三维重建技术在腓肠肌皮瓣临床手术中的应用

目的 探讨腓肠肌皮瓣的三维重建技术在临床中的初步应用.方法 2007年至2008年间.对需腓肠肌皮瓣创面修复的7例患者,术前注射造影剂后采用CT或MR扫描,应用Amira4.1软件对腓肠肌皮瓣结构进行三维重建.构建患者个性化皮瓣.根据患者创面缺损大小,进行个性化皮瓣三维构建,于患者小腿部后侧进行腓肠肌皮瓣的点、线、面描记,用以指导手术切取.结果 三维重建患者个性化皮瓣7例,所重建个性化腓肠肌皮瓣,能够清晰显示血管、皮肤及其毗邻结构的三维关系.并根据术前创面缺损大小,对皮瓣进行精确设计.其中6例病人所显示的皮瓣主要穿支及主干.与术中检查相符;1例显示皮瓣主干血管.但穿支显示不清,术中探查穿支血管平均约0.5 mm.最小穿支均小于0.3mm.术后7例皮瓣全部成活.结论 通过血管造影下肢CT或MR扫描,采用数字化三维重建技术可以提供腓肠肌皮瓣的三维动态解剖,重建的肌皮瓣能够地准确标示术中切取范围.避免术中血管的副损伤,保证了皮瓣较好的存活率.     

三种游离穿支皮瓣修复足背及前足组织缺损

目的探讨游离膝降动脉穿支皮瓣、隐动脉穿支皮瓣及股前外穿支皮瓣修复足背及前足软组织、复合组织缺损的疗效。方法纳入2010年8月至2014年10月35例足背及前足组织缺损患者,创面面积为9 cm×4.5 cm~26 cm×13 cm。采用游离膝降动脉穿支皮瓣修复12例(A组),游离隐动脉穿支皮瓣修复8例(B组),游离股前外穿支皮瓣修复15例(C组)。若为开放性损伤,则在皮瓣移植术前应用负压封闭引流装置覆盖5~7 d。结果术后34例皮瓣全部成活,仅1例(女童,7岁)股前外穿支皮瓣远端1/3坏死,2周后经削痂植皮后创面愈合。术后随访3~38个月,平均12.3个月。皮瓣修复后外形大多令人满意,术后3个月A组有3例、B组有2例进行二次修薄手术。A组有1例出现小腿持续肿胀,1例出现供区切口愈合不良;B组有5例出现供区肢体持续肿胀,3例出现供区切口愈合不良,4例供区远端出现皮疹。结论游离膝降动脉穿支皮瓣及游离隐动脉穿支皮瓣修复后大多需行二次修薄手术。游离股前外穿支皮瓣质地好,切取面积大,可避免二次修薄手术,受区影响较小,但仅可用于单纯足背或前足软组织覆盖。游离膝降动脉穿支皮瓣可制备皮-骨或皮-肌(肌腱)复合瓣用于修复足部复合组织缺损。     

不同浓度5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记山羊骨髓基质干细胞的体外研究

Objective To explore the feasibility of labeling and tracing in vitro goat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) by bromodeoxyuridine (BrdU) on the basis of investigation of its optimal concentration, incubating time and cytotoxicity. Methods A healthy goat, aged 10 months old, male, weighing 32 kg, was used in this study. Bone marrow was aspirated. BMSCs were isolated and cultured using the adherence method in vitro. The fourth passage of BMSCs (P4) were incubated with BrdU at 5, 10, 15, 20 μmol/L as 5, 10, 15, 20 μmol/L BMSC groups. Cells were not labeled by BrdU as negative control. The following parameters were measured: induction, differentiation and determination of goat BMSCs; the optimal mass concentration and incubation time of 5-BrdU labeling; cell positive rate at 12, 24, 48 and 72 hours in each group using immunofluoreseenee; the cell survival rate after various concentrations of BrdU ladling by trypan-blue exclusion. Results The morphology of the primary and passage goat BMSCs was fusiform in shape. Goat BMSCs could differentiate into osteoblasts and chondrocytes following induction. BMSC nucleus showed green fluorescence under fluorescence microscope after being labeled by BrdU. The mean labeling rate increased with the increase in the concentration and incubation time of BrdU, and reached to (93.32± 3.25)% after incubation in 15 μmol/L, BrdU for 48 hours. There were no significant differences between 15 μmol/L BrdU for 72 hours, 20 μmol/L BrdU for 48 hours and 72 hours (P > 0.05), or between the other groups or time points (P < 0.05). The labeling rate of the blank control group was 0. The cell survival rate was all above 90% (P > 0.05). Conclusions BrdU can be used as a labeling marker for goat BMSCs. When the concentration is 15 μmol/L and the incubation time is 48 hours, the optimal labeling effect can be achieved. Goat BMSCs labeled with BrdU is of high efficiency and safety.     

脱蛋白骨复合纤维蛋白胶构建骨组织工程支架的体外实验研究

[目的]探讨复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨与单纯脱蛋白骨作为骨髓基质干细胞（MSCs）支架材料的差异，为骨组织工程提供合适的复合支架材料。[方法]实验组使用复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨与MSCs复合培养，对照组用单纯脱蛋白骨与MSCs复合培养，取不同时间点进行光学显微镜观察、扫描电镜观察、细胞DNA含量检测及钙结节染色比较两组细胞的情况。[结果]实验组骨髓基质干细胞在黏附能力与分泌情况明显优于对照组，细胞DNA检测表明实验组细胞增殖明显优于对照组（P〈0．05）。[结论]复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨比单纯脱蛋白骨更适合细胞生长，可作为MSCs的载体应用于骨组织工程的构建。     

CPM机在断指再植术后功能锻炼中的应用

目的 探讨断指再植手术治疗后患指使用CPM机进行功能锻炼的恢复效果.方法 2004年1月至2006年12月,对32例患者44指离断伤行断指再植术治疗,其中20例术后使用CPM机进行功能锻炼,12例术后未使用CPM机进行功能锻炼.观察手指功能的康复情况. 结果 32例患者术后获6～14个月(平均10个月)随访,患指全部成活.20例使用CPM机患者与12例末使用CPM机患者均纳入结果分析.运用顾玉东断指再植评定标准,使用CPM机组共20例26指,优6指,良13指,可4指,差3指,优良率为73.1%;未使用CPM机组共12例18指,优2指,良7指,可5指,差4指,优良率为50.0%. 结论断指再植术后2～12周使用CPM机进行功能锻炼,早期可以减轻疼痛,防止术后粘连,促进指间关节的功能恢复.     

低温热塑材料支具治疗锤状指

外伤性锤状指畸形为临床常见手部疾病,主要是手指伸肌腱I区断裂或撕脱引起的远侧指间(distal interphalanlgeal.DIP)关节不能伸直,外型呈屈曲畸形.     

三维重建与逆向工程技术设计半髋关节表面置换定位导航模板

目的 利用三维重建与逆向工程技术为半髋关节表面置换提供一种精确匹配的方法. 方法 正常健康志愿者骨盆连续螺旋CT扫描,将原始.dicom格式数据导人Amira 3.1(TGS)软件,三维重建髋关节模型,以.stl格式保存,导入Imageware 12.0软件,确定模型的重心点,设计股骨假体的最佳固定方向,提取股骨头表面解剖学形态,建立与股骨头解剖学形态一致的模板,拟合模板和股骨假体柄孔道成定位模板. 结果 重建的导航模板有较好的匹配性. 结论 通过三维重建与逆向工程分析构建的定位导航模板可以为半髋关节表面置换股骨假体的定位、定向提供有利的帮助.     

利用加压骨片针治疗RockwoodⅡ型肩锁关节脱位

目的采用加压骨片针治疗RockwoodⅡ型肩锁关节脱位，评价其治疗效果。方法采用加压骨片针治疗RockwoodⅡ型肩锁关节脱位12例，按Karlsson标准进行疗效评价。结果肩关节功能评价A级11例，B级1例，无再脱位发生，患者均恢复正常生活和工作。结论加压骨片针治疗RockwoodⅡ型肩锁关节脱位具有操作简单、复位好、固定可靠、内固定物取出便捷等优点，是治疗RockwoodⅡ型肩锁关节脱位的一种有效方法。     

数字化技术设计腰椎椎弓根固定定位导航模板

目的 利用数字化技术为椎弓根固定定位提供一种精确匹配的方法. 方法 选择正常成人腰椎CT连续断层扫描数据集,将断层扫描数据导入Amira 3.1软件,三维重建L2椎体数字解剖模型,然后将三维重建模型导入Imageware 10.0软件,确定椎弓根位置,获取椎弓根点云轮廓,确定通道最大安全区、方向轴,设计钉道,提取椎体后部部分表面形态解剖结构及钉道模型,最后导入RapidForm 2004软件,建立与模型形态一致的定位导航模板. 结果 通过数字化重建技术得到了腰椎个体化导航模板的制作方法,重建的导航模板有较好的匹配性. 结论 利用数字化技术重建的导航模板为腰椎椎弓根的定位、定向固定提供了一种新的方法.     

两种非接触共培养方法诱导山羊BMSCs向成软骨细胞分化的实验研究

【摘要】 目的 本文探讨利用两种非接触共培养方法诱导山羊骨髓基质干细胞（Bone marrow stem cells,BMSCs）向成软骨细胞分化的方法和可行性。方法山羊髂后上棘穿刺取骨髓进行BMSCs的培养、扩增、鉴定,软骨细胞取自山羊的最后一根肋骨游离缘,采用Transwell共培养板法和三维立体共培养方法进行非接触共培养,Transwell 共培养板法共培养分三组,分别为BMSCs不诱导组、BMSCs仅由成软骨诱导培养液诱导组和BMSCs经transwell板共培养诱导组。三维材料中立体非接触共培养法分为24孔板底有软骨细胞的实验组和无软骨细胞的对照组,负载BMSCs的PLGA材料悬浮在24孔板中。在第3周分别通过甲苯胺蓝染色（Toluidine blue staining）、阿利新蓝染色（Alican blue staining）、II型胶原免疫荧光（collagen II immunofluoresence）、II型胶原免疫组化（collagen II immunochemical staining）进行组织学鉴定,在第2周进行collagen II、COL2a Q-PCR进行成软骨的鉴定,同时做collagen I 和osteopontin的QPCR检测成骨基因表达。结果 从山羊髂后上棘分离出的细胞增殖迅速,第四代时鉴定表明所获取的细胞具有干细胞特征。软骨细胞增殖至第三代时形态去分化表现不明显。甲苯胺蓝染色、II型胶原免疫荧光及PCR结果显示两种共培养方法诱导的BMSCs均有成软骨表现,在Transwell板共培养法时共培养诱导BMSCs成软骨效果稍弱于成软骨诱导液,无论是成软骨诱导液组还是共培养组都发现成骨基因osteopontin表达也有上调 。结论 采用两种非接触共培养方法均能促进山羊BMSCs向成软骨细胞分化,但是Q-PCR提示存在成骨风险。