粪便中TNFa作为肠道炎症的指标

至今尚无一种简便的用于评价慢性炎症性肠病的活动性的方法。结肠镜检查、对比放射造影、铟标记粒细胞扫描虽是可靠的评价炎症性肠病的几种方法,但均因操作复杂费时而无法在临床广泛应用。在炎症性肠病时,肠道炎症细胞可产生肿瘤坏死因子a(TNFa),血液中TNFa 浓度可升高,但因血液中TNFa 半寿期短及受体液稀释的影响而常常无法测出。为此作者测定了炎症性肠病儿童粪便中TN-Fa 含量,探讨粪便中TNFa 用于评价炎症性肠病活动性的可能性。病人及方法:活动性Crohws 病患儿13例,非活动性Crohws 病患儿13例,活动性溃疡性结肠炎儿     

骨髓涂片免疫组化在形态学难以诊断的急性白血病中的临床研究

目的 分析骨髓涂片免疫组化在急性白血病中的诊断价值.方法 采用骨髓涂片免疫组化,对40例形态学难以诊断的急性白血病进行免疫表型分析,与单独用形态学诊断的结果比对,对两种结果进行一致性检验有差异的与流式细胞仪分型对照.结果 骨髓涂片免疫组化的结果和FCM有较好的一致性,采用免疫表型分析的结果为临床诊断和预后提供了更有力的帮助,对M0和MAL的诊断有决定性的意义,较形态学诊断的结果更好.结论 骨髓涂片免疫组化在形态学难以诊断的急性白血病分型中有较好的临床价值,能更好地进一步分型.     

血清钙的偶氮胂Ⅲ测定法

为了消除偶氮胂Ⅲ在酸性条件下测定血清钙所引起的蛋白质沉淀，报道一种在碱性条件下用偶氮脾Ⅲ测定血清钙的方法。在碱性条件下钙与偶氮胂Ⅲ的络合物在６５０ｎｍ波长的摩尔消光系数大大增加。加入８－羟基喹啉－５－磺酸可避免镁的干扰。在血清胆红素高达５００μＬｍｏｌ／Ｌ、血红蛋白１２ｇ／Ｌ及脂肪乳剂Ｉｎｔｒａｌｉｐｉｄ高达１０ｇ／Ｌ时，均对本法无显著干扰。钙标准曲线在０～５．０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内线性良好。该法与邻甲酚酞络合酮测定法所得结果相关性好。     

骨髓涂片免疫组化在形态学难以诊断的急性白血病中的临床研究

目的 分析骨髓涂片免疫组化在急性白血病中的诊断价值.方法 采用骨髓涂片免疫组化,对40例形态学难以诊断的急性白血病进行免疫表型分析,与单独用形态学诊断的结果比对,对两种结果进行一致性检验有差异的与流式细胞仪分型对照.结果 骨髓涂片免疫组化的结果和FCM有较好的一致性,采用免疫表型分析的结果为临床诊断和预后提供了更有力的帮助,对M0和MAL的诊断有决定性的意义,较形态学诊断的结果更好.结论 骨髓涂片免疫组化在形态学难以诊断的急性白血病分型中有较好的临床价值,能更好地进一步分型.     

腹水中纤维结合蛋白及胆固醇浓度的鉴别诊断价值

癌性腹水与非癌性腹水的鉴别对疾病的进一步诊断及治疗有着重要的意义.本文作者测定了95例病人腹水中纤维结合蛋自(Fn)、胆固醇(Ch)和总蛋白浓度,评价了Fn 及Ch 测定对腹膜癌变腹水与肝     

基于性染色体定量检测的伴性遗传病无创性产前筛查方法的研究

目的：利用孕妇血浆游离DNA对产前胎儿性别进行识别,为伴性遗传性疾病的无创性产前筛查提供参考。方法利用X、Y染色体的特异性引物和探针构建识别胎儿性别的实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测技术,并对灵敏度、准确性等方法学指标进行评价,然后将构建好的方法用于24例未孕健康女性及临床上50例16～20孕周的孕妇血浆DNA的检测。结果在母体DNA胎儿Y染色体定性检测方法的灵敏度检测中,当胎儿DNA丰度为3％～6％时,母体DNA模板量下限是50 pg。当母体DNA模板量在0．5～50 ng时,Y染色体最低检测丰度为1％,相当于胎儿DNA丰度为2％;当母体DNA模板量在0．05～0．5 ng时,Y染色体最低检测丰度为2％～4％,相当于胎儿DNA丰度为4％～8％;当无母体DNA时,Y染色体模板量下限为0．5 pg。标本定量检测中妊娠女性的血浆DNA浓度明显高于未孕健康女性（P＜0．05）。50例孕妇静脉血标本中,除1例标本因提取失败未作检测外,其余49例标本初次试验在未考虑母体血浆DNA模板起始用量时,检测结果为17例男性,32例女性,与胎儿出生后性别不完全一致;但是当加大母体血浆DNA模板起始用量（＞50 pg）后,结果为23例男性,26例女性,准确率为100％。结论该试验所构建的利用母体血浆游离DNA进行的早期无创性产前筛查方法具有较高的准确性,可以为伴性遗传出生缺陷性疾病的早期筛查和预防提供重要的参考价值。     

采用通用引物PCR与机器码识别技术快速鉴定血液感染病原菌

目的 建立一种快速检测血液感染病原菌的方法.方法 选取7种常见血液感染病原菌,在其16S rRNA末端和23S rRNA始端的保守区设计通用引物,对16S-23S rRNA基因间区进行扩增,然后将PCR产物的电泳图谱进行机器码识别,以鉴定病原菌.结果 通用引物能扩增出7种病原菌,且每种菌具有不同片段长度(bp):大肠埃希菌(716、808),金黄色葡萄球菌(732、827),铜绿假单胞菌(833),表皮葡萄球菌(630、722、817),肺炎链球菌(606),肺炎克雷伯菌(550、705、797),粪肠球菌(591、693);此图谱可经机器码识别,对各种病原菌进行快速鉴定.结论 采用通用引物PCR和机器码识别技术可简便、快速、特异地鉴定常见血液感染病原菌.     

结核分枝杆菌Emb330codon分子信标杂交及荧光显微观测

目的 设计结核分枝杆菌耐乙胺丁醇embB330codon位点分子信标,运用荧光显微镜观测分子DNA探针与embB330codon扩增产物杂交后的荧光信号,比较该位点突变株与标准株.方法 运用软件Beacon designer设计embB基因包含330codon的分子信标,应用荧光显微镜检测embB330codon扩增片段与探针杂交后荧光信号,比较扩增产物测序结果.结果 通过荧光显微镜观测到结核标准株及embB330codon突变株PCR产物与探针杂交后荧光信号差异有统计学意义;33株耐乙胺丁醇组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,耐乙胺丁醇组embB330codon突变检出率为3%,测序法突变检出率为3%.结论 分子信标技术可以有效检测embB330codon单碱基靶点突变,应用荧光显微镜观测荧光杂交信号非常灵敏.     

人乳头状瘤病毒感染与子宫颈病变的关系探讨

目的 探讨不同程度的子宫颈病变患者的人乳头状瘤病毒(HPV)感染情况和HPV-DNA基因亚型分布.方法 选取在医院妇科取得宫颈脱落细胞及组织标本的患者550例,用核酸分子快速杂交技术进行HPV-DNA分型检测.结果 550例患者中,有270例(49.1%)HPV检测呈阳性,以16、52、58亚型最为常见,其中HPV16亚型84例(15.3%);270例阳性患者中,正常组91例(30.1%),宫颈上皮内瘤病变(CIN)I组57例(55.9%),CINⅡ组48例(72.7%),CINⅢ组18例(90%),宫颈癌组56(93.3%).结论 随着子宫颈病变级别及组织病理学级别的升高,高危型HPV感染的阳性率呈上升趋势.在妇科常规体检中应重视HPV特别是HPVl6型的感染监测.     

核酸探针长度对量子点微生物传感器的影响

目的探讨并明确量子点核酸传感器检测微生物核酸样本时探针长度对杂交效率和检测结果的影响。方法首先合成金黄色葡萄球菌16S rDNA探针,然后在其5′端添加不同长度的重复碱基序列,分别合成5条长度不同的以胸腺嘧啶结尾的探针;采用巯基法固定金黄色葡萄球菌16S rDNA探针于石英晶体微阵列上,并用石英晶体微天平(QCM)检测样品频率漂移量以判断不同核酸长度时的杂交效率,并用荧光显微镜观察形成不同双链复合物的荧光强度和荧光效率,以此判断不同碱基序列长度探针对荧光效率和杂交效率的影响,并运用SPSS软件对数据进行统计分析。结果对于普通的短链核酸杂交反应,随着探针长度增加,杂交效率呈现依次递增的趋势,当离子强度为40mmol/L时,杂交效率和荧光强度增加最快,其后再增加探针长度,杂交效率增加速度变缓。结论探针长度是影响杂交效率的主要原因之一,通过增加探针长度可以提高杂交效率和荧光强度,但同时也会增加二聚体产生概率,故应根据实际需要设计长度适合的探针。