,纵隔淋巴结增大1例,胸膜增厚2例。结论两肺多发性结节、肿块并空洞,结节或肿块周围见＂晕轮征＂、＂供养血管征＂是肺We-gener肉芽肿的常见CT表现,病变的多发性、多样性、易变性和反复性对肺Wegener肉芽肿的诊断具有重要价值。     

记忆合金骑缝钉内固定治疗儿童难复性肱骨外科颈骨折

目的 探讨记忆合金骑缝钉治疗严重移位的儿童肱骨外科颈骨折的可行性及临床效果.方法 2006年4月至2008年10月共收治14例儿童难复性肱骨外科颈骨折患者,男8例,女6例;年龄5～16岁,平均10.6岁.骨折部位:均在肱骨近端骺板之下 1.0～3.0 cm.内收移位5例,完全前后移位3例,外展移位6例,均为闭合性骨折.受伤至手术时间为24 h～1周(平均48 h).均采用镍钛记忆合金骑缝钉固定治疗.结果 14例患者术后获6～18个月(平均10个月)随访.骨折愈合时间为5～7周,平均5.6周.肩关节功能采用Constant-Murley绝对值评分方法评定:优11例,良2例,可1例,优良率为92.9%.结论 骑缝钉内固定能充分对抗骨断端间的剪切、旋转及弯曲应力,具有操作简便、固定可靠、能早期行关节功能锻炼等优点.