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11.
12.
《中国矫形外科杂志》2016,(8):732-738
[目的]采用EDC(碳化二亚胺)交联结合化学萃取法制备脱细胞脊髓支架,探讨脱细胞脊髓支架制备效率,分析支架的生物学特性,观察支架能否保留细胞外基质黏多糖成分。[方法]采用EDC交联结合化学萃取法(液氮结合42℃恒温水浴反复冻融6次+1%Triton X-100+1%脱氧胆酸钠+EDC交联+液氮结合42℃恒温水浴反复冻融6次+1%Triton X-100+1%脱氧胆酸钠)处理正常脊髓20根,得到脱细胞脊髓支架(支架组);对照于正常大鼠脊髓组织(对照组)。通过HE染色检验支架组脱细胞效果,统计脱细胞脊髓支架的等级评分"优"、"良"、"一般"、"差"的百分比;选取HE染色脱细胞彻底、评分为"优"的脊髓支架,DAPI染色验证其内部细胞残留情况的等级评分是否一致为"优";通过电镜扫描观察两组内部三维结构并分析其孔径;分析脊髓组织脱细胞处理前后的含水率、孔隙率、抗酶解性的变化;通过免疫组化的方法,观察两组材料细胞外基质中黏多糖分布情况。[结果]支架组通过HE染色观察到脱细胞彻底、评分为"优"的百分比为80%;HE染色观察评分为"优"支架经DAPI染色验证其内部细胞残留量评分也为"优";其三维结构完整,其孔径均值为9.07μm;含水率为(228.14±19.39)%;孔隙率为(71.82±2.10)%;在胰酶中,第20 h的酶解率平均为(35.904±1.911)%;免疫组化分析鉴定细胞外基质中包含一定的黏多糖。对照组中正常脊髓经HE染色和DAPI染色观察到大量细胞;三维网孔状结构,孔径均值为40.7μm;含水率和孔隙率分别为(109.32±12.44)%和(61.18±4.19)%;在胰酶中,第20 h的酶解率平均为(25.704±1.030)%;细胞外基质中包含大量的黏多糖成分。[结论]EDC交联结合化学萃取法制备的支架脱细胞彻底、制备效率高,具有三维网状结构、良好的含水率、空隙率、抗酶解性,一定程度上保留细胞外基质中黏多糖成分,符合组织工程学支架制备要求,为脊髓支架提供了一种新的选择。 相似文献
14.
《中国药房》2019,(14):1936-1940
目的:制备褪黑素固体脂质纳米粒(MT-SLNs),并考察其在小鼠离体皮肤中的透皮吸收特征。方法:以褪黑素(MT)为模型药物,以山嵛酸甘油酯作为油相、泊洛沙姆188(F188)为乳化剂,通过熔融乳化法制备MT-SLNs。使用透射电镜观察MT-SLNs的形态,使用激光粒径分析仪检测其粒径分布,使用红外光谱仪检测其红外光谱特征;采用高效液相色谱法和超滤离心法测定其包封率和载药量,采用Franz扩散池法比较MT-SLNs和MT原料药的体外透皮吸收特征。结果:MT-SLNs的处方中含2.5 mg/mL MT原料药、25 mg/mL山嵛酸甘油酯和1%F188;所得MT-SLNs呈圆球状,且未见聚集现象发生;其平均粒径为(67.88±0.17)nm,多分散指数为0.188±0.001;其红外光谱图未见N—H伸缩和弯曲振动的特征吸收峰,且苯环C—H伸缩振动的特征吸收峰红移至1 750 cm~(-1)。所得MT-SLNs的包封率为(87.54±5.31)%,载药量为(8.42±0.78)%。MT-SLNs及其原料药的透皮吸收行为均符合零级动力学释放规律;其中,MT-SLNs的稳态透过速率[(31.71±2.78)μg/(h·cm~2)]显著高于其原料药[(10.32±3.24)μg/(h·cm~2)],其滞后时间[(0.17±0.01)h]显著短于其原料药[(1.57±0.37)h](P<0.01)。结论:所制MT-SLNs的粒径小,且分布均匀,可促进药物的体外透皮吸收。 相似文献
15.
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18.
19.
《中药药理与临床》2015,(4):3-6
目的:研究四物汤制备过程中不同中间产物(当归-川芎蒸馏液、水煎液、醇沉上清液及醇沉淀物)对急性血瘀模型大鼠血液流变性作用的影响,阐明四物汤制备工艺的合理性。方法:建立大鼠急性血瘀模型,采用全自动血流变分析仪测定血浆黏度及不同切变率的全血黏度,计算全血低切相对指数、全血高切相对指数、红细胞聚集指数等指标,测定不同中间产物对大鼠急性血瘀模型血液流变学等指标的影响。结果:模型组较对照组大鼠血浆黏度和全血黏度均明显升高(在200s-1、30s-1、5s-1、1s-1不同切变率条件下,全血粘度分别提高了18.67%、14.41%、14.23%、18.11%;血浆粘度提高了43.97%)。当归-川芎蒸馏液10g/kg剂量组在200s-1、30s-1、5s-1、1s-1不同切变率条件下,全血粘度分别降低了25.29%、24.15%、24.14%、27.28%;血浆粘度降低了50.45%;四物汤水煎液10g/kg剂量组在高、中、低不同切变率条件下,全血粘度分别降低了25.71%、26.48%、29.24%、34.33%;血浆粘度降低了62.28%;四物汤醇沉上清液10g/kg剂量组在200s-1、30s-1、5s-1、1s-1不同切变率条件下,全血粘度分别降低了20.48%、16.84%、18.22%、22.60%;血浆粘度降低了47.54%;四物汤水煎液10g/kg剂量组还可明显降低红细胞聚集指数(降低了12.81%);而四物汤醇沉淀物10g/kg剂量组与模型组相比,作用不明显。结论:四物汤有明显改善急性血瘀模型大鼠血液流变性的作用,其制备过程能较好地保留活血药效成分,从活血角度出发,制备工艺合理。 相似文献
20.
肝脏替代治疗是目前终末期肝病最有效的治疗措施,而去细胞化肝脏生物支架拓宽了肝脏替代治疗的研究领域.目前普遍的支架制备过程是在一定的物理条件下,经灌注设备将化学试剂(去垢剂、消化酶等)注入肝脏自身的脉管结构中,达到去除细胞成分,保留支架内ECM和超微脉管结构的目的.再将种子细胞注入到去细胞化肝脏生物支架,获得再细胞化肝脏,模拟机体内肝脏生物环境进行体外或体内培养,观察种子细胞附着情况,检测肝脏代谢功能,评估肝脏替代效果.目前,种子细胞的选取、再细胞化流程、再细胞化肝脏移植等问题仍处于探索阶段.笔者围绕去细胞化肝脏生物支架的制备与评价、检测和应用作一综述,为进一步应用于实验研究和临床实践提供参考. 相似文献