刺五加组织培养与细胞工程进展

综述了国内外对刺五加组织培养与细胞工程研究的现状。分别从体细胞胚胎发生的影响因素外植体的发育程度和类型、培养基、植物生长调节剂的种类和浓度以及作用特点、体细胞胚胎的形态发生过程与解剖学和人工种子的包埋与萌发;茎尖外植体的离体培养与快速繁殖;根癌农杆菌和发根农杆菌对愈伤组织和新生体胚的遗化转化;毛状根培养生产刺五加次生代谢产物的研究现状进行了评述,并进一步分析了其中存在的问题,提出了一些建议。     

氯化镉诱发16HBE细胞系恶性转化过程中TIF3 p36的变化

目的 探讨氯化镉诱发人支气管上皮细胞（16HBE）恶性转化过程中不同阶段蛋白翻译起始因子（TIF3）p36 mRNA表达水平的变化,为进一步阐明氯化镉的分子致癌机制提供线索.方法 应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术,以及敏感先进的Taqman荧光定量PCR方法,检测并分析氯化镉诱发16HBE恶性转化不同阶段即转化期间细胞、转化细胞和成瘤细胞的TIF3 p36 mRNA表达量的变化.结果 相对于非转化对照细胞（16HBE）,氯化镉诱发恶性转化不同阶段细胞（转化期间细胞、转化细胞和成瘤细胞）的TIF3 p36 mRNA基因表达水平均明显升高（P＜0.01或P＜0.05）,其中低剂量组（5 μmol/L）所转化的各阶段细胞的eIF3 p36 mRNA平均表达量分别是对照细胞的3.1、5.9和9.9倍,中剂量组（10 μmol/L）的各阶段转化细胞的TIF3平均表达量分别是对照细胞的7.1、6.8和14.8倍,高剂量组（15 μmol/L）的各阶段转化细胞的TIF3 p36平均表达量分别是对照细胞的3.6、3.0和9.1倍.这些不同剂量组的研究结果提示,eIF3 p36的异常表达量与氯化镉诱发16HBE细胞恶变程度之间有正相关关系,但与镉的剂量无关.结论 氯化镉在诱发16HBE细胞恶变过程中,存在明显的蛋白翻译启动因子eIF3 p36异常表达现象,其表达水平与细胞的恶变程度密切相关,这可能是氯化镉诱发人细胞肿瘤的重要分子致癌机制之一.     

人源性中性内肽酶稳定转染细胞株的建立

目的：获得中性内肽酶（NEP）及失活中性内肽酶（inNEP）稳定表达的细胞株。方法：用酶切及基因测序鉴定质粒pcDNA3．1-hNEP及pcDNA3．1-inNEP（E585V）；以脂质体Ljpofectamjne^TM2000介导pcDNA3．1-hNEP及pcDNA3．1-inNEP（E585V）转染神经母细胞瘤细胞SK-N-SH，分别获得两者的稳定表达细胞株；用RT-PCR及Western blot分析NEP的表达。结果：转染4周后，可见G418单克隆抗性细胞株形成，转染pcDNA3．1．hNEP及pcDNA3．1-inNEP（E585V）的细胞NEP表达均增高。结论：获得稳定转染pcDNA3．1-hNEP及ocDNA3．1-inNEP（E585V）的细胞株。     

变迁与整合:医患关系的社会学视角分析

医患关系的形成与变迁由社会的发展而决定。经济、历史、文化、科技以及宗教的发展都会对其产生较大的影响。我国目前正处于社会转型时期。因此，分析与探讨现时代的医惠关系必须充分地了解社会的基本背景与状态，在此基础上思考我国医患关系的重新整合。     

叶绿酸抑制细胞恶性转化的蛋白表达差异分析

目的：采用蛋白质组学技术分析叶绿酸抑制细胞恶性转化的蛋白差异表达,探讨叶绿酸抗细胞转化的分子机制.方法：一步法分别提取二羟环氧苯并芘（BPDE）诱导的转化细胞B-1和叶绿酸与BPDE共处理的抗转化细胞CB-1总蛋白,应用二维凝胶电泳技术和相应软件ImageMaster 2D3．10分析两种细胞的蛋白质组变化．基质辅助激光解吸电离-飞行时间-质谱（MALDI-TOF-MS）结合数据库检索鉴定部分表达有差异的蛋白斑点。结果：与B-1细胞相比．CB-1细胞中有47个蛋白斑点出现表达差异，其中19个蛋白斑点表达升高．28个蛋白斑点表达降低；质谱分析初步鉴定出5个差异蛋白斑点。结论：叶绿酸抑制细胞恶性转化可引起大量蛋白表达差异．这些差异蛋白可能参与了叶绿酸抗细胞转化的过程。     

胃肠道间质瘤相关PDGFRA基因突变体功能的研究

目的 探讨胃肠道间质瘤中一个新的PDGFRA基因突变位点L839P在肿瘤发生发展中的恶性转化作用.方法 采用脂质体法,将重组质粒稳定转染中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO).应用Western blot法,检测PDGFRA蛋白的表达情况.应用细胞计数法,描绘细胞生长曲线;应用流式细胞仪榆测细胞周期及细胞凋亡,并观察稳转突变型重组质粒CHO细胞在裸鼠体内的成瘤性.将PDGFRA突变型与kit野生型重组质粒共同瞬时转染CHO细胞,用Western blot法检测kit蛋白的表达及其磷酸化状态.结果 阴性对照组、实验组及阳性对照组细胞中均有PDGFRA蛋白表达.实验组和阳性对照组较阴性对照组和空白对照组细胞生长速度加快;空白对照组、阴性对照组、实验组和阳性对照组处于增殖期的细胞比例分别为28.4%、24.5%、43.8%和40.9%,凋亡率分别为1.8%、1.9%、1.5%和1.6%.接种阳性对照组及实验组稳转细胞的裸鼠,3周后均见肿瘤生长.PDGFRA突变型质粒与kit野生型质粒共转染CHO细胞后,磷酸化kit蛋白表达明显增强.结论 PDGFRA基因L839P点突变为功能获得性突变,对正常细胞有较强的恶性转化作用,并口丁激活kit蛋白,导致肿瘤发生.     

农杆菌介导的高卢蜜环菌遗传转化体系的优化

目的 该研究在已有高卢蜜环菌遗传转化体系的基础上，对遗传转化体系进行优化以提高转化效率，为后续蜜环菌分子标记辅助育种、基因功能的研究奠定基础。方法 首先构建遗传转化的质粒pH101-PAgGPD-GFP-TrpC，将其转化到大肠埃希菌中扩大培养并提取质粒。提取的质粒分别转化LBA4404，EHA105，GV3101，AGL-1共4种不同的农杆菌。用转化后的农杆菌浸染高卢蜜环菌，筛选出转化率最高的农杆菌。再分别从抗生素种类及浓度、共培养时间、菌液浓度和浸染方法5个方面对农杆菌介导的高卢蜜环菌遗传转化体系进行优化。采用Synbiosis ProtoCol 3测量影像分析仪观察蜜环菌在不同条件下的表型谱。结果 优化后高卢蜜环菌遗传转化条件为农杆菌菌株采用EHA105，菌液浓度为吸光度A_{600 nm}=0.6；共培养时间为2 d，浸染方式为负压浸染10 min，初筛培养基为含400 mg·L^-1头孢噻肟钠，10 mg·L^-1潮霉素的PDA培养基，复筛培养基为含12 mg·L^-1潮霉素的PDA培养基。结论 该研究在已经建立的高卢蜜环菌的遗传转化体系的基础上成功对该体系进行了优化，且优化前后的转化率差异存在明显统计学意义（P<0.05），即优化后高卢蜜环菌的转化效率约为4.33%，相比于优化前提高了约8倍。     

Microbial transformation of asiatic acid by Alternaria longipes

Asiatic acid is a major pentacyclic triterpene isolated from Centella asiatica. It shows a variety of bioactivities. In order to obtain its derivatives, potentially useful for detailed pharmacological studies, the substrate was subjected to incubations with selected micro-organisms. In this work, asiatic acid was converted into three new compounds: 2α,3β,23,30-tetrahydroxyurs-12-ene-28-oic acid (1), 2α,3β,22β,23-tetrahydroxyurs-12-ene-28-oic acid (2), and 2α,3β,22β,23,30-pentahydroxyurs-12-ene-28-oic acid (3) by the fungus Alternaria longipes AS 3.2875. The structures of the three metabolites were determined by 1D and 2D NMR spectral data.     

Section 1 The effect of ibuprofen on lymphocyte stimulation by phytohaemagglutillin in Vitro

Summary

A study was carried out to determine the effects of ibuprofen, phenylbutazone and indomethacin at different concentrations on phytohaemagglutinin-induced stimulation of lymphocytes in vitro. The results indicate that all three drugs inhibit lymphocyte stimulation, and at concentrations achieved by ibuprofen and phenylbutazone in vivo. It may be, therefore, that part of the effect of ibuprofen in rheumatoid arthritis is due to inhibition of lymphocyte function.     

Transformation: are nurse leaders in critical care ready?

Aim The aim was to determine whether nursing leaders met the criteria for transformational and/or transactional leadership. Background Many changes have occurred in South Africa and are reflected in the health-care systems. As a result, it has become crucial to source leaders who are able to manage the change process effectively so as to ensure the success and survival of our health-care organizations. Methods The 45-item Multifactor Leadership Questionnaire (Rater) was completed by 41 respondents out of a population of 121. A proportional stratified simple random sampling technique was used to select the raters of seven leaders. Results Most nursing leaders role-modelled the culture of the organisation but did not stimulate their followers intellectually and did not demonstrate innovative motivation or individual consideration. Consequently, their followers may exhibit a lack of commitment to collective goals, with detrimental effects on the health-care organisation as a whole. Conclusions and implications for nursing managers Nursing leaders should be trained to become transformational leaders so as to encourage their followers to become innovative and motivated to render high quality nursing care.