高黏型肺炎克雷伯菌分子流行病学特点

目的分析临床分离的高黏性肺炎克雷伯菌(Hypermucoviscous Klebsiella Pneumoniae,HMKP)分子流行特征,为临床控制此类细菌的传播提供实验室资料。方法收集2017年4月-2019年5月某教学医院临床患者首次分离的HMKP,PCR扩增6种常见高毒力血清型基因K1、K2、K5、K20、K54、K57,9个毒力基因rmpA、kfu、Aerobactin、iroN、entB、ybtS、fimH、mrkD、allS,多位点序列分型(MLST)分析菌株间的同源性。结果共收集63株HMKP,标本主要来自急诊ICU和神经内科ICU,两者共占33.33%(21/63);痰液标本占比最高,为50.79%(32/63),其次为血液标本,占20.63%(13/63)。HMKP菌株对大部分抗菌药物均敏感。血清分型以K1和K2型为主,分别占39.68%和30.16%。K1型的毒力基因携带模式以rmpA+Kfu+Aer+iroN+entB+ybtS+fimH+mrkD+allS为主,占92.00%,K2型以rmpA+Aer+iroN+entB+fimH+mrkD为主,占47.37%。主要的ST分型有ST23型21株,ST86型7株,ST65型4株,ST218型4株。结论 HMKP在医院内多引起重症监护患者的下呼吸道感染,应当制定严格的预防措施和实施长期的监测来控制HMKP菌株在这些病区的流行。     

人类白细胞抗原系统分型技术及其应用的现状分析和展望

人类白细胞抗原(HLA)在移植免疫、人类遗传学、疾病关联、药物组学、输血医学等领域中发挥重要的作用。下一代测序(NGS)技术已应用于HLA基因分型,不同分型策略和结果指定信息系统的分型准确率存在差异。已公布的中国人群HLA常见等位基因和确认等位基因,存在明显的人群分布特点,可作为国内HLA基因分型指定的参考标准。供者特异性抗-HLA在实体器官移植、造血干细胞移植中具有重要的作用,准确鉴定出这种抗体有助于提升移植患者存活率。HLA、MICA和KIR与疾病关联研究中大部分报道病例数较低,今后需要多中心合作的大样本分析。血站系统HLA实验室多数已具有高分辨分型能力,但发展存在不均衡现象,整体上规模偏小。国内初步建立了血小板捐献者HLA基因型数据库,其库容量的扩展可与中国造血干细胞捐献者资料库(CMDP)的发展协同规划。     

肺泡灌洗液高通量测序检测在肺部疾病诊疗中的作用研究进展

在呼吸系统疾病中,需要临床生物标志物用于诊断和评估对治疗的反应及判断预后。BALF包含微生物的核酸、游离DNA,RNA、外泌体等,能更全面的反映肺部的整体情况。NGS可以同时测定几百万甚至上亿条DNA或者RNA序列,利用NGS检测气管肺泡灌洗液,在诊断病原微生物方面,具有快速、不用培养的优点,并在肿瘤相关DNA与RNA的检测方面也有着其他基因学手段无法比拟的优势。肺部不断暴露于来自口咽和其他来源的各种微生物群落,回顾和综合通过BALF检测在健康和不同疾病状态的肺部微生物群落的现状。利用NGS检测BALF在肺部感染特殊病原菌的诊断方面的应用也日渐成熟。BALF中的非编码RNA以及cfDNA的检测可以用来协助诊断肺部疾病及判断疾病的发生发展,并且发现使用BALF EV DNA的液体活检是具有组织特异性的并且极其敏感。应用高通量测序检测肺泡灌洗液的特殊指标,所需时间短,可反复取材,是临床用来诊断、评估、预测肺部疾病,包括各类型感染性疾病及肺部肿瘤的一种新方法。     

慢性乙型肝炎与肝硬化患者乙型肝炎病毒S蛋白变异分析

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者、肝硬化患者乙型肝炎病毒(HBV)S蛋白变异的差异及其临床意义。方法选取CHB患者114例,其中慢性HBV携带者41例(慢性HBV携带组)、非活动性乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者38例(非活动性HBsAg携带组)、肝硬化组35例(肝硬化组)。采用测序法检测所有对象的HBV S蛋白基因序列。结果慢性HBV携带组、非活动性HBsAg携带组与肝硬化组之间年龄和HBV DNA载量差异均有统计学意义(P0.01),性别及HBV基因型差异均无统计学意义(P0.05)。肝硬化组HBV S蛋白总体变异率明显高于非活动性HBsAg携带组和慢性HBV携带组(P0.05、P0.01)。慢性HBV携带组、非活动性HBsAg携带组与肝硬化组S蛋白的主要亲水区(MHR)外变异率及细胞毒T淋巴细胞(CTL)+辅助性T淋巴细胞(Th)免疫表位区变异率依次升高(P0.01)。3组之间S蛋白的MHR及位于MHR内的"a"决定簇、LOOP1和LOOP2的变异率差异均无统计学意义(P0.05),MHR外的非免疫表位区变异率差异亦无统计学意义(P0.05)。慢性HBV携带组中有1例患者同时出现MHR外Th免疫表位区、CTL免疫表位区和非免疫表位区3个位点变异,1例患者出现MHR与MHR外Th免疫表位区2个位点变异,其他患者均为单点变异,且MHR外CTL+Th免疫表位区与非免疫表位区变异率相当,呈随机分布。非活动性HBsAg携带组有5例(13.15%)患者出现2个位点以上的变异,肝硬化组有9例(25.71%)患者出现2个位点以上的变异,且2个组的变异位点集中于MHR外CTL+Th免疫表位区。结论 HBV S蛋白MHR外,尤其是MHR外CTL+Th免疫表位区变异不仅与HBeAg阴性血清学状态相关,也与肝硬化相关。     

新生儿血型鉴定困难的探讨

目的探讨分析疑似B亚型的ABO溶血新生儿的血型。方法对患儿进行新生儿溶血病检测,对患儿ABO血型进行血清学鉴定和基因检测。结果 ABO血型血清学鉴定疑似B3,基因检测结果为B101/O01基因型。结论新生儿ABO血型鉴定困难时可以通过基因检测技术来进一步确认,待年龄到一周岁以后复查血型来验证为佳。