肠紧密连接在溃疡性结肠炎中的作用及中药治疗进展

溃疡性结肠炎（UC）是一种影响患者结肠或直肠的疾病，以长期反复性炎症为特征，最终导致肠黏膜出现溃疡。该病具有较高的发病率，且不易治愈，给患者带来了巨大的身心不适和经济负担。因此，探索和研发治愈率高、不良反应小的新疗法迫在眉睫。本病病理机制复杂，由多因素共同促成。其中肠黏膜屏障受损是UC的主要病理基础，是当前热门研究课题和新方向。肠上皮紧密连接（TJ）作为肠黏膜机械屏障的结构基础，可积极调控黏膜功能，在UC的发病中起关键作用。中医药可以多途径、多靶点调控TJ蛋白，修复肠黏膜屏障，从而阻断UC进展。大量研究表明，中药单体或成分、复方及其制剂可通过调控TJ蛋白维持UC肠上皮功能，降低其通透性而有效治疗UC，为干预UC提供了新的治疗策略。虽然中药通过介导TJ蛋白表达干预UC具有西医难以取代的独特优势，但目前缺乏对中药促进TJ蛋白表达治疗UC全面的综述。故该文从UC的现状、中医辨证论治基础上以“溃疡性结肠炎”“紧密连接”“中药”等为关键词，检索查阅近年来中英文相关文献，综述了TJ及其关键靶点蛋白与UC的关系，以明确TJ在UC病理生理的关键作用。同时，对近年来靶向调控TJ而治疗UC的中药进行系统性总结，以期为UC的治疗以及进一步的药物开发提供理论依据。     

PI3K通路在抗NMDAR脑炎小鼠紧密连接和大脑功能障碍中的作用研究

目的：通过检测磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）对抗N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）脑炎小鼠紧密连接蛋白Occludin、Claudin-5和神经元核心抗原（NeuN）表达的影响，探讨抗NMDAR脑炎小鼠脑损伤的分子机制。方法：采用多肽主动免疫法建立抗NMDAR脑炎小鼠模型。将小鼠随机分成对照组、模型组、模型+8 mg/kg LY294002组和模型+16 mg/kg LY294002组。各组均进行神经功能缺损评分，采用荧光素钠法测定各组血脑屏障（BBB）通透性；应用蛋白免疫印迹法（western blotting）检测蛋白Occludin、Claudin-5和NeuN的表达；采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测Occludin、Claudin-5 mRNA水平；同时通过免疫组织化学法分析NeuN在脑组织中的表达情况。结果：与对照组比较，模型组小鼠短期和长期神经功能评分下降，Occludin、Claudin-5、NeuN表达水平显著降低（P<0.05）,BBB通透性增加；PI3K抑制剂LY294002改善了抗NMDAR脑炎小鼠的神经功能，并减少了Occludin、Cl...     

血必净注射液通过降低细胞紧密连接的通透性减轻LPS诱导的脓毒症大鼠肺微血管内皮细胞损伤

目的 探究血必净注射液(XBJ)对脂多糖诱导的脓毒症大鼠肺微血管内皮细胞损伤的作用及其对细胞紧密连接通透性的影响。方法 选择大鼠肺微血管内皮细胞，利用5μg/mL的脂多糖(LPS)处理大鼠肺微血管内皮细胞24 h,构建大鼠脓毒症肺损伤细胞模型，XBJ治疗组采用生药浓度2.5、5、10、25、50 mg/mL的XBJ共同进行干预24 h。CCK-8检测各组细胞活性，筛选最佳XBJ浓度；Hoechst染色检测各组细胞凋亡率；Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和cleaved caspase3的表达；Transwell小室检测单层大鼠肺微血管内皮细胞通透性；Western blot检测紧密连接相关蛋白ZO-1、ZO-2和occludin的表达。结果 CCK8实验结果显示，XBJ的最佳浓度为10mg/mL。LPS处理后，大鼠细胞凋亡率明显升高，凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的比值和cleaved caspase3的表达水平增加；而XBJ治疗后，细胞凋亡率下降。LPS处理导致FITC-dextran含量显著增加，ZO-1、ZO-2和Occludin的蛋白表达水平降...     

甘草泻心汤联合美沙拉秦缓释颗粒对急性期溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障的作用研究

目的 探讨甘草泻心汤联合美沙拉秦缓释颗粒治疗急性期溃疡性结肠炎的可能作用机制。方法 将50只健康的雄性SD大鼠随机分为5组［空白组、模型组、甘草泻心汤组、美沙拉秦组及甘草泻心汤联合美沙拉秦组（以下简称联合组）］，每组10只。除空白组外，其余大鼠均采用3%硫酸葡聚糖钠盐（分子量40 000）水溶液自由饮用7 d复制急性期溃疡性结肠炎大鼠模型。模型复制成功后，空白组和模型组采用纯净水干预，其余3组分别采用甘草泻心汤、美沙拉秦混悬液、甘草泻心汤联合美沙拉秦混悬液灌胃治疗14 d。干预治疗后观察大鼠的一般情况，测量各组大鼠体重并进行疾病活动指数（DAI）评分，采用HE染色法观察结肠组织病理改变并进行组织学损伤指数（HI）评分，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清二胺氧化酶（DAO）和D-乳酸（D-LA）的含量，显色基质鲎试剂定量检测大鼠血清细菌内毒素，Western blotting检测ZO-1和Occludin蛋白表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠DAO和D-LA含量及细菌内毒素定量均升高（P <0.05），ZO-1和Occludin蛋白表达降低（P <0.05）。与模型组比较，甘草泻心汤组、美沙拉秦组及联合组的大鼠DAI评分和HI评分降低（P <0.05），DAO和D-LA含量及细菌内毒素定量均降低（P <0.05），ZO-1和Occludin蛋白表达升高（P <0.05）。各治疗组间比较，联合组干预治疗后疗效优于甘草泻心汤组和美沙拉秦组。结论 甘草泻心汤联合美沙拉秦缓释颗粒对急性期溃疡性结肠炎大鼠的肠黏膜屏障具有一定的修复功能，作用机制可能与ZO-1和Occludin蛋白表达有关，进而影响肠黏膜的通透性与完整性。     

调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病稳定期大鼠肠道黏膜屏障的影响

目的：探讨调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期大鼠肠道黏膜屏障的作用。方法：将SPF级SD大鼠随机分为空白(control)组、COPD模型(model)组、补肺健脾(BJ)组、补肺益肾(BY)组、益气滋肾(ZS)组和茶碱(Am)组。于第1～8周采用香烟烟雾暴露联合脂多糖滴注法制备COPD稳定期大鼠模型，第9～12周分别给予各组大鼠灌胃。观察动物一般情况，HE染色观察肺和结肠组织形态学变化，透射电镜下观察结肠组织超微结构变化，TUNEL法测定结肠组织细胞凋亡率，免疫组化染色检测结肠组织occludin (OCLN)和zonula occludens-1(ZO-1)蛋白表达，ELISA法检测血清二胺氧化酶(DAO)、肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)和D-乳酸(D-LA)水平。结果：与control组比较，model组大鼠出现进食减少、消瘦和大便溏薄等症状，支气管黏膜皱襞增多明显，肺泡结构紊乱，形成大的气腔，大量炎症细胞浸润；结肠黏膜结构破坏，大量上皮细胞坏死脱落，杯状细胞明显减少，吸收上皮细胞的微绒毛稀疏、缺损，细胞间隙增宽，细胞间连接装置损坏，结肠细胞凋亡率显著升高(P<...     

多系分化持续应激细胞保护肠上皮细胞间紧密连接蛋白研究

目的观察大鼠多系分化持续应激(Muse)细胞对肠上皮细胞间紧密连接结构的保护作用。方法贴壁筛选法自大鼠(6只, 购自中国食品药品检定院)股骨内分离大骨髓间充质干细胞(BMMSCs), 长时间胰蛋白酶孵育法(LTi)自BMMSCs中分离大鼠Muse细胞, 流式细胞术标记如白细胞分化抗原(CD)29、CD34、CD90等及特异阶段胚胎抗原-3(SSEA-3)抗体;免疫组织化学法标记Nanog同框蛋白(NANOG)等抗体, 定向诱导分化后标记α-甲胎蛋白(AFP)等鉴定其多能分化能力;重组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)建立体外肠上皮细胞损伤损伤模型;与Muse细胞共培养后检测细胞增殖能力及桥接蛋白-1(ZO-1)的表达水平及形态, 组间比较采用t检验。结果 LTi后, 大鼠BMMSCs中(2.57±0.57)%能够形成特征性的Muse细胞簇;流式细胞术结果表明, Muse细胞保留了BMMSCs表面分子特征, SSEA-3的阳性细胞比例[(73.2±1.4)%]显著高于BMMSCs[(2.3±0.3)%];免疫荧光实验表明, 培养的Muse细胞阳性表达NANOG等多能分化标记, 定向诱导分化后...     

芪黄煎剂对胃切除术后大鼠肠黏膜上皮细胞间紧密连接的影响

目的 探讨芪黄煎剂对胃切除术后大鼠肠黏膜上皮机械屏障紧密连接（TJs）形态、结构和其相关蛋白表达的影响。方法 SD大鼠90只随机分为6组，空白对照组不做任何处理；假手术组仅行腹部剖开及缝合处理，术后不做任何处理；模型组胃切除术后予肠内营养；芪黄煎剂低、中、高剂量组在胃切除术后除肠内营养外，给予低、中、高剂量[5、 10、 20 g/（kg·d）]的芪黄煎剂小肠内滴注；每组15只，干预1周。透射电子显微镜下观察大鼠肠黏膜上皮TJs的形态、结构及宽度；激光共聚焦显微镜下观察TJs相关Claudin-1、Occludin和闭锁小带蛋白（ZO-1）的分布和荧光强度；蛋白质印迹检测Claudin-1、Occludin和ZO-1表达水平。结果 空白对照组TJs表现出较强的连续性和完整性；假手术组、模型组TJs宽度较空白对照组变窄（P<0.01），模型组TJs宽度较假手术组变窄（P<0.01）；芪黄煎剂3组TJs宽度较模型组增宽（P<0.01），且呈剂量依赖性。与空白对照组比较，假手术组和模型组Claudin-1蛋白荧光强度和表达增加（P<0.05,P<0.01）,Oc...     

基于生物信息学途径研究CLDN4基因在卵巢癌中的作用及机制

目的 基于生物信息学途径,研究紧密连接蛋白4(CLDN4)在卵巢癌中的作用机制。方法 从GEO数据库获取含有12个卵巢癌组织和正常组织的基因芯片,结合Oncomine数据库进行CLDN4 mRNA表达差异分析,筛选出差异基因109个,利用Cytoscape 3.8.2软件进行GO富集和KEGG富集分析,String数据库进行蛋白相互作用网络分析,找到关键节点蛋白16个,选取差异最大的CLDN4基因进行深入探讨,进行表达分析和GeneMANIA功能预测。结果 筛选109个差异基因进行GO富集和KEGG信号通路分析,发现参与Wnt/β-catenin、MAPK、MEK-ERK等信号通路;构建功能模块,找到关键蛋白16个,其中CLDN4 mRNA在卵巢癌中高表达,CLDN4表达与临床分期和生存状态有相关性;预测CLDN4基因在功能上与顶端连接复合体、细胞-细胞连接、内皮屏障的建立、内皮细胞发育与分化等有关。结论 CLDN4在卵巢癌中高表达,在癌细胞的增殖、转移中有一定作用,有望成为诊断和治疗卵巢癌的新生物标记物。     

宫腔粘连患者子宫内膜中紧密连接蛋白1、表皮生长因子受体表达水平及其临床意义

目的 探讨宫腔粘连(IUA)患者子宫内膜中紧密连接蛋白1(ZO1)、表皮生长因子受体(EGFR)表达水平及其临床意义。方法 选取2020年2月至2021年2月株洲市中心医院收治的74例IUA患者作为观察组,根据IUA程度,将其分为轻度粘连组(n=17)、中度粘连组(n=38)、重度粘连组(n=19);选取同期35例因不孕症在同一医院住院行宫腔镜手术未发现异常的患者作为对照组。采用免疫组化法检测所有患者子宫内膜中ZO1和EGFR的表达情况;记录IUA患者临床资料,并分析其与ZO1、EGFR表达的关系;采用Spearman相关性分析IUA患者子宫内膜组织中ZO1和EGFR的关系。结果 观察组患者子宫内膜中ZO1阳性表达率(37.84%)低于对照组(82.86%),EGFR阳性表达率(71.62%)高于对照组(14.29%),差异具有统计学意义(P<0.05)。与轻度粘连组相比,中度粘连组、重度粘连组患者子宫内膜中ZO1阳性表达率降低,EGFR阳性表达率升高(P<0.05);与中度粘连组相比,重度粘连组患者子宫内膜中ZO1阳性表达率降低,EGFR阳性表达率升高(P<0.05...     

核黄素营养不良对大鼠肠道菌群的影响

目的 探究不同核黄素营养水平对大鼠肠道菌群的影响。方法 将36只雄性Wistar大鼠按体重随机分为正常对照组（normal control,NC），核黄素缺乏组（riboflavin deficiency group,RD）,核黄素不足组（riboflavin insufficiency group,RI）和核黄素缺乏对喂组（riboflavin deficiency pair-fed group,PF），分别喂养核黄素含量6mg/kg、<1mg/kg、3mg/kg和6mg/kg的AIN-93合成饲料3个月，实验结束时取血清、结肠和肠道内容物，分别测定核黄素营养状况指标、肠黏膜结构与紧密连接蛋白表达、短链脂肪酸和肠道菌群变化。结果 与NC组相比，核黄素营养不良大鼠血清及肝脏中核黄素及其衍生物含量下降，血清谷胱甘肽还原酶活性下降，肠黏膜结构发生损伤，紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1表达量降低，短链脂肪酸含量显著降低，肠道菌群多样性降低。RD组中Prevotella＿9、Alloprevotella、Phascolarctobacterium、Holdemania、Paras...