第三方医学实验室专业人才培养的初步分析与探讨

2009年12月4日卫生部颁布了《医学检验所基本标准(试行)》,首次将第三方医学独立实验室正式定义为医疗机构[1],事实证明,社会化服务的第三方医学实验室在节省卫生资源、补充医院实验项目、开展高新技术、提供快捷服务等方面得到了社会、医院和患者的认同,使其成为独立于公立医院之外的医学诊断服务平台[2]。同时,我国卫生行政部门也对第三方医学独立实验室的准入者设立了相对较高门槛[3,4]。其中,具备相应资质的专业人才是不可或     

莱菔硫烷对铝及D-半乳糖联合染毒小鼠阿尔茨海默病样损伤的干预作用研究

目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对铝及D-半乳糖联合染毒小鼠阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)样损伤的干预作用,为防治AD提供理论依据。方法健康成年昆明种小鼠按体重随机分为3组,每组18只,雌雄各半。模型组和干预组小鼠饮用含铝水(浓度为0.4 g/100 ml),并隔日皮下注射200mg/kg D-半乳糖。干预组小鼠灌胃给予25 mg/kg SFN 1/d,模型组小鼠灌胃等量蒸馏水,同时设立溶媒对照组,连续处理90 d。采用Morris水迷宫测定小鼠的学习记忆能力,免疫组织化学染色法检测脑组织β-淀粉样肽(Aβ)沉积,分光光度法检测大脑皮质丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,Real-time q RT-PCR法检测大脑皮层Cu-Zn SOD、GSH-Px m RNA的表达水平。结果与对照组比,模型组小鼠学习记忆能力下降,海马、大脑皮质Aβ斑块数量增多,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组比,干预组小鼠学习记忆能力增强,海马、大脑皮质Aβ斑块减少,差异均有统计学意义(P0.05)。模型组和干预组小鼠大脑皮质SOD活性及SOD m RNA水平高于对照组,差异均有统计学意义(分别为P0.05,P0.01);干预组小鼠大脑皮质SOD活性及SOD m RNA水平与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05)。各组小鼠大脑皮质MDA、GSH含量,活性及GSH-Px m RNA水平,差异均无统计学意义(P0.05)。结论 SFN可减少铝及D-半乳糖联合染毒小鼠脑内的Aβ斑块沉积,改善其学习记忆能力;SFN是否通过氧化应激影响AD有待深入研究。     

PCR实验加样器污染的解除方法及污染对微孔板杂交的影响

经多年来的分子生物学实验证实尿苷酶（UDG）是当前抗污染非常有效的试剂，在国家批准的体外诊断试剂中应用UDG抗污染已程序化。随着分子生物学学科发展。聚合酶链反应已在多学科的多项研究中推广和应用。而其预防污染和抗污染研究工作依然极其重要。2000年我所曾对聚合酶链反应污染环节进行详细的分析和研究。     

出汗太多别急着行房

有哪个季节比夏天更富有激情：阳光打造出古铜晶亮的胴体：薄纱勾勒出惹火动人的曲线，充满挑逗的意味：光照甚至会抑制大脑内褪黑素的释放，使人兴奋度增高，让夫妻的亲昵变得更加自然、热情。     

乙型肝炎前S1抗原与HBV-DNA、HBeAg的关系及其临床价值

目的探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)的相关性。方法对350例乙型肝炎患者血清进行酶免法(EIA)检测前S1抗原、HBeAg,定量PCR内标法检测HBV-DNA。同时对检测乙型肝炎病毒血清标志物均阴性的52例正常健康人血清也进行前S1抗原检测。结果350例HBV-DNA阳性的乙型肝炎患者中,HBeAg阳性率为85.1%,前S1抗原的阳性率为79.1%,其中前S1抗原的阳性率在HBeAg阳性患者中为79.2%。HBV-DNA阳性情况下,HBeAg阳性与HBeAg阴性患者的前S1抗原阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论前S1抗原、HBeAg与HBV-DNA符合率较高,前S1抗原与HBeAg无明确相关。对无条件检测HBV-DNA而HBeAg阴性患者的血清,检测前S1抗原,可起到提示病毒是否复制的补充作用。     

小鼠SRY同源盒基因SOX1的克隆及其真核表达载体pEGFP-C_3-SOX1的构建

目的:克隆小鼠SRY同源盒基因SOX1的全长cDNA,构建其携带增强型荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-C3-SOX1,为进一步研究SOX1在间充质干细胞神经分化中的作用奠定基础。方法:采用RT-PCR方法从小鼠早期胚胎中扩增带有EcoRⅠ和HindⅢ双酶切位点的SOX1 cDNA片断,与pGEM-T载体连接后转化感受态细菌JM109,然后通过蓝白筛选、酶切技术筛选、鉴定出阳性菌落并进行DNA测序。用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切获得目的片断,再与EcoRⅠ和HindⅢ双酶切过的pEGFP-C3质粒相连接,重组子转化JM109感受态大肠杆菌,酶切方法鉴定阳性菌落。结果:多酶切及DNA测序结果表明提取及纯化的pEGFP-C3-SOX1质粒含有SOX1 cDNA碱基片段,方向及大小正确。结论:从小鼠胚胎中可成功克隆SOX1全长cDNA,并构建其真核表达载体pEGFP-C3-SOX1。     

免疫磁珠分选兔前软骨干细胞及细胞研究平台的建立

[目的]研究兔前软骨干细胞PSCs,(precartilagious stem cells)的分离、培养方法及增殖、表型特征,为细胞移植治疗椎间盘退变,提供合适的种子细胞.[方法]取胎兔骨骺周围软骨膜(LaCroix环)中的细胞进行原代培养,然后采用免疫磁珠分离系统分选纯化PSCs.体外培养,传代,冻存复苏,绘制生长曲线,观察细胞特性.分别采用免疫组化、免疫荧光、RT-PCR等方法鉴定纯化后的PSCs.[结果]免疫磁珠分离可获得纯度较高的兔PSCs,培养后成活率高,细胞状态良好.细胞冻存复苏后,细胞增殖速度、细胞形态及表面标志物无明显变化.免疫组化、免疫荧光、RT-PCR等方法鉴定后,细胞都有明显的PSCs表面特异性标记物的表达.[结论]PSCs存在于LaCroix环中,免疫磁珠分离法得到的PSCs,体外培养条件下,细胞增殖较快,生物学特性稳定.     

低碘膳食对大鼠脑组织同源盒基因Nkx-6.1和Nkx-6.2 mRNA表达的影响

Objective To study the influence of low-iodine diet on the expression of homeobox gene Nkx-6.1 and Nkx-6.2 in rat cerebrum tissue, and to explore the possible molecular mechanism of cerebrum development retardation caused by low-iodine. Methods Twenty female Wistar rats were randomly equally divided into two groups: low-iodine group and control group, both fed with low-iodine diet as low as 13.66 μg/kg determinated by spectrophotometry in Tianjin Institute of Endocrinology and the former with deionized water, the later 200 μg/L potassium iodate. Thyroid hormone level was detected using chemiluminescence immunoassay 3 months later and they were mated with male rats normally fed. Rats of 16-day pregnancy, new-born and 20th days old were detected the content of Nkx-6.1 and Nkx-6.2 mRNA in the cerebrum tissue by real-time fluorescence quantitative PCR 0.61), (3.28±0.80)pmol/L] were lower than the control group[(1.04±0.06), (39.42±14.68)nmol/L, (4.83±0.33), day pregnancy, new-born and 20th days old of control group was (1.90±0.23)×10-3,(1.86±0.40)×10-4, (1.11± 0.27)×10-4(F=827.58, P<0.01), Nkx-6.1 mRNA expression level gradually decreased along with aging(all P<0.05). The intra-group difference was significant (F=297.25, P<0.01) and the Nkxr.1 mRNA expression level during 16 days of pregnancy was the highest(P<0.01). It was higher in the control group than in the low-iodine group during 16 days of pregnancy (t=10.14, P<0.01) as well as in the low-iodine group than in the in 16-day pregnancy, new-born and 20th days old of control group was respectively(1.03±0.19)×10-2, (1.33± 0.10)×10-3, (8.79±0,87)×10-3, and that of low-iodine group was (0.31±0.03)×10-2, (1.53±0.13)×10-3, (7.51±0.86)×10-2. The intra-group difference was significant(F=1293.02,1065.83, all P<0.01). Nkx-6.2 expression level during 20th days old was the highest(P<0.01) and that of newborn was the lowest(P<0.01). The Nkx6.2 mRNA expression level in control group were higher than the low-iodine group during 16-day pregnancy and 20th days old(t=14.35, 4.05, all P<0.01). It was higher in the low-iodine group than in the control group during newboru(t=4.78, P<0.01). Conclusions The difference in the expression of Nkx-6.1 and Nkx-62 is highly related to the brain development retardation caused by low-iodine.     

短暂性脑缺血发作及脑梗死与血清幽门螺杆菌抗体的相关性

目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与短暂性脑缺血发作(TIA)及脑梗死的关系.方法 应用酶联免疫法(ELISA)检测80例脑梗死患者和80例短暂性脑缺血发作患者以及60例健康对照者血清Hp-IgG以及细胞毒素相关蛋白A抗体IgG(CasA-Hp-IgG)阳性率,同时检测血清TC、TG、Apo-A、Apo-B、HDL-C、LDL-C水平.结果 脑梗死组及TIA组血清Hp-IgG阳性率分别为65.40%和67.90%,cagA-Hp-IgG阳性率分别为52.56%和50.23%,均显著高于健康对照组的47.15%和35.20%(P<0.05).脑梗死Hp-IgG阳性与阴性者间TG水平有统计学差异(P<0.05).结论 Hp感染与TIA发作及脑梗死的发病密切相关,并可能影响血脂水平.     

循证医学与医院图书馆工作

循证医学(evidenced-based medicine,EBM)是20世纪80年代在国际上迅速发展起来的一种新的临床医学模式.循证医学与传统医学最大的区别在于临床医师在制定医疗决策时既重视已有的个人临床经验,同时又强调采用现有的、最好的、客观的研究依据,两者缺一不可.