163例出生缺陷原因及干预措施的分析

目的分析出生缺陷发生原因及干预措施。方法1991～2007年16年间本院出生缺陷儿163例,对产妇年龄、居住地区、文化程度、不良嗜好、不良孕产史5个方面进行统计并分析。结果163例中产妇年龄:20～30岁121例,30～40岁40例,40～50岁2例;农村33例,城市130例;文化程度:小学20例,初中83例,大学以上60例;产妇不良嗜好7例,占4%;不良孕产史31例,占19%。结论通过出生缺陷原因分析,强调加强优生优育宣教和孕期保健、出生缺陷的早期诊断和治疗是降低出生缺陷发生、提高生存质量的重要措施。     

县级卫生执法监督机构面临的困境和对策研究

目的探讨县级卫生执法监督机构建设。方法系统分析县级卫生执法监督机构存在的执法主体与执法队伍相分离、卫生监督力量薄弱、职责职能不明确等主要问题和产生的原因。结果对进一步加强基层卫生执法监督工作提出了相应的建议和对策。     

大鼠场景性恐惧记忆再激活过程中海马HDAC2的表达变化

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)在场景性恐惧记忆再激活过程中的表达变化。方法:对大鼠进行不可逃避的电击刺激与中性刺激(训练环境)联结匹配训练,建立大鼠场景性恐惧条件化模型,之后采用免疫组织化学、Western Blot和RT-PCR方法检测实验组(恐惧记忆唤起后30 min、2 h、6 h、24 h组和不进行恐惧记忆唤起的no-recall组)和对照组(与实验组相同的处理方式但没有足底电击的刺激)大鼠海马中HDAC2的表达变化。结果:免疫组织化学、Western Blot和RT-PCR方法检测结果均显示场景性恐惧记忆唤起后30 min与24 h,HDAC2在大鼠海马中的表达水平明显高于对照组,差异具有统计学意义。其它时间点及no-recall组HDAC2的表达与对照组相比,没有统计学意义。结论:场景性恐惧记忆唤起后30 min与24 h,HDAC2在大鼠海马中表达水平显著升高,此变化可能与恐惧记忆产生的相关行为(恐惧记忆的消退行为、焦虑行为等)有一定的联系。     

微卡联合化学治疗初治涂阳肺结核临床观察

目的 评价微卡治疗初治涂阳肺结核的临床疗效.方法 166例初治涂阳肺结核患者,随机分为治疗组(A组)和对照组(B组)各83例,均采用2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗,A组加用微卡治疗.观察治疗后痰菌阴转、肺部病灶吸收及空洞闭合情况.结果 治疗1～2个月痰菌阴转率A组显著高于B组(P＜0.05),治疗3～6个月痰菌阴转率A组与B组比较,差异无统计学意义(P＞0.05);疗程结束时,胸部病灶显著吸收率:A、B两组分别为88.0％和73.5％;空洞闭合率:A、B两组分别为85.7％和59.4％,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 微卡联合化学治疗初治涂阳肺结核能加快痰菌阴转,促进肺部病灶吸收及空洞闭合,其不良反应小,使用安全,费用低,值得临床推广使用.     

骨痨敌联合化学治疗初治菌阳肺结核临床观察

目的评价骨痨敌注射液治疗初治菌阳肺结核的临床疗效。方法 128例初治菌阳肺结核患者,随机分为2组,均采用2HRZE（S）/4HR方案治疗。A组加用骨痨敌治疗,观察治疗后肺部病灶吸收,痰菌阴转情况。结果治疗1～8周痰菌阴转率A组显著高于B组,（P〈0.05）,治疗2～6个月痰菌阴转率A组与B组无明显差异,（P〉0.05）;疗程结束时胸部病灶显著吸收率：A、B2组分别为87.5%和73.4%,空洞闭合率A、B2组分别为84.4%和67.2%,2组比较存在显著差异。结论骨痨敌注射液联合化学治疗初治菌阳肺结核患者能提高痰菌转阴率,促进肺部病灶吸收,其副作用低,作为中药制剂使用安全,值得临床使用。     

NT3基因的克隆、鉴定及高表达胚胎干细胞的构建与筛选

目的从小鼠肝脏组织中克隆神经营养因子NT3基因,在此基础上构建能稳定表达NT3的MESPU35细胞株.方法RT-PCR扩增目的基因,克隆入穿梭载体pExchange-1neo,酶切及测序鉴定.重组载体转染MESPU35胚胎干细胞株,G418长期筛选,RT-PCR检测转染细胞NT3水平.结果RT-PCR得到长度为777bp的基因片段,克隆后酶切鉴定正确,测序结果经BLAST对比,与GenBank中小鼠NT-3序列完全一致.成功构建了NT3真核表达载体及高表达细胞株.结论从小鼠肝脏组织中PCR克隆了正确的NT3基因,所获得的NT3稳定表达MESPU35-NT3细胞株为后续相关实验提供了保证.     

HEPC1和HEPC2真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

目的构建小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,并观察其分别稳定转染NIH3T3细胞后的表达情况.方法从小鼠肝组织中分离总RNA,采用RT-PCR获得小鼠HEPC1和HEPC2基因全长cDNA,分别将其克隆至真核表达载体pcDNA3上,酶切和测序鉴定后,用脂质体将重组子分别转染至NIH3T3细胞中,G418进行长期筛选,然后用RT-PCR和dot-ELISA检测HEPC1和HEPC2的表达.结果RT-PCR获得预期大小的片段,重组子pcDNA3-HEPC1和pcDNA3-HEPC2酶切正确,测序表明HEPC1有1个碱基与GenBank中报告的不同,但其位于密码子的第3位在此不改变编码的氨基酸,HEPC2则完全与GenBank中报道的一致,经RT-PCR和dot-ELISA检测HEPC1和HEPC2在其稳定转染的NIH3T3细胞中均有表达.结论成功构建了小鼠HEPC1和HEPC2基因的真核表达载体,HEPC1和HEPC2在其稳定转染的NIH3T3细胞中获得了表达,为下一步探讨HEPC1和HEPC2的功能及作用机制奠定了基础.     

ERR1突变体I240R对其转录活化功能的影响

目的　分析ERR1突变体I240R对ERR1转录活化功能的影响。方法　用重叠延伸PCR构建ERR1的缺失突 变体ERR1 I240R到真核表达质粒pSG5上,通过荧光素酶报告基因表达系统检测ERR1 I240R对ERR1转录活化功能的影 响。结果　测序证实成功构建了ERR1的突变体pSG5 ERR1 I240R。报告基因表达系统检测显示ERR1 I240R激活的荧光 素酶报告基因活性明显高于野生型的ERR1。结论　ERR1突变体ERR1 I240R转录活化功能明显高于野生型的ERR1,为 进一步研究ERR1的结构与功能打下了基础。     

重组人可溶性B淋巴细胞激活因子的制备及活性分析

目的　制备具有功能活性的人TNF家族的B细胞激活因子 (BcellactivatingfactortotheTNFfamily ,BAFF)胞外区 134～ 2 85氨基酸残基段 ,为BAFF的深入研究创造条件。方法　提取人新鲜扁桃体组织总RNA ,经RT PCR扩增编码人BAFF胞外区 134～ 2 85氨基酸残基cDNA ,经序列测定后 ,构建于原核表达载体 pQE 80L并转化大肠杆菌DH5α ,经IPTG诱导表达及Ni2 NTA柱层析纯化目的蛋白 ,行SDS PAGE和Western印迹检测。最后经MTT法检测其增殖活性。结果　RT PCR扩增得到了 4 5 9bp的cDNA片段 ,序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF13 4 2 85的cDNA序列一致 ,SDS PAGE及Western印迹证实表达蛋白确实为 6×His BAFF13 4 2 85融合蛋白并存在于包涵体中。活性检测证实其能明显刺激肿瘤细胞的增殖。结论　利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF13 4 2 85,得到的纯化蛋白具有较高的生物学活性 ,为进一步的研究奠定了基础。     

影响细胞ELISA结果的主要因素

细胞ＥＬＩＳＡ(酶联免疫吸附试验 )是用细胞代替可溶性抗原包被于 96孔酶联板 (或细胞培养板 )进行免疫学检测的一种有效方法 ,该方法特别适用于抗原位于细胞膜上而相应抗原的特性又不十分清楚或抗原难于纯化等情况[1～ 3 ] 。我们在实际操作过程中体会到细胞ＥＬＩＳＡ的结果理想与否与多种因素有关 ,概括起来包括以下几方面。1　细胞状态　　应使用对数生长期的细胞。此期细胞的活力最好 ,抗原表达水平最高。对贴壁细胞来讲 ,此期细胞贴壁最牢。2　细胞固定2 .1　悬浮生长细胞的固定　　将细胞用ＰＢＳ洗涤后 ,重悬于ＰＢＳ计数。按 ( 4…