流感病毒受体结合表位真核载体的构建及表达

目的构建甲型流感病毒血凝素(HA)信号肽(SP)与HA唾液酸受体结合部位(RB)所含T、B表位的基因片段(RBT、RBB)真核表达质粒,研究其在真核细胞中的表达与免疫特性。方法通过重叠延伸PCR法(overlap-PCR)将HA的SP分别与RB、RBT、RBB通过一段多肽接头Gly4Ser融合为SP-RB、SP-RBT和SP-RBT,将其分别插入pcD-NA3.1(+)载体,构建质粒,鉴定正确后转染MDCK细胞,RT-PCR、免疫荧光、MTT检测该质粒的表达和分泌。结果融合基因真核表达质粒构建成功,在MDCK细胞中成功表达,转染细胞培养上清能刺激淋巴细胞增殖。结论SP-RB、SP-RBT、SP-RBB真核表达载体成功构建,表达产物能刺激淋巴细胞增值,为流感病毒唾液酸受体结合部位的T、B细胞表位免苗研究提供初步依据,也为流感核酸疫苗的研制奠定了基础。     

基于性染色体定量检测的伴性遗传病无创性产前筛查方法的研究

目的：利用孕妇血浆游离DNA对产前胎儿性别进行识别,为伴性遗传性疾病的无创性产前筛查提供参考。方法利用X、Y染色体的特异性引物和探针构建识别胎儿性别的实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测技术,并对灵敏度、准确性等方法学指标进行评价,然后将构建好的方法用于24例未孕健康女性及临床上50例16～20孕周的孕妇血浆DNA的检测。结果在母体DNA胎儿Y染色体定性检测方法的灵敏度检测中,当胎儿DNA丰度为3％～6％时,母体DNA模板量下限是50 pg。当母体DNA模板量在0．5～50 ng时,Y染色体最低检测丰度为1％,相当于胎儿DNA丰度为2％;当母体DNA模板量在0．05～0．5 ng时,Y染色体最低检测丰度为2％～4％,相当于胎儿DNA丰度为4％～8％;当无母体DNA时,Y染色体模板量下限为0．5 pg。标本定量检测中妊娠女性的血浆DNA浓度明显高于未孕健康女性（P＜0．05）。50例孕妇静脉血标本中,除1例标本因提取失败未作检测外,其余49例标本初次试验在未考虑母体血浆DNA模板起始用量时,检测结果为17例男性,32例女性,与胎儿出生后性别不完全一致;但是当加大母体血浆DNA模板起始用量（＞50 pg）后,结果为23例男性,26例女性,准确率为100％。结论该试验所构建的利用母体血浆游离DNA进行的早期无创性产前筛查方法具有较高的准确性,可以为伴性遗传出生缺陷性疾病的早期筛查和预防提供重要的参考价值。     

电话随访对急性心肌梗死患者PCI术后抗血小板治疗依从性的影响

目的 探讨电话随访对经皮冠状动脉介入治疗（PCI）患者出院后12个月抗血小板药物治疗依从性的影响.方法 选取2008年5月至2010年5月连续2年在我院接受PCI并植入支架的急性心肌梗死患者326例,随机分为随访组（162例）和对照组（164例）.对照组患者出院后每月定期到医院门诊复诊;随访组患者每月除定期复诊外还进行出院后电话随访,随访期为PCI术后12个月内.采用调查问卷调查两组患者抗血小板知识水平、治疗依从性,比较两组患者PCI后MACE、并发症发生情况.结果 PCI术后服药依从性随访组（96.3％）明显高于对照组（89.2％）（P＜0.05）;随访组患者抗血小板知识水平、治疗依从性、是否遵医嘱正确用药、按时复诊比率均明显高于对照组（P＜0.05）;术后1年MACE和靶血管重建发生率明显低于对照组（P＜0.05）;随访组96.3％患者能正确服用双联抗血小板药物,未出现抗血小板治疗的严重出血并发症患者,对照组患者出现黑便5例,出现呕血2例,因未能及时接受治疗,患者病情加重.结论 电话随访能够很好地改善PCI预后,同时电话随访是一种新的适应社会发展的护理方式,值得推广.     

“肺合皮毛”思想皮肤科临床应用举隅

<正>"肺合皮毛"是中医脏腑与组织器官的相互关系的重要理论之一。"肺合皮毛"源出《内经》。《素问·痿论篇》云:"肺主身之皮毛。"《素问·咳论》曰:"皮毛者,肺之合也,皮毛先受邪气,邪气以从其合也。"《素问·经脉别论》云:"肺朝百脉,输精于皮毛……肺者,气之本,魄之处也,其华在毛,其充在皮[1]。"     

IL-4对小鼠小胶质细胞ICAM-1表达的影响

目的探讨白细胞介素-4(IL-4)对小鼠小胶质细胞炎症因子细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达的影响。方法用IL-4与小鼠小胶质细胞共同孵育,观察不同处理组细胞形态的变化。ELISA法检测IL-4孵育小胶质细胞培养上清中ICAM-1的浓度,同时采用RT-PCR技术检测细胞ICAM-1mRNA水平。结果 IL-4与小胶质细胞共同孵育后细胞形态随孵育时间发生变化,贴壁细胞逐渐减少,IL-4减少小胶质细胞分泌ICAM-1并下调mRNA的表达水平。结论 IL-4可能通过抑制ICAM-1的产生及分泌而参与小胶质的细胞迁移过程,从而在中枢神经系统中发挥神经保护作用。     

角色冲突导致1例腹膜透析患者预后不良的分析及启示

<正>社会角色是附着于社会地位之上被期待的行为或行为规范[1]。角色冲突是指一个人在社会生活中负有多项角色责任和单一角色责任时,角色之间或角色内部发生了矛盾、对立和抵触,引起内部心理冲突[2]。腹膜透析采取居家治疗方式,患者接受腹膜透析置管术后,随即增加了患者角色[3],如果没有在原有社会角色所履行的义务及其行为基础上做出相应调整,患者角色和原有的各种社     

质谱仪在真菌鉴定中的应用与评价

目的探讨质谱仪在真菌感染中的应用,评价其鉴定真菌的能力。方法选取分离自我院住院患者的真菌菌株327株,用质谱仪进行快速鉴定,并与VITEK-2(酵母样真菌)和显微镜检查(丝状真菌)的鉴定结果进行比对,差异结果用分子生物学方法确认鉴定。结果依照质谱仪评分标准,227株酵母样真菌在种水平(2.0)的鉴定率为90.31%,在属水平(1.7)为98.68%;丝状真菌在种水平的鉴定率为74.00%,在属水平为94.00%。对临床常见的曲霉菌鉴定正确率可达96.74%。结论质谱仪在鉴定真菌的种属水平上都达到了令人满意的结果,尤其鉴定酵母菌和曲霉菌的能力更为突出,可作为临床实验室的常规检测方法。     

绿原酸抑制JNK信号通路对非酒精性脂肪性肝病的防治作用

目的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)与胰岛素抵抗密切相关。绿原酸(CG)能调节糖脂代谢、改善胰岛素抵抗。探讨CG在NAFLD中的作用及其可能的分子基础。方法选取30只SD大鼠,随机分为正常饮食组(NG组)、高脂饮食组(HG组)和绿原酸干预组(CG组)。所有大鼠第1周采用普通饲料适应性喂养,第2周开始NG组喂饲普通饲料,HG组和CG组喂饲高脂饮食。第4周起NG组、HG组给予每周3次生理盐水灌胃,CG组给予每周3次灌胃CG。采用全自动生化仪和放射免疫法检测血清生化指标,采用全波长分光光度计测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和游离脂肪酸(FFA)。正常血糖高胰岛素钳夹试验技术测定胰岛素抵抗。Western Blot检测自噬及C-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。相关分析采用Pearson相关性分析。结果与NG组相比,HG组体质量、肝指数、肝湿重、ALT、AST、TG、TC、TNFα及肝匀浆MDA、FFA均明显升高,而SOD明显低于NG组(P值均<0.05)。HG组与NG组相比,p-JNK1和JNK1的蛋白及自噬相关LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Atg3和Atg5蛋白水平升高(P值均<0.05)。且JNK1蛋白的表达与胰岛素抵抗呈正相关。CG组体质量、肝湿重及肝指数显著低于HG组;ALT、AST、TG、TC、TNFα及肝匀浆MDA、FFA比HG组均明显降低,SOD高于HG组;LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1、Atg3、Atg5表达均显著低于HG组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 CG在NAFLD大鼠模型中通过JNK途径失活抑制自噬来改善肝损伤和胰岛素抵抗,CG可能为治疗NAFLD的潜在手段。     

亚临床自然流产72例临床分析

亚临床自然流产（或称之为早早孕丢失）指妇女未知晓其怀孕以前发生的自然流产。2005年1月-2006年6月，我们收治亚临床自然流产孕妇72例，获得满意疗效，现分析如下。