酪氨酸激酶受体B在卵巢上皮性癌中的表达及其意义

背景与目的: 失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor,TrkB)能诱导正常上皮细胞的恶性转化并且使该细胞具有高转移能力.TrkB在良性肿瘤中及正常卵巢上皮中不表达,在癌组织中不但表达,并且与交界性肿瘤比较表达明显增高;转移灶和低分化癌组织中明显增高,如在神经母细胞瘤和其它多种人类高侵袭性恶性肿瘤组织中过度表达,本研究旨在探讨其过度表达与肿瘤组织分化及病人预后的关系.方法: 选取卵巢癌石蜡标本73例(包括与原发灶相对应的8例腹水中的癌细胞团簇),其中低分化腺癌34例,28例卵巢交界性上皮性肿瘤;16例卵巢良性上皮性肿瘤及13例正常卵巢组织作为对照,行免疫组化ABC法检测TrkB的表达:随机选取上述病例中30例(包括4例与原发灶相对应的火网膜转移灶和腹水中的癌细胞团簇)、交界性上皮性肿瘤7例;卵巢良性上皮性肿瘤4例及正常卵巢组织(包括卵巢皮质和髓质)2例作为对照,行RT-PCR检测TrkB的表达.结果: RT-PCR结果表明,TrkB mRNA在卵巢癌与卵巢交界性肿瘤中的相对转录水平分别为(16.7±3.1)%和(4.6±0.4)%,在卵巢癌组织中表达明显增加(P<0.001);TrkB mRNA在大网膜转移灶和腹水中的癌细胞团簇中的TrkB mRNA相对表达量分别为(31.4±1.4)%和(28.2±0.7)%,与相应的原发灶(18.1±1.1)%比较,差异有显著性(P<0.001).免疫组化结果表明,卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢上皮不表达TrkB;TrkB在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率分别为67.12%(49/73)和14.29%(4/28),两者比较差异有显著性(P<0.001),TrkB前体蛋白(表达于胞质)广泛地高表达于卵巢上皮性癌组织中67.12%(49/73),全长TrkB蛋白(表达于胞膜)在腹水中的癌细胞团簇100%(8/8)和低分化卵巢癌组织中100%(34/34)表达增强,与原发灶49.32%(36/73)和高分化癌7.69%(3/39)比较,差异有显著性(P<0.01).TrkB阳性表达与卵巢癌患者不良预后有关(P<0.002).结论: 卵巢上皮性痛中存在TrkB的过度表达;全长TrkB高表达于低分化卵巢癌和腹水中的癌细胞团簇中,TrkB可能是介导卵巢癌失巢凋亡抑制的因子;TrkB的过度表达预示卵巢癌的不良预后.     

子宫内膜癌中ERK1／2信号转导通路与雌、孕激素受体的相关性

目的 检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中细胞外信号调控激酶1/2(ERK1/2)在子宫内膜癌中的表达,探讨其与雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达间的相关性.方法 用免疫组化方法(SP法)检测30例子宫内膜癌石蜡标本中ERK1/2以及ER和PR的表达;同法检测20例正常子宫内膜、13例增生过长子宫内膜石蜡标本中ERK1/2的表达;对标本的染色情况做半定量分析.结果 ERK1/2在正常子宫内膜、增生过长子宫内膜和子宫内膜癌中的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05).磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)在ER阳性与ER阴性子宫内膜癌中的高表达率比较(76.5% vs 30.8%),差异有统计学意义(P<0.05);且p-ERK1/2的高表达率与ER的表达水平呈正相关(r=0.457,P<0.05);p-ERK1/2的高表达率与PR的表达水平无相关性(P>0.05).结论 ERK1/2信号转导通路与子宫内膜恶变过程无相关性,其活化与ER表达水平呈正相关.ER可能通过ERK1/2信号通路发挥其在子宫内膜癌中的调控作用.     

不同玻璃化冷冻方案对小鼠卵巢组织的影响

目的比较不同组合的冷冻保护剂对小鼠卵巢组织的影响,为人类卵巢组织玻璃化冷冻的保护剂选择提供实验依据。方法将20只小鼠的卵巢进行玻璃化冷冻,组织标本随机分为4组,新鲜的和冻融后的卵巢皮质分别进行光学显微镜观察、TUNEL实验和免疫组织化学分析。结果光镜观察发现各实验组的各级卵泡形态正常率均明显低于对照组,B组的始基卵泡形态正常率和初级卵泡形态正常率均高于A组和C组,差异有统计学意义（P〈0．05）。A组和C组冻融后卵泡凋亡率、卵母细胞凋亡率和颗粒细胞凋亡率均高于B组,有统计学差异（P〈0．05）。另外,B组卵泡Bax蛋白阳性表达率低于A组和C组,而B组Bcl-2蛋白阳性表达率高于A组和C组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论实验结果提示：与其它组合相比,EG与PROH的组合更适合小鼠卵巢组织的玻璃化冷冻。     

卵巢透明细胞癌基因表达谱初探

目的 初步建立卵巢透明细胞癌基因表达谱,探讨透明细胞癌和浆液性囊腺癌之间的差异表达基因.方法 用一步法抽提8例卵巢透明细胞癌组织和8例卵巢浆液性囊腺癌组织的总RNA,反转录合成cDNA探针的同时以Cy3、Cy5分别标记透明细胞癌和浆液性囊腺癌.两种探针等量混合后与含有14 000多条人类全基因的表达谱芯片杂交.经洗片、...     

DLX4在子痫前期胎盘组织的表达及与上皮细胞间质化相关性的研究

目的:探讨DLX4在妊娠期高血压疾病中的作用及其对滋养细胞EMT的影响。方法:采用Western blot法分别检测子痫前期胎盘组织及缺氧培养的滋养细胞系JEG-3中DLX4蛋白表达的变化;通过实时PCR技术,比较缺氧条件下滋养细胞中DLX4、HIF-1α和E-cad表达变化的差异。结果:滋养细胞缺氧培养后DLX4蛋白表达明显下降(P0.05),与其在子痫前期胎盘组织的表达变化一致;缺氧抑制滋养细胞中DLX4 mR-NA表达,同时伴有HIF-1α和E-cad mRNA表达增加。结论:缺氧引起滋养细胞DLX4表达下调,伴随EMT相关因子表达的改变。子痫前期滋养细胞侵袭力异常可能与缺氧引起DLX4表达下调及滋养细胞EMT异常有关。     

子宫内膜癌中ERK1/2信号转导通路与雌、孕激素受体的相关性

目的 检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中细胞外信号调控激酶1/2(ERK1/2)在子宫内膜癌中的表达,探讨其与雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达间的相关性.方法 用免疫组化方法(SP法)检测30例子宫内膜癌石蜡标本中ERK1/2以及ER和PR的表达;同法检测20例正常子宫内膜、13例增生过长子宫内膜石蜡标本中ERK1/2的表达;对标本的染色情况做半定量分析.结果 ERK1/2在正常子宫内膜、增生过长子宫内膜和子宫内膜癌中的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05).磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)在ER阳性与ER阴性子宫内膜癌中的高表达率比较(76.5% vs 30.8%),差异有统计学意义(P<0.05);且p-ERK1/2的高表达率与ER的表达水平呈正相关(r=0.457,P<0.05);p-ERK1/2的高表达率与PR的表达水平无相关性(P>0.05).结论 ERK1/2信号转导通路与子宫内膜恶变过程无相关性,其活化与ER表达水平呈正相关.ER可能通过ERK1/2信号通路发挥其在子宫内膜癌中的调控作用.     

913例健康体检女性血清HE4水平分布的初步观察

目的:探讨上海地区不同年龄健康体检女性血清人附睾蛋白4(HE4)水平的分布情况,为建立女性血清HEA水平的参考区间提供参考.方法:对913例健康体检女性以60岁为界,分为＜60岁组835例,≥60岁组78例;再将＜60岁组以10岁一年龄段分4个亚组.采用ELISA法测定血清HE4水平.结果:913例健康体检女性血清HEA平均水平为40.96±10.81pmoL/L,其中＜60岁组血清HE4水平40.05±9.88 pmol/L,≥60岁组为50.73 ± 14.87 pmol/L,两组比较差异有高度统计学意义(P＜0.01).在＜60岁组中,20 ～ 29岁组(148例)血清HE4水平为38.04±8.87 pmol/L,30 ～ 39岁组(182例)为39.21 ±9.02 pmol/L,40～49岁组(326例)为40.97±10.82 pmol/L,50 ～ 59岁组(179例)为40.89 ±9.46pmol/L,60岁以下各年龄组间血清HEA水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).以(x)+2s为参考上限,健康体检女性血清HEA水平参考区间:60岁以下＜59.81 pmol/L,60岁以上＜80.47 pmol/L.结论:年龄是影响人血清HE4水平的重要生理因素.建议按照60岁以下和60岁以上分别建立女性血清HE4水平的参考区间.     

大鼠同种异体子宫原位移植模型的建立

在女性不孕症患者中，约8％是子宫性不孕。由于现有辅助生育技术的局限性以及许多国家禁止代孕，因此，子宫移植成为治疗子宫性不孕患者的惟一可行方法。目前国内外子宫移植研究尚处于动物实验阶段，本研究通过建立大鼠同种异体子宫原位移植模型，评价术后移植子宫生殖功能的恢复情况，现报告如下。     

应用cDNA表达谱芯片研究子宫内膜癌基因的表达谱

目的:应用cDNA表达谱芯片研究不同分化程度人子宫内膜癌组织的基因表达谱,分析子宫内膜癌发生、发展过程中基因表达的变化。方法:用一步法抽提5例高分化和4例低分化人子宫内膜癌组织和36例正常子宫内膜组织的总RNA,在反转录合成cDNA探针的同时以Cy3和Cy5标记肿瘤组和正常对照组,将Cy3和Cy5标记探针混合后与含有13 824个基因的人表达谱芯片杂交。经洗片、扫描、软件处理后,分析子宫内膜癌和正常子宫内膜对照之间基因表达谱的差异。对高分化和低分化子宫内膜癌基因表达谱进行聚类分析。结果:子宫内膜癌组织和正常对照基因表达谱比较,差异2倍以上基因共有26条,表达上调和下调的基因分别为2条和24条。聚类分析显示,通过基因表达谱基本可将高分化和低分化子宫内膜癌分开。结论:通过基因表达谱差异研究可以发现与子宫内膜癌发生、发展相关的基因;癌基因表达谱聚类分析可能会帮助判断高危和低危子宫内膜癌,有利于子宫内膜癌患者个体化治疗方案的制定。     

持续性静脉输注高渗葡萄糖建立妊娠期高血糖动物模型

目的建立理想稳定的妊娠期高血糖动物模型。方法将雌性SD大鼠随机分为两组,实验组自孕晚期持续静脉输注高渗葡萄糖,对照组同期、同速输注无菌蒸馏水。结果实验组大鼠孕期血糖及血清胰岛素浓度均明显高于对照组(P<0．01),两组血清氨基酸浓度及血酮体定性检查的差异无显著性(P>0．05)。输液期间实验组大鼠摄食量明显减少,但两组摄入总热卡的差异无显著性(P>0．05)。结论给孕鼠输注高渗葡萄糖,大鼠血糖升高且稳定,同时不伴明显的脂肪及氨基酸代谢紊乱。采用该方法可以建立理想的妊娠期高血糖动物模型。