传代培养密度对人间充质干细胞增殖及成骨分化的影响

背景：组织工程技术的快速发展为骨缺损完全再生修复带来了新的希望，种子细胞的快速扩增是其中的关键问题之一。 目的：观察人间充质干细胞传代培养时，细胞种植密度对间充质干细胞增殖及成骨诱导分化影响。 设计：重复测量设计。 单位：解放军第三军医大学细胞培养室和检测分析室。 对象：实验于2003-01／2004-03在解放军第三军医大学的创伤、烧伤和复合伤国家重点实验室完成。从5例男性健康志愿者髂骨骨髓中分离扩增的干细胞。 方法：将第2代间充质干细胞以8&;#215;10^3／cm^2，3&;#215;10^3／cm^2，8&;#215;10^2／cm^2密度接种。分析其生长曲线，并扩增培养18d，记录细胞扩增数量，再分析扩增后细胞的生长曲线和成骨诱导能力。 主要观察指标：①不同种植密度下细胞生长曲线。②碱性磷酸酶染色和骨钙素的免疫组化染色结果。 结果：人骨髓间充质干细胞阴性表达碱性磷酸酶、CD34；在8&;#215;10^3／cm^2种植密度下，细胞倍增时间40h，18d后细胞数量扩增（51&;#177;13）倍；在3&;#215;10^3／cm^2种植密度下，细胞扩增（28&;#177;6）倍；在8&;#215;10^2／cm^2种植密度下，细胞总数仅增加（5&;#177;3）倍。在低密度下获得的细胞增殖能力强于高密度组，两组细胞均具有成骨诱导能力。 结论：种植密度对间充质干细胞增殖有明显影响，快速扩增间充质干细胞作为骨组织工程种子细胞，宜选择8&;#215;10^3／cm^2种植密度。     

间充质细胞与骨组织共培养条件下的成骨特性

目的：在与骨组织间接共培养的条件下，观察体外培养的兔骨髓间充质干细胞的成骨特性。方法：通过间接共培养模型的建立，将新鲜兔骨碎粒及骨块与BMSCs间接共培养，观察细胞的形态学变化，碱性磷酸酶（ALP）的活性及矿化能力，免疫组化检测Ⅰ型胶原、骨钙素。结果：共培养的BMSCs同期ALP活性及细胞的矿化能力均显著高于普通培养组(P&;lt;0．01)；经过共培养的BMSCs，其Ⅰ型胶原、骨钙素免疫组化阳性；对照组Ⅰ型胶原免疫组化弱阳性、骨钙素免疫组化阴性。结论：体外建立的共培养模型部分模拟了体内成骨环境，经过共培养的BMSCs呈现向成骨细胞转化的特点。     

瑞舒伐他汀钙对脑梗死患者动脉粥样硬化及脑血流动力学的改善作用研究

目的探讨瑞舒伐他汀钙对脑梗死患者动脉粥样硬化及脑血流动力学的改善作用。方法将2014年1月至2015年6月于该院就诊的脑梗死确诊患者100例分为对照组和试验组,每组各50例。所有患者均给予常规治疗,试验组患者在常规治疗基础上口服瑞舒伐他汀钙。比较不同治疗方案对颈内动脉粥样硬化斑块及脑血流动力学的影响。结果治疗后,试验组不稳定动脉粥样硬化斑块检出率小于对照组(P0.05));试验组和对照组患者血流动力学均有所改善,试验组改善更显著,血流动力学指标组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论瑞舒伐他汀钙可稳定和逆转动脉斑块,减少动脉粥样硬化发病率,改善脑梗死患者脑血流动力学指标,降低不良事件发病率,值得推广应用。     

中国遗传性多发性骨软骨瘤的临床资料及突变检测1例报告

目的 通过对 1例中国遗传性多发性外生骨软骨瘤 (hereditary multiple exostosis, HME) 家系临床资料的整理及在 EXT1 8q23～ 24.1, EXT2 11p11～ 12的基因编码序列进行突变检测,寻找 HME 的致病基因,为发现该病临床表现的遗传学特点及发现新的基因突变以期待此研究可能预防遗传性多发性外生骨软骨造成患者肢体功能残存的发生. 方法 在 EXT1、 EXT2基因内设计引物,经 PCR和 DNA测序对基因编码序列及其临近内含子进行突变检测. 结果 在 EXT1、 EXT2的编码序列内没有发现突变. 结论 排除了 EXT1、 EXT2为该遗传性多发性外生骨软骨瘤家系治病基因的可能,为进一步研究发现新的基因突变提供了可能.     

幼女右附件嵌顿疝1例

患儿女 18个月 ,因先天性右侧腹股沟可复性肿块 ,不能还纳 5ｈ ,于 1996年 2月 11日入院。患儿系自出生后 ,每次哭闹时即可见右侧腹股沟有一肿块 ,初始约花生米大 ,以后逐渐增大 ,均能自行消失 ,5ｈ前因哭闹不休 ,腹股沟肿块增大 ,不能还纳急症入院查体 :生命体征平稳 ,发育正常。腹平坦、软、无压痛反跳痛 ,右侧腹股沟扪及 4ｃｍ× 3ｃｍ× 3ｃｍ肿块 ,质硬 ,压痛明显 ,不能手法还纳。血、尿常规、出凝血时间均无异常。即刻在全麻下手术。术中见 :疝囊严重充血肿胀 ,右侧输卵管及卵巢嵌顿于右侧腹股沟管内 ,呈暗黑色 ,已坏死。改腹部正中切…     

三维CT评估发育性髋关节脱位的骨性形态学特征

目的:通过使用CT三维测量髋臼发育情况及髋臼对股骨头覆盖率对比性观察,整体反映髋臼发育情况。方法:①观察对象:选择2003-06/2005-04对41例发育性髋关节脱位患者55个髋关节。其中男12例,女29例;年龄18个月～6岁。患髋右侧23例,左侧32例,其中双侧12例。健康侧27髋。患儿家属均知情同意。②实验方法:所有患儿使用PQ6000型多层螺旋CT扫描,扫描数据进行骨组织三维重建。将测量数据制成图表,显示三维的髋臼发育情况,并量化表示髋臼的缺损情况。③实验评估:计算不同截面正常侧髋臼指数、中心边缘角(假设符合正态分布)的均数、标准差、分布范围及95%可信区间。观察发育性髋关节脱位术前术后骨骼形态学变化。分别在术前、术后测量患者患侧髋臼指数、中心边缘角和前倾角,测量值均分别与正常值进行对比。结果:患侧55个髋,健康侧27髋,均进入结果分析。①发育性髋关节脱位术前术后骨骼形态学变化:术前55侧发育性髋关节脱位髋关节脱位程度为,参照T"nnis分类方法,Ⅰ度5髋(9.1%),Ⅱ度11髋(20%),Ⅲ度32髋(58.2%),Ⅳ度7髋(12.7%)。术后患者均表现髋臼α角均>90°,头臼呈同心圆对位,Shenton线连续,股骨头较术前明显发育,原先未出现头骺的患者,出现头骺,但较正常仍偏小;髋臼口呈类圆形,髋臼边缘欠光滑,髋臼整体呈一定程度前倾。②术前术后髋臼指数、中心边缘角和前倾角变化对比:术后患者的髋臼指数和前倾角与正常对照组之间差异无显著性(P>0.05),术后患者的中心边缘角大于正常对照组[(33.4±2.6)°(29.1±2.0)°,P<0.01],术后患者的髋臼指数和前倾角测量值均小于术前(P<0.01)。结论:介绍了一种对髋臼形态测量的新方法,它能够全面反映髋臼的发育情况,不但增加了对中心边缘髋臼病理改变的认识程度,还为手术提供了精确的可信度较高的矫形设计方案。     

二醋吗啡注射致破伤风11例

注射二醋吗啡(海洛因)而感染破伤风杆菌的临床病例并不罕见，破伤风与毒品戒断症状同时出现时，患病情复杂多变，处理不当则易发生严重并发症，甚至死亡。近3年来收治因注射海洛因致破伤风11例，就其临床特点及抢救事项进行探讨。     

马来酸桂哌齐特注射液治疗糖尿病周围神经病变临床观察

目的观察马来酸桂哌齐特注射液治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的临床疗效和安全性。方法选择50例2型糖尿病周围神经病变患者,随机分为观察组和对照组各25例,观察组采用马来酸桂哌齐特注射液治疗,对照组给予红花注射液,比较2组疗效。结果经14d治疗,观察组总有效率96.0%,明显高于对照组的72.0%,差异有统计学意义(P<0.01)。疗程结束后,2组患者正中神经、腓总神经MCV和SCV得到改善(P<0.05),但观察组患者改善幅度更显著(P<0.01)。2组患者治疗前后血糖及肝、肾功能各项指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论马来酸桂哌齐特注射液对DPN具有较好的临床疗效,且无明显不良反应,安全性高,值得临床推广应用。     

金属对金属大头径微创全髋关节置换术治疗青中年股骨头坏死的临床研究

目的探讨金属对金属（金对金）大头径假体微创全髋关节置换术（THA）治疗青中年股骨头坏死Ⅲ、Ⅳ期的临床疗效。方法本组32例（35髋）青中年股骨头缺血性坏死Ⅲ、Ⅳ期患者,年龄24～59岁,平均45岁,术前髋关节Harris评分平均（37．9±7．5）分;以改良后外侧小切口、肌间隙人路、充分保留关节动力性组织结构为特征的金对金大头径微创THA治疗。术中严格采取正确的假体植入技术,术中保留完整的软骨下骨和髋臼横韧带,击入臼杯时一次性安装成功,正确运用万古霉素预防感染。术后口服利伐沙班片抗凝,术后12h开放负压引流及卧床行功能锻炼,术后第2天拔除引流管后扶拐下地部分负重行走,术后2—3周患者即可弃拐完全负重行走。结果本组32例35髋患者均获随访,随访时间为12个月～6年,平均为4年。所有患者切口均一期愈合,无深静脉血栓形成、关节脱位、坐骨神经损伤、髋臼及股骨疲劳骨折、关节疼痛等严重并发症,X线片示髋关节假体位置均良好,无松动、移位、股骨柄下沉、假体周围骨折等表现。末次随访Harris评分由术前平均（37．9±7．5）分,提高至术后平均（92．2±4．6）分,前后比较有统计学意义（t=44．341,P〈0．05）。所有患者末次随访时髋关节功能明显优于术前,均对治疗效果满意,完全恢复正常生活及工作。结论采用金对金大头径微创THA治疗青中年股骨头坏死Ⅲ、Ⅳ期患者,能够明显降低手术风险,缩短卧床时问,迅速恢复髋关节功能,减少手术并发症,取得了满意的近期临床疗效。随着基础和临床研究的不断深入,金对金大头径髋关节假体的长期疗效还需要进一步探讨。     

转化软骨细胞与正常软骨细胞的生物特性比较

目的比较转化人关节软骨细胞与正常软骨细胞之间的生物特性。方法观察两者的细胞形态、细胞的生长曲线、血清依赖性、染色体检查、软琼脂克隆形成试验、裸鼠致瘤性。结果转化软骨细胞更趋向于长梭形。两者的生长曲线比较相似,但转化软骨细胞的饱和密度要明显高于正常软骨细胞。两者都对血清有依赖性,都为二倍体核型,均不能在软琼脂上形成克隆。经6个月观察两者都不能使裸鼠致瘤。结论转化软骨细胞的生长速度要高于正常软骨细胞。转化软骨细胞为良性转化。