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目的研究人参皂苷Rg1对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导的神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞)损伤的保护作用。方法用Aβ25-35处理人SK-N-SH细胞,模拟Alzhermer′s(AD)病人体内神经元病理损伤,并以人参皂苷Rg1拮抗其作用。采用MTT比色法检测细胞活力;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;DNA梯型观察凋亡细胞的DNA片段化;化学比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-PCR检测细胞淀粉样肽蛋白前体(APP)基因、中性内肽酶(NEP)基因的表达情况;Western Blot检测细胞APP和NEP蛋白的表达情况。结果20μmol/LAβ25-35诱导SK-N-SH细胞24 h细胞活力下降(均P<0.01),细胞凋亡率为33.9%,DNA断裂呈片段状,细胞培养液及细胞内MDA含量增加,SOD活性降低。而人参皂苷Rg1能提高细胞的存活率,减少细胞损伤,使细胞培养液及细胞内MDA含量降低,SOD活性提高(P<0.01),RT-PCR结果显示人参皂苷Rg1可降低APP基因的表达并提高NEP基因的表达,同时Western Blot结果显示人参皂苷Rg1可降低APP蛋白的表达并提高NEP蛋白的表达。结论人参皂苷Rg1对Aβ25-35造成的细胞毒性具有一定的保护作用,其作用机理可能与人参皂苷Rg1能提高SK-N-SH细胞的抗氧化能力以及下调APP基因的表达,上调NEP基因的表达,从而抑制细胞凋亡有关。 相似文献
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培养神经细胞的氧自由基损伤及银杏叶提取物的治疗作用 总被引:8,自引:1,他引:8
目的 探讨氧自由基在Alzheimer病(AD)发病中的作用和评价银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,EGb)的临床应用价值。方法 以产生超氧阴离子系统黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶(X/XO)作用于PC12细胞,并以EGb拮抗其作用,电镜观察细胞形态变化,MTF法检测细胞存活率,流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT-PCR技术分析凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达变化。结果 经X/XO损伤后,细胞存活率降低,凋亡率增加,促凋亡基因Bax表达上调。EGb(20mg/L)能改善凋亡情况。结论氧 自由基可诱导神经细胞凋亡而促进AD发生,EGb对神经细胞有保护作用,提示可用于AD的临床治疗与预防. 相似文献
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培养两种不同分化程度的人胃腺癌SGC-7901和NKM-45细胞,分离其胞浆和胞核KCI抽提液。用葡聚糖包被活性炭饱和分析法分别测定各细胞组分中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、雄激素受体(AR)。结果:SGC-7901细胞胞浆胞核抽提液中ER含量为30.2和35.7fmol/mg(1fmol=10-15mol)蛋白,PR含量为20.3和22.7fmol/mg蛋白,NKM-45细胞胞浆和胞核抽提液中ER含量为24.8和25.1fmol/mg蛋白,PR含量为16.4和18.6fmol/mg蛋白。而两种细胞AR均为阴性(<6~10fmol/mg蛋白)。结果说明两种胃癌细胞均为ER、PR阳性,而分化程度更低、转移性较强的SGC-7901细胞株ER、PR含量较高。提示ER水平与胃癌细胞的分化程度相关,ER阳性胃癌组织似为性激素依赖性,内分泌治疗可能有效果。 相似文献
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载脂蛋白E基因型在老龄人中频率分布及与痴呆发病关系 总被引:1,自引:0,他引:1
为了解中国正常老年人中ApoE基因型的分布情况,分析Apo Eε4基因型与老年痴呆症状发生的相关性,我们随机选择84例老龄人作对象,分离其白血细胞基因组DNA,用PCR技术扩增ApoE带有多态性位点的第四外显子片段,根据限制性酶切片段长度多态性分析方法检测其基因型。 相似文献
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6.
目的: 探讨脑中性内肽酶(NEP)外源表达对神经毒物质β淀粉样肽(Aβ)诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法: 采用脂质体法将含中性内肽酶NEP的四质粒系统慢病毒载体转染293FT包装细胞,制备高滴度病毒载体,感染Aβ处理的SK-N-SH细胞,用Western blotting方法检测NEP对Aβ的降解作用、MTT法检测细胞存活率、流式细胞术分析细胞凋亡情况、RT-PCR技术测定凋亡相关基因bcl-2及bax的表达及caspase-3活性检测。结果: 胞内高表达的NEP能够显著降解Aβ,其降解程度与NEP的表达量有剂量依赖关系。细胞存活率及流式细胞术检测结果显示NEP高表达可减轻Aβ诱导的细胞凋亡,细胞存活率于感染病毒后48 h最强,为对照的170%(P<0.01),NEP活性组的凋亡率为3.86%,低于对照组的6.41%;RT-PCR结果显示NEP对Aβ诱导的细胞凋亡保护作用可能是通过减少bax的表达,抑制了caspase-3的激活程度来实现的。结论: NEP可以降解Aβ,可以保护由Aβ沉积所致的神经细胞凋亡。 相似文献
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对测定血清α_1-抗胰蛋白酶(α_1-AT)常用的酶法和免疫测定法进行了比较。结果表明,火箭免疫电泳法的灵敏度、准确性优于酶法。用这两种方法同时测定癌性及非癌性肺疾病患者的血清α_1-AT,与正常对照组比较,肺癌及非癌性肺疾病组血清α_1-AT水平均明显增高;用免疫测定法测定的结果还显示,肺癌组血清α_1-AT高于非癌性肺疾病组,差异有显著性。提示血清α_1-AT的改变可能对肺癌的临床诊断和鉴别有参考价值。 相似文献
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作者采用酶法及免疫电泳法同时测定了多种消化系统癌症患者血清α1-抗胰蛋白酶水平,结果显示数种消化系统癌症患者血清α1-AT水平均较正常对照组显著增高(P〈0.001),两种测定方法结果一致。结果证明血清α1-AT,作为一种急性时相反应物,在各种消化系统瘤发生时可非特异性升高,因此α1-AT测定对这些肿瘤的诊断有一定临床价值,两种测定方法的比较说明免疫电泳法是血清α1-AT临床测定的较好方法。 相似文献
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老年性痴呆的病理学研究进展山东医科大学(250012)山东省医学科学院济南市中心医院崔行陈泽洪崔云燕老年性痴呆(AD)是老年人常见的、病因不明的慢性退行性大脑病变,其发病危险随年龄增高而增加。本病分早发型与晚发型两种。早发型AD发病年龄为40~50岁... 相似文献
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测定了8例正常和21例BPH前列腺组织全匀浆以及8例正常和14例BPH前列腺上皮细胞和间质细胞内的γ-GT活性。结果表明,BPH前列腺组织全匀浆、上皮及间质细胞内γ-GT活性分别为正常前列腺组织的4.5、4.0和4.3倍,正常及BPH前列腺上皮细胞内γ-GT活性均显著高于间质细胞,提示在良性前列腺增生中前列腺组织内γ-GT活性增高可能起重要作用。 相似文献