siRNA干扰MTH1基因对肝癌HepG2细胞凋亡和迁移的影响

目的 应用siRNA干扰技术抑制人肝细胞癌系HepG2细胞MTH1基因表达,并研究MTH1基因干扰后对HepG2细胞凋亡和迁移能力的影响。方法 设计并化学合成3对特异性MTH1-siRNA,采用阳离子脂质体法瞬间转染肝癌HepG2细胞,离体培养肝癌HepG2细胞,并设正常对照组、阴性对照组及MTH1-siRNA1、MTH1-siRNA2、MTH1-siRNA3转染组。采用蛋白印迹（Western blot）法检测转染MTH1-siRNA后HepG2细胞MTH1蛋白水平表达的变化,并筛选干扰效果最佳序列。运用流式细胞技术和划痕实验检测转染siRNA-MTH1后HepG2细胞凋亡、体外迁移能力的变化。结果 MTH1-siRNA3转染组干扰效果与正常组和阴性对照组相比效果具有统计学意义（P=0.002, P=0.005）。MTH1-siRNA3转染组细胞凋亡率高于正常组及阴性对照组,差异有统计学意义（P=0.012, P=0.013）;MTH1-siRNA3转染组细胞的划痕24、36 h愈合率均低于正常组和阴性对照组,差异有统计学意义（P=0.001, P=0.000）。结论 MTH1在肝癌细胞的凋亡及迁移中起重要作用,干扰MTH1的表达能促进肝癌细胞凋亡并降低肝癌细胞的迁移能力。     

输精管结扎与吻合术后抗精子抗体与睾丸功能变化及机制实验研究

为探讨输精管结扎术后抗精子抗体的变化规律及其在吻合术后不育中所起的作用。应用日本大耳白兔复制了输精结扎与吻合的动物模型,分为假手术组(SOG)、输精管结扎组(VG)、输精管吻合育组(VFG)和不育组(VIG)。在此基础上进行了多指标的系列研究。主要成果如下: 血清抗精子抗体变化规律应用ELISA和IHT测定血清抗精子抗体结果发现,输精管结扎术后2～22月都可间断地检测出血清抗精子抗体,总阳性率达     

稳定表达UT-A2的FRT细胞系的建立与鉴定

目的：建立稳定表达尿素通道蛋白A2（UT—A2）的FRT细胞系，为寻找UT—A2抑制剂提供细胞模型。方法：通过真核表达质粒-脂质体介导的方法，将UT—A2 cDNA与真核表达载体pUB6／V5连接后的重组质粒转染入FRT细胞，经稳定筛选建立稳定表达UT—A2的FRT细胞系。功能检测实验将细胞分为对照组和稳定转染组，用2mol／L尿素负荷试验检测稳定表达UT—A2的FRT细胞膜的尿素通透性。结果：经BSD筛选21d后得到稳定表达UT—A2的细胞株；Western blotting证实UT—A2蛋白稳定表达；免疫荧光分析结果提示UT—A2的质膜定位。2mol／L尿素试验证实了该细胞系具有明显尿素通透性。结论：在非肾脏上皮细胞获得了稳定质膜定位表达UT—A2的FRT细胞株，该细胞株可用于UT—A2抑制剂的筛选。     

种植体支抗在下磨牙舌倾病例中的应用

种植体作为正畸的非牙性支抗在临床已得到广泛应用,并取得很好的疗效^[1,2],例如压低前牙,压低后牙,远中移动牙齿,竖直前倾磨牙等^[3]。但作为支抗解除下磨牙舌倾导致的锁合鲜有报道。在临床上我们常采用上下颌磨牙交互牵引,[牙合]垫式活动矫治器,固定矫治器弓丝控制来解除磨牙的锁[牙合]问题,但每个方法有其局限性及不足。本文介绍的种植体作支抗解除下牙舌倾致锁[牙合]的方法能圆满解决不足问题,而且患者依从性好。     

木丹颗粒联合胰岛素对糖尿病周围神经病变患者神经传导速度的影响

目的 探讨木丹颗粒联合胰岛素对糖尿病周围神经病变(DPN)患者神经传导速度的影响.方法 研究纳入DPN患者70例,研究开展时间为2020年1月-2020年10月.采用随机数字表法将70例患者分为对照组和研究组,各35例,两组患者均给予基础治疗,其中对照组在此基础上给予患者甘精胰岛素治疗,而研究组在对照组基础上联合木丹颗...     

卵巢癌的精准治疗及大数据分析

精准治疗是将个体疾病的遗传信息,结合临床和病理资料,设计针对每个患者的个体化诊断、预后、治疗方案。卵巢癌的治疗也进入了精准医学时代,识别卵巢癌的基因变异特征,寻求新的治疗靶点,对患者给予更为个体化的分子靶向治疗近年来已经应用于临床治疗,并有待进一步推进。大数据信息化分析为卵巢癌精准治疗提供了先进工具,加强数据平台建设及生物样本库建设是未来发展方向。本文综述了卵巢癌不同靶点(BRCA1/2、HER2基因、血管内皮生长因子)的分子靶向治疗的相关研究进展。     

1,25(OH)2D3对人肾小球系膜细胞增殖及 mTOR/p70s6K表达的影响

摘要：目的 探讨 1,25-二羟基维生素 D3[1,25(OH)2D3]对人肾小球系膜细胞增殖的影响及其在肾小球系膜细胞调控中对 mTOR/p70s6K 信号通路的作用。方法 体外培养人肾小球系膜细胞, 取传代培养至 3~7 代细胞分为 4组： 正常对照组（加含 5%胎牛血清 DMEM 培养基）, VD 组[加 1,25(OH)2D3 10-8 mol/L], R 组（加雷帕霉素 5 mg/L）, R+VD 组[加雷帕霉素 5 mg/L 及 1,25(OH)2D3 10-8 mol/L], 干预 48 h。采用细胞增殖与活性检测试剂盒 CCK-8 检测细胞增殖情况, 流式细胞术检测细胞周期时相分布, 免疫荧光法检测细胞中 mTOR、 p70s6K 的表达情况。结果 正常对照组、 VD 组、 R 组、 R+VD 组：（1） 吸光度值 （A450） 依次降低, 组间多重比较差异均有统计学意义 （均 P < 0.05）; 抑制率（IR） 依次升高。（2） G1期细胞比例依次增加, S 期、 G2/M 期依次减少, 增殖指数 （PI） 依次降低, 除 R 组与 VD 组比较差异无统计学意义外, 其余组间多重比较差异均有统计学意义。（3） 系膜细胞中 mTOR、p70s6K 蛋白表达强度均依次降低, 除 R 组与 VD 组比较差异无统计学意义外, 其余组间多重比较差异均有统计学意义。结论 1,25(OH)2D3可显著抑制人系膜细胞增殖, 且其可能通过抑制 mTOR/p70s6K 信号通路调控肾小球系膜细胞增殖。     

基于数据挖掘探讨《临证指南医案》便闭病用药规律

目的:探讨叶天士治疗便闭病用药规律,以供临床参考和借鉴。方法:收集《临证指南医案》“肠痹门”“便闭门”处方中药,运用Excel、SPSS 22.0、SPSS Modeler软件进行证型、药物频次、属性统计及关联规则分析。结果:叶氏治疗便闭病主要辨证为湿热内蕴、肾阳虚、阴虚火旺、肝肾阴虚、肺失宣肃等证型。药性以温、寒、平...     

微生物学基础实验教学改革中的几点体会

微生物学是生命科学的一个重要分支,是研究微生物的种类、分布、形态、结构、代谢、生长繁殖、遗传、进化以及与人类、动植物等相互关系的一门科学.微生物学基础实验是微生物学教学的关键步骤,是培养、训练学生的操作能力及独立分析解决问题能力的重要环节.     

PI3K抑制剂对人系膜细胞增殖的影响

【摘要】目的探讨磷脂酰肌醇3 激酶（PI3K）抑制剂LY294002 对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖的影响,为进一步研究人系膜细胞增殖的发生机制提供依据。方法 体外培养人系膜细胞,同步化后,用含有0.02、0.2、2、 20、100 mg/L 浓度的LY294002 进行干预处理,倒置相差显微镜动态观察细胞的生长,用细胞增殖与活性检测试剂盒 CCK-8 检测人系膜细胞的增殖情况;选择抑制人系膜细胞增殖作用较佳的LY294002 浓度, 分别培养0.5、1、24 、48 h 后用CCK-8 试剂盒检测细胞的增殖情况。结果 0.02 mg/L LY294002 对人系膜细胞无明显的抑制作用（P＞0.05）,抑制率仅为5.05%;在0.2~20 mg/L 浓度范围内,LY294002 抑制细胞增殖的作用随浓度的增大而增强,呈剂量依赖性（P＜0.05）,当浓度大于20 mg/L 时,抑制率可达96.75%,细胞停止生长。2 mg/L LY294002 作用0.5 h 对人系膜细胞增殖的抑制不明显（P＞0.05）;作用1 h 具有显著的抑制作用（P＜0.05）;作用1~48 h,LY294002 抑制细胞增殖的能力逐渐增强（P＜0.05）。结论 LY294002 在一定浓度和时间范围内具有抑制人系膜细胞增殖的作用,PI3K/Akt/ mTOR 信号通路可能调控人系膜细胞的增殖。