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101.
目的 研究新城疫病毒核衣壳蛋白基因的生物学作用及其抗人喉鳞癌的作用。方法 利用含有新城疫病毒V4株核衣壳蛋白基因cDNA的原核质粒pUVNP4及真核质料pcNDA3,采用基因重组技术构建了含有CMV含动子、BGHpolyA信号序列的表达新城疫病毒核衣壳蛋白的真核表达质粒。结果 酶切分析表明重组质粒中含有新城疫病毒V4株核衣壳蛋白基因。结论 重组质粒为表达新城疫病毒核衣壳蛋白基因的真核质粒。 相似文献
102.
103.
一种新的融合表达载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
利用L-ansB基因片段构建了融合表达载体pEC,其中L-ansB基因中编码唯一酸水解位点的序列已通过定点突变消除,并在它的3’端引入了新的酸水解位点编码序列和方便外源基因插入的克隆位点BamHI和HindⅢ,外源基因可从克隆位点BamHI和HindⅢ处插入pEC中,表达的融合蛋白用酸水解法加工后仅被切割成一大一小两个片段,不会导致产物混杂,hGRF对它进行验 结果显示hGRF基因不仅能按正确的读 相似文献
104.
天津市汉沽区媒介生物调查初报 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道了天津市汉沽区域媒介生物的调查结果:本地区有蚊类6种;鼠类5种;蝇类31种;蜚蠊类3种;蚤类2种;螨类1种。 相似文献
105.
庞智 《苏州大学学报(自然科学版)》1999,(4)
通过磷酸钙沉淀法将载体DNA转染Caco-2细胞。Caeo-2细胞经不同浓度1,25一二羟维生素D3处理后,测定表达的荧光素酶活性。结果;当pSG5-VDR表达载体共转染时1,25一二羟维生素D3显著地抑制Caco-2细胞荧光素酶的表达;而未使用pSG5-VDR表达载体共转染时,则无抑制作用。说明1,25一二羟维生素D3能抑制报导载体pGL2荧光素酶的表达。类似于人类PTH基因中的潜在抑制性VDRE存在于报导载体pGL2。 相似文献
106.
目的: 研究1,25-二羟维生素D3 对结肠癌细胞系Caco-2 细胞中报告基因表达的作用,并探讨在报告载体pGL2 序列中存在潜在的抑制性维生素D应答元件(VDRE)的可能性。方法: 采用磷酸钙沉淀法将报告载体转染入Caco-2 细胞。Caco-2细胞经不同浓度1,25-二羟维生素D3 处理后测定细胞裂解液中表达的荧光素酶活性。结果: 应用pGL2 报告载体时,当用pSG5-VDR表达载体共转染后,1,25-二羟维生素D3显著地抑制Caco-2 细胞荧光素酶的表达(P< 0.05);而未使用该表达载体共转染则无抑制作用(P> 0.05)。应用pGL3 报告载体时,不同浓度的1,25-二羟维生素D3 对pLG3转染后Caco-2 细胞表达的荧光素酶活性均无显著抑制作用(P> 0.05),该作用不依赖是否存在有pSG5-VDR表达载体共转染。结论:1,25-二羟维生素D3 对报告载体PGL2 荧光素酶表达具有抑制作用,而对pGL3 则否;类似人类PTH基因中的潜在抑制性VDRE存在于报告载体pGL2,在pGL3 中该VDRE业已改变。 相似文献
107.
108.
基因载体PEG化壳聚糖的制备及其表征 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:用亲水性的聚乙二醇对壳聚糖进行改性,制备适用于基因转染的非病毒类裁体。方法:合成步骤共分三步。首先通过有机合成,将甲氧基聚乙二醇(mPEG)的羟基末端依次活化成为羧基和琥珀酰亚胺端基,形成mPEG-COOH活化物和mPEG-COONSu活化物;然后将亲水性的mPEG-COONSu活化物接枝到壳聚糖的氨基侧链上,得到改性了的壳聚糖-聚乙二醇接枝产物,应用波谱技术FTIR,^1H-NMR,^13C-NMR对中间产物和最终产物进行了表征。结果:在FTIR谱图上基本找到mPEG-COOH,mPEG-COONSu的特征峰;^1H-NMR再一次确认mPEG-COONSu的合成;^13C-NMR确认了壳聚糖-聚乙二醇接枝产物的存在。结论:mPEG-COONSu活化物通过接枝反应对壳聚糖进行改性,得到了PBG化壳聚糖。 相似文献
109.
背景与目的:克隆人野生型和突变型PTEN的cDNA并构建其表达载体,探讨该表达质粒在人星形胶质瘤细胞U251中的表达情况.材料与方法:分别从新鲜胎盘组织和结肠癌组织中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增人野生型和突变型PTEN基因全长cDNA,分别克隆入pMD 18-T载体上,经PCR、酶切鉴定均为阳性的克隆,进行核苷酸序列分析.再分别将两段基因定向克隆入pcDNA3.1( )载体中构建表达载体,转染入U251细胞.结果:成功克隆了人野生型及突变型PTEN cDNA并成功构建其表达载体,发现突变型PTEN蛋白对细胞生长无明显抑制作用,而野生型PTEN蛋白对细胞生长有明显抑制作用.结论:PTEN可能能抑制肿瘤细胞生长,为后进一步开展PTEN对肿瘤相关功能的研究奠定基础. 相似文献
110.
目的:经Beagle犬肝脏血管注射重组腺病毒介导反义c-myc基因(Ad-ASmyc)载体,观测其体内分布及毒副作用,以评价Ad-ASmyc治疗肝癌的临床前期安全性.方法:选择4只体重8~10kg健康Beagle犬,全麻后开腹,经肝动脉或门静脉注射Ad-ASmyc,注射Ad-ASmyc前及注射后第3,7,14,21天取肝组织及抽取静脉血化验,PCR检测Ad-ASmyc在各器官组织中的分布,常规切片观察各器官病理变化,ELISA方法检测血中抗腺病毒抗体的产生.结果:经Beagle犬肝脏血管注射后,Ad-ASmyc可持续转导正常肝细胞达3周,实验犬一般情况好,血、肝、肾功能无明显异常,在肝脏、脾脏、肾脏、胃、心脏、皮肤中可检测到重组腺病毒的分布,镜下可见Ad-ASmyc剂量依赖性的肝组织轻微的炎症反应,注射后7d血中有抗腺病毒载体的抗体产生,14d达高峰,21d开始下降.结论:经Beagle犬肝动脉或门静脉途径注射Ad-ASmyc均可转导至肝细胞,Ad-ASmyc对实验犬的毒副作用较轻. 相似文献