成熟卵泡比例与ＨＣＧ注射时机的选择及对卵子发育潜能的影响

【目的】 探讨采用成熟卵泡比例来决定ＨＣＧ注射时机的可行性,研究在不同成熟卵泡比例的情况下注射ＨＣＧ对卵子发育及妊娠结局的影响,摸索最适合的成熟卵泡比例。【方法】 本回顾性研究共纳入１９８例需行单精子胞浆注射（ＩＣＳＩ）助孕治疗的女性不孕患者。按照ＨＣＧ日成熟卵泡（≥１８ｍｍ）的不同比例将患者分成３组：①低比例组：成熟卵泡比例 ≤ ２０％;②中比例组：２０％ ＜ 成熟卵泡比例 ≤ ４０％;③高比例组：成熟卵泡比例 ＞ ４０％,注射ＨＣＧ后３６ｈ取卵,将获得的卵丘复合物剥除卵丘颗粒细胞用于检测ＧＲＥＭ１和ＨＡＳ２基因的ｍＲＮＡ表达水平。分别统计和比较３组患者卵子成熟、受精、胚胎发育及临床妊娠情况。【结果】卵子成熟率在低比例组显著低于中比例组和高比例组（Ｐ ＜ ０．０５）。正常受精率在３组间无显著差异（Ｐ ＞ ０．０５）。异常受精率在低比例组显著低于中比例组和高比例组（Ｐ＜ ０．０５）。卵裂率、可利用胚胎数在低比例和中比例组之间无显著差异,但均高于高比例组（Ｐ ＜ ０．０５）。优质胚胎率、种植率、妊娠率在低比例组均显著高于中比例组和高比例组（Ｐ＜ ０．０５）。卵丘颗粒细胞ＧＲＥＭ１和ＨＡＳ２基因ｍＲＮＡ表达水平在低比例组显著高于中比例组和高比例组（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 采用成熟卵泡比例决定ＨＣＧ的注射时机可以更全面地反映卵泡的整体发育状态,并为把握ＨＣＧ注射时机提供更为准确的依据。随着成熟卵泡比增加卵子的发育潜能逐渐降低,因此注射ＨＣＧ时应将成熟卵泡的比例控制在一定范围较合适。     

药物作用下的广州管圆线虫幼虫表皮纹理变化的数字化特征研究

摘 要： 【目的】 通过采集药物作用下广州管圆线虫３／４期幼虫表面纹理变化的超微结构图像,进行数据化特征的研究,探讨可能的药物作用规律。【方法】 本文采用基于灰度共生矩阵的图像纹理分析方法,对体内用药、体外用药和不用药３组共２１条的广州管园线虫幼虫表皮电镜图像进行预处理后,分别在不同的扫描方向下提取对比度、能量、相关性、同质性和熵５个特征值,并进行单因素方差分析、秩和检验以及描述性统计分析。【结果】样本图像在４个方向上的几乎所有特征都有统计学意义,其中能量和熵在各方向上均具有显著性差异,对比度和同质性特征值在不同方向角度上存在差异,并呈现一定的分布规律。【结论】虫体纹理的数字特征可用于识别和评估广州管圆线虫的用药状态。     

短时受精后早剥卵对胚胎质量及妊娠结局的影响

摘 要： 【目的】 探讨短时受精后早期剥除颗粒细胞对体外受精胚胎质量及妊娠结局的影响。【方法】 回顾性分析２０１２年在本中心助孕的有早剥卵的１０３个ＩＶＦ周期与７４个ＩＣＳＩ周期,以ＩＣＳＩ组为对照,比较两组的２ＰＮ受精率、多ＰＮ受精率、可利用胚胎形成率、卵裂期优质胚胎形成率、种植率和临床妊娠率,再以ＩＶＦ周期中的卵子是否进行早剥分为两组,比较早剥对ＩＶＦ周期中２ＰＮ受精率、多ＰＮ受精率、可利用胚胎形成率、卵裂期优质胚胎形成率、种植率和临床妊娠率的影响。【结果】在ＩＶＦ周期中共有１１８１枚卵子纳入研究,其中早剥卵子５１３枚,非早剥卵子６６８枚,在ＩＣＳＩ周期中共有６１９枚成熟卵子纳入研究。结果显示,ＩＶＦ组的２ＰＮ受精率、卵裂期优质胚胎形成率低于ＩＣＳＩ组,多ＰＮ受精率高于ＩＣＳＩ组,差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）;其余比较均无统计学差异。而ＩＶＦ的全部卵子中,早剥卵子组的２ＰＮ受精率、多ＰＮ受精率、可利用胚胎形成率、优质胚胎形成率、种植率、临床妊娠率与非早剥组相比,均无统计学差异（Ｐ＞ ０．０５）。 【结论】 与传统ＩＣＳＩ相比,短时受精后早期剥除卵丘颗粒细胞并未降低可利用胚胎形成率;与常规ＩＶＦ相比,早剥也未提高多ＰＮ受精率;早剥卵是安全的,并能够使受精情况不明的患者受益。     

直肠系膜结构解剖和腔镜下观察的对比研究

摘 要： 【目的】 通过尸体解剖和手术录像对比研究直肠系膜、Ｄｅｎｏｎｖｉｌｌｉｅｒｓ筋膜、直肠侧韧带、直肠系膜周围间隙等结构的解剖特点,进一步了解全直肠系膜切除（ＴＭＥ）解剖根据。【方法】对５具成人男性尸体标本,进行解剖;复习我科腹腔镜全直肠系膜切除治疗的１０例中低位直肠癌男性患者手术录像资料。进行尸体和腔镜下直肠系膜结构的对比研究。 【结果】盆脏筋膜包绕直肠周围脂肪结缔组织、淋巴组织、供应直肠血管回流血管和神经等形成直肠系膜。而盆脏筋膜与盆壁筋膜之间有层疏松结缔组织,在直肠后方明显。直肠侧方盆腔自主神经分支形成致密类筋膜结构---侧韧带,而直肠前方位于Ｄｅｎｏｎｖｉｌｌｉｅｒｓ筋膜的后方,呈环周状包绕直肠的固有筋膜。【结论】大多数情况下,除了侧方的侧韧带,行ＴＭＥ正确的层面是无血管的疏松结缔组织层。游离过程应紧贴直肠系膜,保证系膜完整性,减少盆腔自主神经损伤。     

卵巢原发原始神经外胚层肿瘤4例临床分析并文献复习

原始神经外胚层肿瘤（primitive neuroectodermal tumor,PNET）分为中枢型和外周型,外周型PNET属于尤文肉瘤家族肿瘤,其发生是由于基因调控失常,原始干细胞向神经上皮各不同阶段分化,成为形态上类似于儿童中枢神经系统的肿瘤,其组织学及临床生物学行为类似于骨外的尤文肉瘤。卵巢原发PNET为外周型PNET,属于卵巢单胚层畸胎瘤,极为罕见,疾病早期即可发生转移、容易复发,预后极差。其临床表现缺乏特异性,患者常以腹痛、腹胀、盆腔包块就诊,病理是诊断的金标准。目前无明确诊治指南,国内外相关文献多为病例报道,1975-2017年英文文献报道的原发于卵巢的PNET仅17例。本文报道4例我院诊治的卵巢原发PNET,同时复习相关文献,描述此种罕见疾病的临床表现、治疗方法及预后情况。     

复杂性腹腔感染的预后及并发ARDS 的危险因素分析

目的:探讨复杂性腹腔感染（cIAI）患者并发急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的危险因素和预后因素。方法:回顾性分析 2015 年1月—2021年3月重症监护病房（ICU）收治的cIAI 患者124例。根据进入ICU 1周内是否发生ARDS 分为ARDS 组和 非ARDS 组,其中ARDS 组60 例,非ARDS 组64 例;根据28 d 生存状况为生存组和死亡组,其中生存组73 例,死亡组51 例。 采集患者的入院基线资料,包括年龄、性别、吸烟史、饮酒史、感染部位、是否接受外科干预,收集入ICU 第1 个24 h 内的相关实 验室指标,包括白细胞计数（WBC）、降钙素原（PCT）、C 反应蛋白（CRP）、血小板计数（PLT）、可溶性纤维蛋白单体/D 二聚体 （FDP/D-dimer）、白蛋白（ALB）、促凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FBG）、乳酸（Lac）、24 h 液体平衡量,计算患者进入ICU 24 h 内序贯器官衰竭评分（SOFA）、显性弥散性血管内凝血（DIC）评分进行单因素分析;建立多因素Logistic 回归模型,分析cIAI 患 者并发ARDS 的危险因素及死亡风险因素。绘制受试者工作特征（ROC）曲线,评价指标对cIAI 继发ARDS 和死亡结局的预测 价值。结果:ARDS 组年龄、血清ALB 水平、SOFA、显性DIC 评分、外科干预等指标与非ARDS 组比较差异均有统计学意义 （t=-3.673、-3.877、-7.364、-2.756,字2=6.115,均P＜0.05）;Logistic 回归分析显示SOFA（OR=1.570,95%CI:1.277~1.9307）和显性 DIC 评分（OR=1.631,95%CI:1.063~2.503）是cIAI 患者1 周内并发ARDS 的独立危险因素（均P＜0.05）,SOFA 联合显性DIC 评 分预测ARDS 的曲线下面积（AUC）为0.901（95%CI:0.86~0.97）,灵敏度和特异度分别为93.2%和76.6%。生存组患者年龄、 ALB、PLT、SOFA 与死亡组比较差异均有统计学意义（t=-2.510、-4.741、-2.071、-6.390,均P＜0.05）;Logistic 回归分析显示, SOFA（OR=1.408,95%CI:1.209~1.641）和ALB（OR=0.914,95%CI:0.858~0.973）是cIAI 患者死亡的独立危险因素（均P＜0.05）, SOFA联合ALB 预测28 d死亡率的AUC 为0.864（95%CI:0.80~0.93）,灵敏度和特异度分别为91.3%和72.7%。结论:SOFA 联 合显性DIC 评分对cIAI 继发ARDS 具有一定预测价值;SOFA联合ALB 测定对预测cIAI 患者死亡风险具有一定预测价值。     

部分型母源性１６单亲二体型与均称型胎儿生长受限

【目的】应用人类全基因组单核苷酸多态性芯片（ＳＮＰ ａｒｒａｙ）探讨特发性均称型胎儿生长受限（Ｓｙｍｍｅｔｒｉｃ ＦＧＲ）的病因。【方法】对血清学筛查唐氏综合征高风险且系列超声检查发现２０周前已出现胎儿生长受限征象的３６例孕妇行羊水胎儿细胞Ｇ显带染色体核型分析,其中核型正常的３４例孕妇,应用人类全基因组ＳＮＰａｒｒａｙ对羊水中的胎儿细胞及父母双方的外周血细胞进行遗传学分析。 【结果】 发现２例部分型母源性１６单亲二体型（ｍＵＰＤ １６）,１例位点为１６ｐ１２．２－ｐ１３．３,长度约为２１．０Ｍｂｐ和１６ｑ２４．１－２４．３,长度约为４．１ Ｍｂｐ;另１例位点为１６ｑ２１－ｑ２４．３,长度约为２４．１ Ｍｂｐ。【结论】 部分型母源性１６单亲二体型可能与均称型胎儿生长受限的发生有关,影响胎儿生长发育的基因有可能定位于１６ｑ２４。     

控制性卵巢刺激对多囊卵巢综合征患者和正常排卵妇女卵源性因子表达的差异

【目的】 研究控制性卵巢刺激对多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）患者和正常排卵妇女卵母细胞和颗粒细胞中卵源性因子（生长分化因子ＧＤＦ９和骨形成蛋白ＢＭＰ１５）表达的影响及两组妇女之间的表达差异。【方法】 收集ＰＣＯＳ患者和正常排卵的不孕妇女共９７例,分为４组：２２例未经历卵巢刺激（未刺激－ＰＣＯＳ组）和１８例经历卵巢刺激（刺激－ＰＣＯＳ组）的ＰＣＯＳ患者,２８例未经历卵巢刺激（未刺激－对照组）和２９例经历卵巢刺激（刺激－对照组）的正常排卵妇女。收集４组患者的卵母细胞和颗粒细胞,采用巢式实时定量ＰＣＲ的方法检测两种细胞中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平。【结果】 在正常排卵妇女的卵母细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为２４．７９ （２．９６－１０９．７３）和０．９３ （０．０５－３．６５）,在卵巢刺激组分别为１４９．９４ （５５．３８－３８７．９３）和４１．６５ （６．５０－９６．１１）,两种因子在卵巢刺激组的表达水平均显著高于未刺激组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。在正常排卵妇女的颗粒细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为０．０２ （０．００９－０．２１）和０．００８（０．００１－０．１６）,在卵巢刺激组分别为０．１０ （０．０６, ０．１８）和０．０２（０．０１－０．０３）,两种因子在卵巢刺激组的表达水平均显著高于未刺激组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。在ＰＣＯＳ患者的卵母细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为２３．８３ （２．２９－６５．７２）和０．０９ （０．０５－２９．３２）,在卵巢刺激组分别为４４．８１ （５．９３－４８９．１９）和０．１０ （０．０５－１１．４４）,两种因子的表达在未刺激组和卵巢刺激组均没有差异（Ｐ ＞ ０．０５）。在ＰＣＯＳ患者的颗粒细胞中,ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达水平在未刺激组分别为０．１１ （０．０６, ０．１６）和０．０００ ００５（０．０００ ００４ ８－０．０００ ００９）,在卵巢刺激组分别为０．０５ （０．０３, ０．０９）和０．０２（０．００７－０．０３）, ＧＤＦ９ ｍＲＮＡ的表达在卵巢刺激组显著低于未刺激组,而ＢＭＰ１５ ｍＲＮＡ的表达在卵巢刺激组显著高于未刺激组,差异均有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 控制性卵巢刺激可以促进正常排卵妇女卵母细胞和颗粒细胞中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５的表达,但是对ＰＣＯＳ患者卵母细胞中两种因子的表达没有促进作用,提示ＰＣＯＳ患者卵母细胞中卵源性因子的表达对卵巢刺激的反应性受到抑制,可能影响卵泡发育和卵母细胞成熟,从而导致卵母细胞质量低下。     

美托咪啶预处理对大鼠自体原位肝移植术后肠道损伤的影响

【目的】 建立大鼠自体原位肝移植模型,探讨右美托咪啶（Ｄｅｘ）及其拮抗剂阿替美唑（Ａｔｉｐ）预处理对大鼠自体原位肝移植术后肠道结构与功能改变的影响。【方法】４８只成年ＳＤ大鼠,随机分为假手术组（Ｓ组）、模型组（Ｍ组）、低剂量Ｄｅｘ预处理组（Ｄ１组）,高剂量Ｄｅｘ预处理组（Ｄ２组）,低剂量Ａｔｉｐ＋低剂量Ｄｅｘ预处理组（Ａ１组）,高剂量Ａｔｉｐ＋高剂量Ｄｅｘ预处理组（Ａ２组）。术后８ ｈ留取末端回肠与动脉血,观察肠黏膜病理改变并行Ｃｈｉｕ’ｓ评分,ＥＬＩＳＡ法检测血清内毒素（ＬＰＳ）水平与二胺氧化酶（ＤＡＯ）活性,分光光度法测定肠道ＭＤＡ含量与ＳＯＤ活力,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ法检测肠上皮紧密连接Ｏｃｃｌｕｄｉｎ与ＺＯ－１蛋白的表达。【结果】Ｍ组肠道病理损伤严重,ＬＰＳ与ＭＤＡ水平升高,紧密连接破坏;Ｄｅｘ预处理后,Ｄ２组较Ｄ１组肠道保护效应明显,ＬＰＳ与ＭＤＡ水平降低,ＳＯＤ活力增强;相反,Ａｔｉｐ＋ Ｄｅｘ预处理后,Ｄｅｘ肠道保护效应显著减弱。【结论】 Ｄｅｘ预处理呈剂量依赖性地减轻大鼠自体原位肝移植术后的肠道损伤,可能与其抗炎、抗氧化作用密切相关。     

激活核因子Ｅ２相关因子２信号通路减轻高糖诱导足细胞的凋亡

【目的】 探讨激活核因子Ｅ２相关因子２（Ｎｒｆ２）通路能否减轻高糖诱导足细胞的凋亡。【方法】体外培养小鼠足细胞,分为５组：对照组、高渗组、高糖组、高糖＋叔丁基对苯二酚（ ｔＢＨＱ）,高糖＋Ｎ－乙酰半胱氨酸（ＮＡＣ）。流式细胞仪检测细胞内活性氧和凋亡;Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 及ｒｅａｌ ｔｉｍｅ－ ＰＣＲ检测Ｎｒｆ２、醌氧化还原酶１（ＮＱＯ１）,血红素加氧酶（ＨＯ－１）的表达;检测足细胞丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）及过氧化氢酶（ＣＡＴ）。【结果】 高糖组足细胞凋亡率、活性氧及细胞ＭＤＡ高于对照组（Ｐ ＜ ０．０５）,而该组足细胞ＳＯＤ、ＧＳＨ及ＣＡＴ低于对照组（Ｐ ＜ ０．０５）;高糖＋ＮＡＣ组的足细胞凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）;高糖＋ｔＢＨＱ组足细胞的总Ｎｒｆ２及核Ｎｒｆ２、 ＨＯ－１、ＮＱＯ１的表达高于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）,细胞内ＳＯＤ、ＧＳＨ及ＣＡＴ高于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）,高糖＋ｔＢＨＱ组足细胞的凋亡率、活性氧及细胞内丙二醛低于高糖组（Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 激活 Ｎｒｆ２通路降低高糖诱导足细胞的氧化应激,减轻足细胞凋亡。