血塞通滴丸皂苷类成分含量测定及批次一致性评价研究

目的建立血塞通滴丸超高压液相色谱(UPLC)的指纹图谱方法并测定其主要成分含量,并结合相关化学计量学方法对产品质量批次一致性进行系统、全面和科学的评价。方法采用Agilent 1290 UPLC,Acquity UPLC BEH C18色谱柱,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,对5种皂苷类成分三七皂苷R_1(R_1)及人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd(Rg1、Re、Rb1、Rd)进行含量测定,并建立了血塞通滴丸的指纹图谱,通过对指纹图谱的相似度分析、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对血塞通滴丸的批次一致性进行全面评价,同时采用Hotelling’s T2和DModX 2种统计量,为不同批次产品的质量设定控制范围。结果 14批样品中,5种皂苷含量较为稳定,设定的质控范围分别为R_1 24.69～30.03 mg/g、Rg_1 102.60～122.44 mg/g、Re 12.93～15.45 mg/g、Rb_1 99.74～112.12 mg/g和Rd 23.35～31.75 mg/g。建立的指纹图谱共标定15个共有峰,经对照品化学指认共鉴定出R_1、Rg_1、Re、Rb_1、Rd 5个色谱峰。14批样品的相似度均大于0.998。PCA分析中14批样品无异常批次,表明血塞通滴丸的批次一致性较高,但存放时间差异在指纹图谱上有所体现;OPLS-DA分析得出,在造成14批样品有渐变趋势的变量中,已定量的Rb1和Rd影响较大;Hotelling’s T~2和DModX的控制上限分别为31.17和1.82。结论所建方法科学准确,简便可靠,不但可以用于血塞通滴丸的质量控制,而且可以对其批次质量一致性进行全面评价,可为解决中药质量批次一致性的共性问题提供借鉴。     

玉泉丸HPLC指纹图谱的建立及6个成分定量分析

目的建立玉泉丸HPLC指纹图谱,并同时测定玉泉丸中6种成分含量,为玉泉丸质量控制提供科学依据。方法采用HPLC法,Symmetery C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.0m L/min,柱温30℃。建立11批玉泉丸HPLC指纹图谱,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012A版)、聚类分析及主成分分析进行评价,同时测定葛根素、大豆苷元、毛蕊花糖苷、五味子醇甲、甘草酸及甘草苷的含量。结果建立了玉泉丸的HPLC指纹图谱,标定了共有峰12个,各批相似度均在0.9以上。多成分定量分析条件通过方法学考察,6个成分加样回收率均在92.06%～109.34%,RSD均在0.22%～2.76%。11批玉泉丸中葛根素、大豆苷元、毛蕊花糖苷、五味子醇甲、甘草酸及甘草苷含量范围分别为0.838～2.777、0.550～1.014、0.312～0.618、0.023～0.092、1.154～1.674、0.035～0.052 mg/g。结论 HPLC指纹图谱结合多成分同时测定的方法,快速、简便、重复性好,可为玉泉丸的质量控制提供方法学参考。     

雪莲通脉丸对冠心病气虚血瘀证小鼠血管内皮细胞功能相关指标ET-1、NO、ACE的影响

目的 观察雪莲通脉丸对冠心病气虚血瘀证小鼠内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)和血管紧张素转换酶(ACE)的调节作用. 方法 建立冠心病气虚血瘀证小鼠模型,随机分为空白对照组、模型对照组、地奥心血康组和雪莲通脉丸组. 给药4周后取小鼠血清,ELISA试剂盒测定ET-1、NO和ACE浓度. 结果 与模型组比较,雪莲通脉丸组NO浓度显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);ET-1浓度降低,差异具有统计学意义(P<0.05);ACE浓度显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01). 与地奥心血康组比较,雪莲通脉丸组NO浓度显著升高,ACE浓度显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01). 结论 冠心病气虚血瘀证的发生可能与血管内皮细胞的功能指标具有相关性. 其中,冠心病气虚血瘀证可能与血清ET-1、ACE浓度呈正相关、与血清NO浓度呈负相关. 雪莲通脉丸对冠心病气虚血瘀证小鼠血管内皮细胞的功能指标具有调节作用,其机制可能与升高血清NO浓度、降低ET-1、ACE浓度有关,且与地奥心血康组比较在改善血清NO、ACE方面具有一定优势.     

养心通脉方对大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体功能的影响

目的：研究养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体呼吸功能的影响。方法实验大鼠被随机分为3组（每组15只）：对照组、模型组、养心通脉方组,实验结束后所有动物采用脱颈椎法处死,通过测定呼吸控制率(RCR)、二磷酸腺苷磷/氧(ADP/O)比值及 ATP 的浓度来评价线粒体的呼吸功能,并对线粒体内胆固醇、磷脂（PL）、甘油三酯（TG）和游离脂肪酸（FFAs）的含量进行测定。结果模型组中大鼠心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均明显低于对照组（P＜0.001）,而在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均接近于对照组（P＞0.05）。与对照组相比,模型组中胆固醇、TG 和 FFAs 的水平均明显升高（P＜0.001）,同时磷脂（PL）水平明显降低（P＜0.001）。但在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内胆固醇、TG、FFAs以及PL的水平均与对照组无明显差异（P＞0.05）。结论养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体的呼吸功能及其膜完整性具有保护作用。     

液质联用法测定七宝美髯丸中5种成分的含量

目的：建立UPLC-PDA-MS/MS法同时测定七宝美髯丸中二苯乙烯苷、阿魏酸、金丝桃苷、补骨脂素、异补骨脂素的含量。方法：采用InertSustain^® C₁₈（3.0 mm×100 mm,3.0 μm）色谱柱,甲醇-0.05%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,进样量10 μL;PDA扫描范围：200~400 nm;质谱采用电喷雾离子源（ESI源）,正负离子扫描切换,多重反应监测模式进行定量分析。结果：七宝美髯丸中5种成分在线性范围内峰面积与质量浓度均呈良好的线性关系,加样回收率为99.06%~102.24%,精密度RSD值小于2%。在所设定的色谱条件下,七宝美髯丸中5个成分（二苯乙烯苷、阿魏酸、金丝桃苷、补骨脂素和异补骨脂素）于10 min内完全分离。结论：建立的UPLC-PDA-MS/MS方法快速简便、精密度好、灵敏度高,可用于七宝美髯丸中多种成分的含量测定和质量控制。     

高效液相色谱法同时测定六君子丸中7种成分的含量

目的：采用高效液相色谱法同时测定六君子丸中橙皮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、甘草苷、甘草酸铵、党参炔苷、茯苓酸共7种成分的含量。方法：色谱柱为Venusil MP-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5.0 μm）;流动相为甲醇-乙腈（45∶55,A）和0.2%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱,流速：1.0 mL·min^-1;柱温：40 ℃。结果：7种有效成分橙皮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、甘草苷、甘草酸铵、党参炔苷、茯苓酸分别在3.010~301.0 μg·mL^-1（r=0.999 6）、0.154~15.4 μg·mL^-1（r=0.999 4）、0.202~20.2 μg·mL^-1（r=0.999 2）、1.025~102.5 μg·mL^-1（r=0.999 5）、1.240~124.0 μg·mL^-1（r=0.9993）、5.030~503.0 μg·mL^-1（r=0.999 5）、0.412~41.2 μg·mL^-1（r=0.999 3）范围内含量与峰面积呈良好的线性关系;加样回收率在96.59%~98.34%之间。6批次供试品中橙皮苷、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅲ、甘草苷、甘草酸铵、党参炔苷、茯苓酸的含量分别为：5.126~5.773,0.058~0.078,0.105~0.132,1.257~1.514,2.012~2.241,8.256~8.425,0.235~0.334 mg·g^-1。结论：所建立的方法简便、快速、准确,可用于六君子丸的质量控制。     

麝香通心滴丸联合美托洛尔治疗冠心病心绞痛的疗效观察

目的探讨麝香通心滴丸联合美托洛尔治疗冠心病心绞痛的临床疗效和安全性。方法选取2015年12月—2017年1月上海市浦东医院收治的冠心病心绞痛患者90例,随机分为对照组和治疗组,每组各45例。对照组患者口服酒石酸美托洛尔缓释片,5 mg/次,2次/d,依据患者耐受程度和病情逐渐加量到10~25 mg/次,2次/d。治疗组在对照组的基础上口服麝香通心滴丸,2丸/次,3次/d。两组患者治疗时间均为2个月。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者心电图疗效、心绞痛持续时间和发作次数、ST段及不良反应情况。结果治疗后,对照组临床有效率和心电图疗效分别为77.7%和75.6%,均分别低于治疗组的93.3%和95.6%。两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者心绞痛持续时间和发作次数及ST段均显著降低,同组比较差异具有统计学意义(P0.05);且治疗组上述指标改善后水平显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗中,治疗组不良反应发生率为4.4%,明显低于对照组的13.3%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论麝香通心滴丸联合美托洛尔治疗冠心病心绞痛临床疗效显著,有助于减少心绞痛发作次数和持续时间,安全性高,具有一定的临床推广应用价值。     

二十五味珊瑚丸联合左乙拉西坦治疗癫痫的临床研究

目的探讨二十五味珊瑚丸联合左乙拉西坦片治疗癫痫的临床疗效。方法选取2015年4月至2016年10月中国人民解放军第二五四医院、天津市环湖医院收治的癫痫患者30例为研究对象,按照序列号法将患者随机分为对照组和治疗组,每组各30例。对照组餐后口服左乙拉西坦片,起始剂量500 mg/次,2次/d,一周后加至1 000 mg/次,2次/d。治疗组在对照组治疗基础上口服二十五味珊瑚丸,1 g/次,1次/d。两组患者均连续治疗3个月。观察两组的临床疗效,比较两组的淋巴细胞亚群水平、炎症因子水平、癫痫发作频率。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为73.33%、93.33%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平明显升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组淋巴细胞亚群水平明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组可溶性细胞间黏附分子-1(s ICAM-1)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)水平均明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组炎症因子水平明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组癫痫发作频率明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组癫痫发作频率明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论二十五味珊瑚丸联合左乙拉西坦片治疗癫痫具有较好的临床疗效,可减少癫痫发作频率,改善患者免疫功能,减轻炎症反应,具有一定的临床推广应用价值。     

六味地黄丸联合伏格列波糖治疗2型糖尿病的临床研究

目的探讨六味地黄丸联合伏格列波糖片治疗2型糖尿病的临床疗效。方法选取2016年10月—2017年11月吉林大学校医院内分泌科收治的92例2型糖尿病患者作为研究对象,根据随机区组设计法将患者分为对照组和治疗组,每组各46例。对照组餐前口服伏格列波糖片,0.2 mg/次,3次/d。治疗组在对照组治疗的基础上口服六味地黄丸,8丸/次,3次/d。以4周为1个疗程,所有患者均进行3个疗程治疗。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组的血糖水平、体质量指数(BMI)、血清指标、内皮功能和不良反应发生情况。结果治疗后,治疗组的总有效率为93.5%,显著高于对照组的73.9%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、BMI水平均显著下降,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,治疗组FPG、2 h PG、HbA1c均显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均显著降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,治疗组血清指标均显著低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)水平均显著升高,内皮素-1(ET-1)水平显著降低,同组治疗前后比较差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,治疗组内皮功能显著优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗期间,治疗组不良反应发生率为19.6%,显著低于对照组的8.7%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论六味地黄丸联合伏格列波糖片治疗2型糖尿病疗效显著,可有效控制血糖水平,降低体质量,改善胰岛功能,具有一定的临床推广应用价值。     

六味地黄丸联合唑来膦酸治疗妇女绝经后骨质疏松的临床研究

目的探讨六味地黄丸联合唑来膦酸治疗妇女绝经后骨质疏松的临床效果。方法选取2015年6月—2017年1月广东医科大学附属医院收治的86例绝经后骨质疏松患者,随机分为对照组和治疗组,每组各43例。对照组静脉滴注唑来膦酸注射液,5 mg/次,1次/年。治疗组在此基础上口服六味地黄丸,8丸/次,3次/d。所有患者均连续治疗12个月。观察两组的临床疗效,比较两组治疗前后视觉模拟(VAS)评分、简明健康状况调查量表(SF-36)评分、腰椎1~4骨质密度(BMD)、全髋关节骨BMD、左侧股骨颈BMD、Ⅰ型原胶原氨基端前肽(PINP)、β-胶原降解产物(β-CTX)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(BGP)的变化情况。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为79.07%、95.35%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组VAS评分、血清PINP、β-CTX、ALP及BGP水平显著降低,SF-36评分、腰椎1~4 BMD值、全髋关节骨BMD值、左侧股骨颈BMD值显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);治疗后,治疗组VAS评分、血清PINP、β-CTX、ALP及BGP水平低于对照组,SF-36评分、腰椎1~4 BMD值、全髋关节骨BMD值、左侧股骨颈BMD值高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论六味地黄丸联合唑来膦酸治疗妇女绝经后骨质疏松具有较好的临床疗效,可有效缓解患者疼痛症状,增加骨密度,提高生活质量,具有一定的临床推广应用价值。