PI3K/Akt通路在缺氧活化钙敏感受体介导的A549细胞转移中的作用

目的探讨PI3K/Akt信号通路在缺氧活化钙敏感受体(calcium sensing receptor,Ca SR)介导的A549及A549/DDP细胞转移中的作用。方法将处于对数生长期的A549及A549/DDP细胞随机分为对照组、缺氧组、缺氧+Gd Cl_3(Ca SR激动剂)组、缺氧+NPS2143(Ca SR抑制剂)组、缺氧+LY294002(PI3K通路抑制剂)+Gd Cl_3组。应用Western blot分析不同处理情况下,Ca SR、MMP-2及p-Akt蛋白在A549、A549/DDP细胞的表达水平;采用细胞划痕及Transwell小室方法,检测不同处理因素对细胞迁移和侵袭能力的影响;应用ELISA法,分析不同处理因素对A549及A549/DDP细胞分泌MMP-2蛋白的影响。结果与对照组比较,缺氧能够增强A549及A549/DDP细胞Ca SR的表达,增强细胞迁移能力,提高细胞及培养液中MMP-2蛋白表达水平、促进Akt蛋白的磷酸化,NPS2143能减弱缺氧的作用,Gd Cl_3放大缺氧的作用,而LY294002抑制缺氧和Gd Cl_3的上述作用。结论缺氧活化Ca SR促进A549及A549/DDP细胞转移,其机制可能涉及PI3K/Akt通路。     

神经肌肉电刺激对脑血管病大鼠模型神经元tau蛋白表达和氧化应激水平的影响

目的探讨神经肌肉电刺激(NMES)对脑血管病大鼠模型神经元tau蛋白表达和氧化应激水平的影响。方法选取30只清洁级SD雄性大鼠,随机分为三组。分别设置空白对照组(B组),脑血管病模型组(C组)和NMES组(N组),每组10只。造模后,使用免疫组化方法对各组大鼠海马Tau蛋白磷酸化程度进行检测;通过实时荧光定量(RT)-PCR方法对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)的相关基因表达进行检测;对各组大鼠进行丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量进行检测。结果 C、N组大鼠由于存在脑血管病,表现为过度磷酸化。NMES后,N组大鼠Tau蛋白磷酸化程度与C组相比,蛋白含量明显减少(P0.01),磷酸化程度明显改善(P0.01);与N组相比,B组和C组的基因表达受到抑制,基因呈现下调,NMES后N组大鼠受到抑制的Akt基因被激活不在为失活状态,差异均具有统计学意义(P0.01);离心取得的大鼠血清中,经检测,与B组相比,C组中大鼠MDA明显升高,SOD活性明显下降。随着NMES程度的增加,可显著提高大鼠SOD活性,降低MDA含量,减少磷酸化程度。结论 NMES对脑血管病大鼠磷酸化程度有所缓解,可有效降低tau蛋白表达,同时,对体内抗氧化有显著的治疗效果。其作用机制可能与抑制PI3K/Akt通路的表达有关。     

清脑汤治疗H型高血压84例

目的:观察清脑汤治疗H型高血压的临床疗效及对同型半胱氨酸、血脂的影响。方法:选择2016年10月至2018年12月在本院就诊的168例H型高血压患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和治疗组,每组各84例,对照组采用非洛地平缓释片治疗,每次5 mg,每日清晨口服,治疗组采用中药清脑汤治疗,日1剂,水煎服,分2次温服。两组均以7 d为1个疗程,均连续治疗4个疗程。观察两组患者治疗前后血压、血脂水平和心功能。结果:治疗后,治疗组日间收缩压、夜间收缩压、日间舒张压、夜间舒张压较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组同型半胱氨酸(homocystein,Hcy)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein-C,HDL-C)及三酰甘油(triacylglycerol,TG)水平与对照组比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);对照组不良反应发生率为16.67%,治疗组不良反应发生率为5.95%,两组不良反应发生率比较,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组每搏输出量(stroke volume,SV)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)高于对照组(P<0.05),左心室舒张末期内径(left ventricular end-systolic dimension,LVEDD)低于对照组(P<0.05);对照组有效率为73.81%,治疗组有效率为90.48%,两组有效率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:清脑汤可以提高H型高血压患者的临床疗效,降低同型半胱氨酸及血脂的浓度。     

STK25的生物学特性及其与肿瘤关系的研究进展

Ⅲ生发中心激酶(GCK)是一类具有保守的丝/苏氨酸蛋白激酶特征的蛋白激酶家族,与p21活化蛋白激酶(PAK)家族同属于绝育20(Ste20)样激酶家族,参与了广泛的生物学效应,部分成员对外界的刺激可产生相应的应激反应,如细胞增殖、细胞死亡和细胞骨架重排等。STK25作为GCK家族第Ⅲ亚族(GCKⅢ)重要成员之一,参与上述的基本生理过程外,同时在能量代谢、肿瘤的发生与发展中发挥着重要作用。笔者将分别从STK25及家族部分成员的结构特点、分子生物学作用、能量代谢调节及抗肿瘤效应等方面一并进行综述,为最终将其应用于肿瘤的临床治疗提供借鉴。     

琥珀酰胆碱与罗库溴铵用于麻醉诱导对甲状腺手术患者术中喉返神经监测的影响[论著]

目的　比较常规剂量琥珀酰胆碱与小剂量罗库溴铵用于麻醉诱导对甲状腺手术患者术中喉返神经监测的影响。方法　选取2019年4月至2019年7月本院120例同一外科医师团队甲状腺手术喉返神经监测患者，随机分为A组：麻醉诱导肌松药物为琥珀胆碱1.5 mg/kg；B组：麻醉诱导肌松药物为罗库溴铵0.3 mg/kg。麻醉医师待肌松监测显示到最大抑制后，通过气管插管条件评分评估两组患者气管插管条件。记录各组插管时间、等待时间；迷走神经和喉返神经电信号基础值；以及术中血压波动、术后咽痛、声音嘶哑、低氧血症、苏醒延迟等并发症。外科医师通过神经肌电监测仪进行喉返神经刺激评估两组患者喉返神经监测情况。结果　A组患者气管插管条件优于B组，A组插管时间、肌松监测时间小于B组，两组手术监测时间差异无统计学意义。A组首次神经监测信号值大于B组，A组首次监测例数多于B组，两组患者术中无体动，血压下降差异无统计学意义。麻醉术后并发症，A组咽痛少于B组，A组有少量患者发生肌痛，差异无统计学意义。结论　1.5 mg/kg琥珀酰胆碱用于甲状腺手术患者的麻醉诱导，可以提供较好的插管条件，不影响外科医师术中行喉返神经监测，同时减少患者术后咽痛的发生。     

PI3K/AKT/mTOR通路及其抑制剂在乳腺癌中的应用现状

磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）信号转导通路在多种肿瘤中异常激活，参与肿瘤细胞增殖、分化和凋亡等生命过程的调控，是抗肿瘤药物研发的重要靶点。对目前已应用于乳腺癌临床或处于临床试验阶段的PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制剂进行归纳，并综述该通路抑制剂的联合用药策略，以期为不同亚型乳腺癌提供个体化靶向治疗方案。     

祛疡清热汤治疗中重度溃疡性结肠炎疗效及对患者血清LPO与SCD-1表达的影响

目的:探讨祛疡清热汤对中重度溃疡性结肠炎患者血清中脂质过氧化物(LPO)与硬脂酰辅酶A脱氢酶(SCD-1)表达的影响。方法: 将84例中重度溃疡性结肠炎患者作为研究对象,依照随机数字表法将患者分为观察组和对照组,每组42例。对照组给予英夫利昔单抗治疗,观察组在对照组的基础上加用祛疡清热汤治疗,对比两组患者的临床疗效及不良反应的发生情况,以及在治疗前后T细胞群、LPO及硬脂酰-LPC/油酰-LPC(SCD-1)水平的变化情况。结果:经治疗结束后,两组患者均有一定疗效(观察组90.5% 与对照组73.8%,χ²=3.977,P<0.05),且不良反应发生率较低; 经治疗结束后,两组的Treg/Th₁₇相较于治疗前明显升高,且观察组的Treg/Th₁₇显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05); 经治疗结束后,两组患者血清中LPO明显下降,硬脂酰-LPC/油酰-LPC得到升高,且观察组的LPO与硬脂酰-LPC/油酰-LPC水平显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:采用祛疡清热汤治疗中重度溃疡性结肠炎具有较好的临床疗效,可调节血清LPO与SCD-1的表达水平,增强免疫功能。     

火针膝周密刺对膝关节骨性关节炎鼠关节形态及软骨LOXL2的影响

目的:探讨火针膝周密刺对膝关节骨性关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)大鼠行为学、关节形态及软骨中赖氨酰氧化酶相关蛋白2(LOXL2)影响性。方法:选择30只健康雄性大鼠,10只作为对照不作任何处理。20只大鼠建立KOA模型,成模后随机分成2组,分别予普通针刺和火针膝周密刺,1次/3 d,连续6次。观察各组大鼠Leauesne MG评分、关节软骨细胞情况,外周血及关节软骨转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、LOXL2水平变化。结果:治疗后火针组Leauesne MG评分中的局部疼痛刺激反应、步态、关节活动范围、关节肿胀度较对照组、模型组差异有统计学意义(P<0.05)。血清及关节软骨MMP-3、TGF-β1、TNF-α含量水平显著低于模型组(P<0.05),LOXL2显著高于模型组(P<0.05)。火针组电镜下软骨细胞形状规则、细胞核完整且饱满,微绒毛少量存在,内质网丰富,有散在的染色质。结论:火针膝周密刺能减轻K0A关节软骨损伤,降低炎性反应,改善软骨LOXL2水平,这可能是火针治疗KOA一个作用机制。     

柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织PI3K/Akt/GSK3β/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨柴胡加龙骨牡蛎汤对抑郁大鼠海马组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)/β-链环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:健康SD大鼠120只,随机取20只作为正常组,另100只大鼠用于制备慢性不可预见性温和应激(CUMS)抑郁模型。再将CUMS抑郁大鼠随机分为模型组,柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组,氟西汀组,每组20只。柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组分别灌胃3.25,6.5,13 g·kg~(-1);氟西汀组灌胃盐酸氟西汀10 mg·kg~(-1);正常组和模型组灌胃等量生理盐水;1次/d,共干预21 d。应用糖水偏好和强迫游泳实验评估抑郁行为,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠大脑海马组织中PI3K,Akt,GSK3β以及β-catenin蛋白水平及其磷酸化水平。结果:给药21 d后,与正常组比较,模型组糖水偏好显著下降(P0.01);强迫游泳不动时间显著延长(P0.01);PI3K,p-PI3K p110,p-PI3K p85蛋白水平均显著降低(P0.01);Akt,p-Akt Thr308,p-Akt Ser473,p-GSK3βSer9,β-catenin水平均显著降低(P0.01);GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平明显升高(P0.05,P0.01)。与模型组比较,柴胡加龙骨牡蛎汤中、高组大鼠糖水偏好显著增加(P0.01);强迫游泳不动时间显著缩短(P0.01);PI3K总蛋白,PI3K p110和PI3K p85亚基蛋白磷酸化水平均显著增高(P0.01);p-Akt Thr308和p-Akt Ser473水平均显著升高(P0.01);p-GSK3β Ser9,β-catenin水平显著增高(P0.01),而GSK3β,p-GSK3β Tyr216水平却明显降低(P0.05)。结论:柴胡加龙骨牡蛎汤通过提高大鼠海马组织PI3K蛋白水平及活性,激活Akt,抑制GSK3β活性,阻止β-catenin降解,即提高大鼠海马组织PI3K/Akt信号通路活性,保护海马神经元。