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1.
目的 探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对大鼠肾小球内皮细胞(r GEn C)通透性的影响及线粒体功能障碍在其中的作用。方法 采用原代培养的r GEn C,予AGEs 80 mg/L作用24 h,采用跨内皮细胞电阻抗和异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白滤过率观察通透性的变化,Mito SOX试剂盒检测细胞内活性氧,JC-1荧光标记法检测线粒体膜电位(△Ψm),荧光素酶检测系统测定三磷酸腺苷(ATP)的生成,蛋白免疫印迹法检测NF-E2相关因子2(Nrf2)的表达。结果 AGEs可引起r GEn C通透性升高,活性氧产生增加,采用叔丁基对苯二酚(t BHQ)(20μmol/L)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)(10 mmol/L)和抗AGE受体抗体(100 mg/L)预处理后,上述AGEs作用被抑制。AGEs可引起r GEn C△Ψm下降,ATP和Nrf2减少,而anti-RAGE抗体可抑制△Ψm下降和ATP减少,t BHQ则能抑制△Ψm下降和Nrf2减少。结论 AGEs可导致r GEn C线粒体功能障碍,引起活性氧产生增加,从而导致r GEn C间通透性增加。  相似文献   
2.
目的 观察晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)对足细胞内肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)的影响及作用机制.方法 不同浓度的AGEs干预小鼠足细胞24h,分别检测肾素(renin)、血管紧张素原(renin-angiotensin system,AGT)、血管紧张素Ⅱ1型、2型受体(AT1R、AT2R)的表达,血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)的活性和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)的浓度,观察蛋白激酶B(Akt)的磷酸化,然后分别加入磷酸肌醇3激酶抑制剂LY294002、Iosartan、captopril和chymastatin,观察足细胞粘附性的变化.结果 与对照组相比,AGEs(80 μg/mL)明显上调AGT和AT1R的表达[(183.0±19.0)% vs 100%,(179.0±17.0)% vs100%,P<0.05],裂解液中ACE活性明显增加[(142.8 ±10.3)U/μgvs (85.0 ±9.2)U/μg,P<0.05],细胞上清中AngⅡ的浓度明显增加[(11.2±0.8) pg/mL vs(7.0±0.7)pg/mL,P<0.05];Akt的磷酸化上调100% (P <0.05),而LY294002可减轻AGEs介导的足细胞内RAS的激活;与AGEs组相比,LY294002可改善AGEs介导的足细胞粘附性的下降[(82±13)% vs (40±12)%;(78±14)%vs(42±13)%,P<0.05].结论 AGEs可能通过磷酸肌醇3激酶途径激活足细胞内的RAS,降低足细胞粘附性.  相似文献   
3.
4.
目的 观察Iga肾病(IgAN)患者与正常人的血清热聚合IgA1(algA1)对系膜细胞(MC)增殖的影响.方法 收集原发性IgAN患者及健康人的血清标本,利用Jacalin-agarose亲和层析联合Sephacryl S-200 HR分子筛层析法分离获得血清单体IgA1(mlgA1),将mlgA1热聚合为algA1.利用患者及正常人的algA1分别刺激小鼠MSC-1097系膜细胞株,利用MTT法检测algA1对系膜细胞增殖的影响.结果 algA1刺激48h组的吸光度是24h组的1.59倍(P=0.000).不同浓度algA1刺激组问MTT吸光度的差异有统计学意义(P=0.000),相比于阴性对照组(SFM).0.25 mg/mL组、0.5 mg/mL组、1 mg/mL组的吸光度分别为SFM的1.67、1.74、1.77倍(P=0.000);2 mg/mL组的吸光度是SFM的1.15倍(P=0.086).在刺激24h时患者0.25 mg.mL组的algA1就可促进系膜细胞增殖了,其吸光度是SFM的1.34倍(P<0.05),而正常对照组则耍在浓度达到1mg/mL时才引起系膜细胞增殖,其吸光度为SFM的1.33倍(P<0.05).结论 研究结果提示患者及正常人的algA1均可促进系膜细胞增殖,这种增殖表现为时间依赖性及一定的剂量依赖性.在高浓度时algA1促系膜细胞增殖的作用消失了;患者的algA1可能更易与系膜细胞结合,刺激相同时间时患者低浓度algA1既可引起MC增殖.  相似文献   
5.
目的 了解慢性肾脏病(CKD)患者钙磷代谢紊乱的基础状况.方法 对中山大学附属第三医院肾内科门诊就诊的慢性肾脏病患者血钙、血磷、血肌酐和尿常规水平进行为期9个月的横断面调查.结果 共有697例CKD病例入选.前4位慢性肾脏病的病因分别为原发性肾小球疾病(61.1%)、高血压肾病(7.6%)、糖尿病肾病(5.7%)和狼疮肾炎(5.7%).随着慢性肾脏病分期的进展,CKD4期以后,血清磷水平逐期上升(P=0.005和0.000),血清钙磷乘积水平逐期上升(P=0.013和0.000),血清钙磷乘积>55的发生率逐期上升(P=0.000和0.001).CKD5期患者血清钙水平降低(P=0.000).多元回归分析结果显示,血钙磷乘积水平和肾小球滤过率呈显著性负相关(P=0.007),血钙磷乘积水平和舒张压水平呈显著性正相关(P=0.030).结论 CKD4期以后钙磷代谢紊乱明显增加.  相似文献   
6.
【摘要】 目的 探讨晚期糖基化终产物(AGE)对大鼠肾小球内皮细胞(rGEnC)紧密连接的影响及激活细胞内肾素血管紧张素系统(RAS)在其中的作用。 方法 采用原代培养的rGEnC,予不同浓度AGE(20、40、80 mg/L)分别作用6 h、12 h和24 h,采用跨内皮细胞电阻抗和异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白滤过率观察通透性的变化;Western印迹检测晚期糖基化终产物受体(RAGE)、紧密连接蛋白[occludin、claudin-5、连接黏附分子A(JAM-A)和闭合小环蛋白1(ZO-1)]和细胞RAS组分[血管紧张素原、肾素和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1)]蛋白表达量的变化;免疫荧光技术显示紧密连接的完整性;紫外光法和酶免疫分析技术测定细胞内外血管紧张素转化酶(ACE)活性及AngⅡ水平。 结果 AGE可引起内皮细胞通透性、RAGE表达量、ACE活性、AngⅡ浓度和AT1表达量的升高,occludin、claudin-5和JAM-A表达量的下降。加入抗RAGE抗体(100 mg/L)预处理后,上述AGE作用被阻断。AGE可引起上述紧密连接蛋白在细胞连接处的中断。予卡托普利(1 mmol/L)或缬沙坦(10 μmol/L)预处理可部分阻断AGE上述效应。 结论 AGE可通过上调RAGE表达,激活细胞内肾素血管紧张素系统,破坏肾小球内皮细胞紧密连接,导致其通透性的升高。  相似文献   
7.
目的: 探讨IgA肾病血清IgA1与系膜细胞共培养上清对足细胞分泌TNF-α的影响及机制。方法:Jacalin 亲和层析柱和Sephacryl S-200 分子筛用来纯化蛋白,单体IgA1(mIgA1)热聚合为聚合体IgA1(aIgA1), 同步化的系膜细胞与患者和健康对照来源的aIgA1共培养,收集上清,分别与同步化的足细胞作用;ELISA检测足细胞上清TNF-α水平,real time PCR 检测凋亡相关基因Ang、ACE mRNA表达情况。结果:IgAN患者来源的aIgA1与系膜细胞共培养得到上清可刺激足细胞分泌TNF-α,其水平显著高于对照组[(12.47±1.45) ng/L vs (2.33±0.65) ng/L,P<0.05]。与对照和健康上清组相比,该上清可上调足细胞Ang和ACE mRNA显著升高(P<0.05)。依那普利拉(10-5 mol/L)可使该上清作用后的足细胞分泌的TNF-α显著下降至(7.52±1.12) ng/L (P<0.05);而缬沙坦(10-5 mol/L)则使之下降至(6.64±0.68) ng/L (P<0.05);而依那普利拉(0.5×10-5 mol/L)和缬沙坦(0.5×10-5 mol/L)联合治疗可使足细胞TNF-α下降至(2.72±0.55) ng/L,与对照无显著差异(P>0.05)。结论:IgA肾病患者血清IgA1与系膜细胞共培养上清可通过激活肾素-血管紧张素系统而刺激足细胞TNF-α分泌,参与IgAN的进展。  相似文献   
8.
目的 观察晚期糖基化终产物(AGEs)对血管内皮细胞血管生成样蛋白-4(Angptl-4)的影响,为心血管疾病的防治提供依据.方法 不同浓度(0、20、40、80、160 μg/ml)的AGEs与内皮细胞共培养24 h,分别以实时荧光定量聚合酶链反应和免疫印迹法检测Angptl-4 mRNA和蛋白的表达,通过检测异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖漏出率来检测内皮细胞的通透性.结果 与空白对照组比较,AGEs(80 μg/ml)可明显上调Angptl-4 mRNA(分别为100%和260%± 18%)和蛋白的表达(分别为100%和250%±32%),增加内皮细胞通透性(分别为0.15±0.08和0.46±0.09),差异均有统计学意义(P<0.05).结论 AGEs可能通过上调Angptl-4的表达增加内皮细胞的通透性.  相似文献   
9.
慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)被称为"沉默的杀手",在过去的10年间,已成为继心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病之后又一种严重威胁人类健康的疾病,是一个不容忽视的全球性公共卫生问题。在美国,高达13.1%(约2630万)的人患有CKD。我国香港地区2003年的调查结果显示,20岁以上的居民血尿、蛋白尿和尿检异常的比例分别为3.2%、13.8%和17.4%。根据最近公布的一项数据表明,我国目前CKD的患病率为10.8%(95%CI10.2%~11.3%),  相似文献   
10.
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