Iressa抑制胃癌SGC-7901细胞生长的研究

目的:探讨iressa对胃癌SGC.7901细胞增殖,细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:用四氮甲唑蓝(MTT)法检测不同浓度iressa对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测不同浓度iressa对胃癌SGC-7901细胞周期分布和细胞凋亡的影响。结果:在5~20μmol/L浓度范围内,iressa对SGC-7901的生长具有明显的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性。10μmol/L和20μol/L的iressa可以导致SGC-7901细胞Gl期阻滞,并引起细胞凋亡。结论:Iressa可改变SGC-7901细胞周期分布,诱导细胞凋亡,从而抑制细胞增殖。     

维生素E琥珀酸酯抑制人胃癌细胞生长作用的研究

目的与方法：本实验采用体外细胞培养的方法,研究了维生素Ｅ琥珀酸酯（ＶＥＳ）对人胃癌ＳＧＣ－７９０１细胞生长和ＤＮＡ合成的影响,并进行了细胞亡形态学观察。结果：ＶＥＳ对ＳＧＣ－７９０１细胞生长和ＤＮＡ合成有明显抑制作用,并呈现剂量－－效应关系。同时,ＶＥＳ也诱导ＳＧＣ－７９０１细胞凋亡。结论：上述结果提示在离体条件下,ＶＥＳ通过抑制细胞ＤＮＡ合成及诱导细胞凋亡亡抑制ＳＧＣ－７９０１细胞生长。     

有丝分裂阻滞缺陷蛋白2选择性剪接体MAD2β在胃癌细胞多药耐药机制中的作用

目的观察有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(mitotic arrest deficient protein 2, MAD2)基因的选择性剪接体MAD2β在人胃癌多药耐药性形成过程中的作用机制.方法从耐阿霉素人胃癌细胞系SGC7901/ADR中提取总RNA,通过RT-PCR获得MAD2β全长编码cDNA,并克隆至pUCm-T载体,正向亚克隆插入真核表达载体pcDNA3.1中.以脂质体介导pcDNA3.1/MAD2β真核表达载体转染胃腺癌细胞SGC7901.以体外药敏试验检测转染MAD2β的胃癌细胞及其对照组细胞对化疗药物的敏感性.通过流式细胞仪检测MAD2β基因转染组和对照组胃癌细胞在细胞周期中的分布和细胞内阿霉素的荧光强度.结果 RT-PCR扩增获得约0.53 kb片段,DNA序列测定证实为MAD2的一种选择性剪接形式,命名为MAD2β.重组正义真核表达载体pcDNA3.1/MAD2β瞬时转染SGC7901细胞,经MTT法证实,转染细胞SGC7901/MAD2β对化疗药物阿霉素、长春新碱和丝裂霉素的耐药性增强.与SGC7901/pcDNA3.1比较,阿霉素大剂量短期作用后,SGC7901/MAD2β细胞内的平均荧光强度比对照组低(P<0.05).结论 MAD2β基因在一定程度上增强了人亲本胃癌细胞SGC7901对化疗药物的耐受性,其可能的机制为肿瘤细胞在化疗药物作用下,有丝分裂出现异常,耐药细胞通过调控MAD2基因产生不同的选择性剪接形式, 降低MAD2的活性或改变其功能,以通过纺锤体检测点并继续存活.     

RPL6/Taxreb107在胃癌耐药细胞系SGC7901/ADR中的差异表达及其与MDR相关性的初步研究

目的 探讨BPL6／Taxreb107在胃癌耐药细胞系SGC7901／ADR与胃癌细胞系SGC7901的差异表达,以及与胃癌多药耐药(MDR)的相关性。方法 提取SGC7901和SGC7901/ADR细胞系总RNA;采用内对照RT-PCR检测RPL6基因和Northem杂交、基因克隆与表达、真核表达载体的构建;以电穿孔法基因转染;以流式细胞仪检测瞬时转染细胞的阿霉素蓄积和潴留。结果 内对照RT-PCR和Northern杂交证实RPL6/Taxreb 107在SGC7901/ADR中高表达。将PCR产物克隆人pUCm-T载体并经测序证实。构建正义和反义真核表达载体(pcDNA3．1)并经酶切鉴定证实后,以电穿孔法将正义真核表达载体转入SGC7901,反义真核表达载体转入SGC7901／ADR。转染48h后检测转染细胞的阿霉素蓄积和潴留,结果提示RPI6／Taxreb107转入细胞后对细胞的耐药性有影响。结论 BPI6／Taxreb107在耐药胃癌细胞中高表达,对胃癌的MDR有影响。     

齐墩果酸对顺铂耐药胃癌SGC-7901细胞增殖及细胞凋亡的影响

目的 探讨齐墩果酸(OA)对顺铂耐药胃癌 SGC-7901(SGC-7901/CDDP)细胞增殖及细胞凋亡的影响.方法 体外诱导建立人胃癌顺铂耐药细胞株 SGC-7901 /CDDP,MTT 比色法检测OA对 SGC-7901/CDDP 细胞增殖的抑制作用;琼脂糖凝胶电泳检测基因组 DNA 的降解;蛋白质免疫印迹检测凋亡相关蛋白酶的激活.结果 MTT实验证明OA对SGC-7901/CDDP 细胞的生长有抑制作用,100 μmol/L OA作用72 h对SGC-7901/CDDP细胞的抑制率达62%,并表现为时间和剂量依赖性;琼脂糖凝胶电泳实验证明100 μmol/L的OA处理SGC-7901/CDDP细胞48 h后基因组DNA被降解,可见较典型的DNA梯形带;蛋白质免疫印迹分析表明,100 μmol/L的OA处理SGC-7901/CDDP细胞48 h后,细胞内凋亡相关的蛋白酶caspase-3被激活.结论 OA在体外能够诱导SGC-7901/CDDP细胞凋亡,诱导凋亡的途径可能是线粒体途径.     

冬凌草甲素抑制人胃癌SGC-7901细胞生长的G2/M期阻滞机制研究

目的 研究冬凌草甲素抑制人胃癌 SGC-7901 细胞生长作用及 G₂/M 期阻滞机制。方法 MTT 法检测冬凌草甲素对 SGC-7901 细胞生长的抑制作用;流式细胞术检测冬凌草甲素对 SGC-7901 细胞周期的影响;Western blotting 法检测冬凌草甲素对 Cdk1、Cyclin B1 两种蛋白表达的影响。结果 冬凌草甲素作用于 SGC-7901 细胞的 IC₅₀ 为 15.64 μmol/L;冬凌草甲素对 G₂/M 期细胞的阻滞作用随着浓度的增加而增强;Cdk1 和 Cyclin B1 蛋白的表达量随着冬凌草甲素浓度的增大显著降低。结论 冬凌草甲素通过下调 SGC-7901 细胞内 Cdk1、CyclinB1 两种蛋白的表达,阻滞细胞于 G₂/M 期而抑制 SGC-7901 细胞生长。     

低分子肝素对胃癌SGC-7901细胞株生长和VEGF表达的影响

目的:探讨低分子肝素对胃癌SGC-7901细胞株的生长以及其血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用MTT方法观察一定浓度速碧林(低分子肝素钙注射液)作用于SGC-7901细胞12h,24h,48h后细胞的生长情况。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析SGC-7901细胞VEGF mRNA表达的变化,同时用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清中VEGF的蛋白表达量。结果:速碧林对SGC-7901细胞的生长有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;与对照组相比,速碧林能降低SGC-7901细胞VEGF mRNA以及蛋白的表达。结论:低分子肝素能抑制SGC-7901细胞的生长以及VEGF的分泌。     

巴豆生物碱诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的 研究巴豆生物碱诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡.方法 运用倒置显微镜观察,流式细胞仪检测分析.结果 巴豆生物碱能改变细胞形态,诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡.结论 巴豆生物碱能诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡.     

Reversal of P-glycoprotein-mediated multidrug resistance in SGC7901/VCR cells by PPARγ activation by troglitazone

Over-expression of P-glycoprotein(P-gp),an ATP-dependent drug efflux pump,represents one of the major mechanisms that contribute to multidrug resistance(MDR) in cancer cells.This study examined the effects of troglitazone,a ligand of peroxisome proliferator-activated receptor gamma(PPARγ),on P-gp-mediated MDR in SGC7901/VCR cells(a vincristine-resistant human gastric cancer cell line).The expression of P-gp was detected by RT-PCR and Western blotting,respectively.The SGC7901/VCR cells were treated with 0.1 ...