硒化卡拉胶对甲型肝炎减毒活疫苗诱导的小鼠体液免疫应答的影响

目的研究硒化卡拉胶(KSC)对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导的小鼠体液免疫应答的影响。方法随机分成7个组,每组7只ICR小鼠。分组:阴性对照组(生理盐水)、单纯抗原组(18EU HepA-1)、铝佐剂组[Al(OH)_3 0.3 mg+18EU HepA-1]、KSC实验组(KSC 1 mg+18EU HepA-1、KSC 0.5 mg+18EU Hep A-1、KSC 0.25 mg+18EU HepA-1、KSC 0.1 mg+18EU HepA-1),皮下多点免疫注射,注射总体积300μL,免疫1次。免疫注射后及其后4周、8周、12周、16周尾静脉采血,取血清用间接酶联免疫吸附法测定抗-甲型肝炎病毒(HAV)IgG抗体滴度。在实验期间,观察小鼠的健康状况,并于免疫后16周,取KSC最佳剂量组及阴性对照组小鼠肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏组织,制备病理切片,进行对比观察。结果除阴性对照组外,其余各组在各个检测时间点均检测到抗HAVIgG抗体,且存在先升高后降低的趋势,铝佐剂组在12周达到峰值,其余各组在8周达到峰值。KSC0.5 mg组在8周、12周抗体水平高于单纯抗原组(t=3.103,t=2.573,P0.05),KSC 0.25 mg组在12周抗体水平高于单纯抗原组(t=2.602,P0.05)。本次实验的最佳剂量为KSC0.5mg。试验期内,观察小鼠各项生理指标未见异常,KSC0.5mg组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织均未观察到病变。结论 KSC能够作为佐剂增强HepA-1诱导的小鼠体液免疫反应。     

吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂联合铝佐剂对甲型肝炎减毒活疫苗诱导小鼠体液免疫应答的效应分析

目的 探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂联合对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其复合佐剂效应.方法 分别将三种不同剂量的INCB024360类似物(150 μg,100 μg,50 μg)与Al(OH)3(300 μg)复合后与HepA-1共同免疫ICR小鼠分别作为复合佐剂1组,2组,3组,同时设空白对照组、单纯疫苗组、铝佐剂对照组和单一INCB024360类似物(100 μg)组,共免疫一次,于免疫后4周、8周、12周、16周进行尾静脉采血,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清抗甲型肝炎病毒(HAV) IgG抗体水平.结果 除空白对照组外,各组小鼠免疫后4周、8周、12周、16周,均产生抗HAV IgG抗体,抗体水平随免疫时间的延长逐渐升高,于12周达到峰值.复合佐剂2组[HepA-118 EU+Al(OH)3 300 μg+INCB024360类似物100 μg]产生的抗体水平最高且持续时间较长,在8周和12周时,其对HepA-1的免疫增强效应显著高于单一佐剂组以及铝佐剂对照组(P＜0.05,t值分别为3.169、2.439).4周、8周、12周、16周,单一佐剂组与单纯疫苗组差异均不具有统计学意义(P＞0.05).结论 IDO抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂复合后具有较强的复合佐剂效应,免疫增强效应优于铝佐剂对照组;但是单一的INCB024360类似物不具有显著佐剂效应.     

低分子量透明质酸增强HAV抗原诱导的小鼠体液免疫应答的研究

目的:研究内源性危险信号分子低分子量透明质酸作为天然佐剂对HAV抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响.方法:将ICR小鼠分成9组,分别设生理盐水对照组、HAV抗原组、HAV抗原 铝佐剂组、HAV抗原 低分子量透明质酸50 μg组、HAV抗原 低分子量透明质酸100 μg、HAV抗原 低分子量透明质酸200 μg、HAV抗原 低分子量透明质酸300 μg、HAV抗原 低分子量透明质酸500 μg、HAV抗原 低分子量透明质酸1 mg组,皮下免疫小鼠.分别在4、8、12 、16周用ELISA法检测小鼠血清抗HAV IgG水平.结果:(1)空白对照组在4、8、12 和16周未见抗HAV IgG产生;各实验组抗HAV IgG水平在8周时达到最高;12周和16周时各免疫组的抗HAV IgG水平逐渐下降,尤以铝佐剂组下降明显;(2)与HAV抗原组相比,低分子量透明质酸各免疫组小鼠血清抗HAV IgG水平明显升高(P<0.05);与铝佐剂组相比,低分子量透明质酸免疫组明显增强特异性抗HAV IgG水平(P<0.05或P>0.05);(3)低分子量透明质酸安全无毒,无过敏反应.结论:低分子量透明质酸能够明显增强灭活HAV抗原的体液免疫应答,具有强的免疫佐剂作用.其免疫佐剂效应优于铝佐剂.     

树鼩粪便细菌分离培养与鉴定

目的 了解人工饲养树鼩粪便菌群多样性,为树鼩的正常饲养繁殖和微生物质量控制标准化提供依据。方法 随机采集10份树鼩粪便样品,利用有氧及厌氧培养基进行细菌分离培养,提取细菌基因组DNA后PCR扩增16SrRNA基因并测序鉴定。结果 本实验从树鼩粪便样品中,经有氧培养分离鉴定出25株、12种细菌,经厌氧培养分离鉴定出25株、10种细菌,包括变形杆菌属、肠球菌属、埃希菌属、志贺菌属、葡萄球菌属、气单胞菌属、拉恩氏菌属、拉乌尔菌属、微小杆菌属、链球菌属、明串珠菌属。结论 树鼩肠道好氧菌及厌氧菌具有丰富的种属多样性,普通变形杆菌群、费格森埃希菌群和屎肠球菌群可能是树鼩肠道的主要寄生菌群。     

枸杞多糖作为甲型肝炎疫苗佐剂免疫效果的实验研究

目的：探讨枸杞多糖（LBPS）作为甲型肝炎（HAV）疫苗佐剂的效果.方法：设HAV含铝佐剂疫苗阳性对照组、HAV不含任何佐剂的抗原阴性对照组、生理盐水空白对照组、LBPS（20mg、10mmg、5mg）3个剂量分别与HAV含铝佐剂疫苗联合、分别与HAV不含任何佐剂的抗原联合成6个实验组免疫小鼠,于免疫后4周、8周、12周、16周、20周尾静脉采血,ELISA法检测小鼠血清抗-HAVIg水平.结果：LBPS 10mg剂量作为HAV疫苗佐剂免疫效果最佳,与阳性、阴性对照组比较差异均有显著性意义.结论：LBPS与铝佐剂有相似的疫苗佐剂效果,且与铝佐剂合用有佐剂协同作用.     

CpG DNA中ISS数量与免疫刺激效果间的关系初探

研究CpG免疫刺激DNA中免疫刺激序列（ISS）的数量与免疫刺激效果间的关系。方法：将3种CpGODN（分别含2,4,8个ISS）与甲型肝炎灭活疫苗混合,通过腹腔注射途径免疫小鼠,于免疫后4,6,8w采血,用全自动微粒子酶联免疫测定分析检测抗HAVIgG水平.结果：含2个ISS的CpG ODN具有较好的佐剂效应,能增强甲型肝炎灭活疫苗的免疫效果,含4个ISS的CpG ODN不具有免疫刺激作用,而含8个ISS的CpG ODN则抑制了甲型肝炎灭活疫苗所诱导的免疫反应,结论：适当长度的CpG ODN（含2个ISS）可作为有效的佐剂来增强疫苗的免疫效果,而当其中的ISS含量过多,则反而具有免疫抑制作用。