受体介导内吞和自噬同凋亡的关系

目的 观察刀豆素A(ConA)与小鼠腹腔巨噬细胞表面ConA受体结合、内吞、转运及巨噬细胞自噬、凋亡的形态学变化，以探讨受体介导内吞与自噬体形成和细胞凋亡之间的关系。方法 用辣根过氧化物酶(HRP)标记ConA(ConA-HRP)与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育，不同时间取出部分巨噬细胞，制备电镜标本，观察。结果透射电镜观察表明：ConA的内吞属于受体介导内吞；形成的内吞体有泡状、管状及双层膜的线状等形式；双层膜的线状结构包裹部分胞质和细胞器，形成自噬体；自噬体与溶酶体融合，而后巨噬细胞凋亡。结论受体介导内吞和自噬同凋亡之间存在一定的关系。     

烟碱对脑单胺类受体功能及基因表达的调节作用

目的研究烟碱对多巴胺受体、肾上腺素受体、5-羟色胺受体功能及基因表达的影响.方法 (1)昆明种小鼠给予生理盐水或烟碱(2mg/kg, i.p., 3/日, 10天).第11日分别腹腔注射烟碱(2mg/kg), 阿扑吗啡(3mg/kg),可乐定(1mg/kg), 8-OH-DPAT(1mg/kg),记录给药前、后自主活动各15min;(2)SD大鼠注射生理盐水或烟碱(1.2mg/kg, 2/日,SC,14天),第15天取脑作基因芯片,分析单胺类受体mRNA表达的改变.结果反复给予烟碱可诱导小鼠对烟碱降低自主活动的作用产生耐受,在对烟碱产生耐受的小鼠上,多巴胺受体激动剂阿扑吗啡增加自主活动的作用增强; α2-肾上腺素受体和5-HT1A受体激动剂可乐定和8-OH-DPAT抑制自发活动的作用减弱.在大鼠上, 反复给予烟碱可增加脑多巴胺D1 受体mRNA表达,降低多巴胺D3受体mRNA表达,不影响α2-肾上腺素受体、5-HT1A受体mRNA的表达.结论反复给予烟碱诱导烟碱耐受,脑N受体功能失敏时, 单胺类受体及其亚型功能或/和受体mRNA表达发生变化.     

慢性低剂量梭曼染毒对大鼠学习记忆及脑组织胆碱酯酶活力的影响

目的研究慢性低剂量梭曼(soman)染毒对大鼠学习记忆及脑组织胆碱酯酶(AChE)活力的影响.方法以皮下注射梭曼(2～40μg·kg-1,s.c,sig×14d)为染毒模型,采用Morris水迷宫试验进行行为检测,比色法测海马和前额叶皮层胆碱酯酶活力.结果 Morris水迷宫试验中,10μg/kg组和40μg/kg梭曼给药组大鼠逃避潜伏期明显延长,撤除平台后跨越原平台位置次数(7.2±1.48,6.0±0.00)减少,在原平台象限游泳时间百分率(47.82%,45.83%)明显下降;梭曼给药组大鼠海马和前额叶皮层胆碱酯酶活力均明显低于生理盐水对照组,且呈剂量依赖性.结论慢性低剂量梭曼染毒致学习记忆障碍,可能与乙酰胆碱过度堆积引起中枢毒蕈碱样胆碱能受体(M受体)下调有关.     

自身免疫性白内障的晶状体代谢与生理改变研究

目的 :探讨自身免疫性白内障 (AIC)的病理生理学机制。　方法 :采用酶组织化学方法以及晶状体生理功能检查 ,观察AIC模型动物晶状体生理功能与组织内主要酶活性的变化。　结果 :晶状体组织内Na K ATP酶活性降低与晶状体调节力下降、裂隙灯下显微镜混浊改变之间存在着相关性。　结论 :自身免疫性晶状体损伤 ,进而造成晶状体组织内相关酶代谢异常是AIC的病理基础     

带状疱疹患者血清IgE的测定与意义探讨

目的了解IgE在带状疱疹的发生、发展中的作用.方法采用ELISA双抗体夹心法,分别检测40例带状疱疹患者在患病期及临床治愈后血清IgE水平变化,并以20例正常人为对照组.结果患病组血清IgE水平高于对照组,P<0.01,治愈后血清IgE水平与对照组无统计学差异,血清IgE随着带状疱疹病情的好转而呈下降趋势.结论 IgE在带状疱疹的发生、发展中具有一定的临床意义,值得进一步研究.     

经皮冠脉介入治疗病人围手术期应用β-受体阻滞剂的作用

目的评价经皮冠脉介入治疗(PCI)前应用β-受体阻滞剂对病人的保护作用。方法对青岛大学医学院附属医院1997~2004年间行PCI治疗病人210例,随机分为β-受体阻滞剂组(105例)及对照组(105例)。分别于术前、术后6~8h及16~24h抽取血标本检测心肌肌酸激酶(CK-MB)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)值,并随访病人院内、院外1年心脏事件的发生率。结果(1)两组间CK-MB、E、NE值均无统计学意义。同组间,不同时间内CK-MB、E、NE值差异亦无显著性。(2)服β-受体阻滞剂组院内病死率较未服者低(2.1%比4.1%),1年随访β-受体阻滞剂组院内病死率亦较未服者低(5.5%比7.1%)。结论PCI治疗前应用β-受体阻滞剂对病人有保护作用。     

肿瘤细胞的铁代谢及其调节

铁是细胞生长增殖及机能活动所必需的微量元素之一。它在细胞的DNA合成、电子传递、氧运送等过程中起着极其重要的作用。如果没有铁，细胞便不能从G1期进入到细胞周期的S阶段。此外，在细胞周期(例如：p53，GADD45和WAF1／p21)中，铁对大量分子的表达和调控上似乎也起着重要作用。     

凝血酶大鼠脑内注射对核因子-κB活性及细胞间黏附因子-1 mRNA表达的影响

目的 探讨凝血酶（TM）大鼠脑内注射对核因子-κB（NF-κB）活性、细胞间黏附分子．1（ICAM．1）tuRNA表达及白细胞浸润的影响及其可能机制。方法TM、TM＋组织蛋白酶G（CATG）、TM＋N．乙酰半胱氨酸fNAC）脑内立体定向注射制作动物模型，在不同的时间点处死动物，应用EMSA技术检测NF-κB活性，RT—PCR技术检测ICAM-1 mRNA表达．测定髓过氧化物酶（MPO）活性来检测中性粒白细胞的浸润情况。结果TM脑内注射后6hNF-κB活性开始增加（P〈0．05），24h时达高峰（P〈0．01），然后逐渐下降。TM脑内注射后24h ICAM-1 mRNA表达开始增加（P〈0．01），48h达高峰（P〈0．01），然后逐渐下降。MPO活性动态变化趋势与ICAM-1 mRNA相似。TM＋NAC组ICAM-1 mRNA及MPO活性与对照组比较差异均无显著性（P〉0．05）。TM＋CATG组NF-κB活性、ICAM-1 mRNA表达及MPO活性与对照组比较差异均无显著性（P〉0．05）。结论 TM通过蛋白酶激活受体-1（PAR-1）激活NF-κB，诱导ICAM-1 mRNA表达．促进白细胞浸润。     

A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

D期前列腺癌药物去势的疗效与AR、PSA的相关性研究

目的:探讨D期前列腺癌(PCa)患者药物去势治疗的效果与雄激素受体(AR)、前列腺特异性抗原(PSA)的相关性。方法:对33例D期PCa患者给予LHRH类似物 抗雄激素药物进行药物去势治疗,结合免疫组化进行统计分析。结果:AR、PSA与癌组织分化程度的之间的差异有统计学意义。Gleason不同评分组间血清PSA水平之间差异有统计学意义(P<0.05),PCa Gleason评分值与原位PSA免疫标记表达呈明显的负相关性(P<0.01);原位PSA免疫标记表达与血清PSA不具有相关性。结论:PCa组织中AR、PSA表达与D期PCa患者行药物去势疗法疗效有密切关系;血清PSA变化是监测PCa肿瘤复发与疗效的可靠瘤标。