降钙素基因相关肽在预处理心肌保护中机制的研究进展

近年来发现一种新的神经肽即降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)具有强心、舒张血管的作用,是目前研究的热点.CGRP能防止心肌缺血/再灌注损伤,在预处理即时和延时心肌保护中的研究很多,但是其具体的机制仍不清楚,仍需要进一步的研究.现主要对CGRP在预处理心肌保护中的作用作一综述.     

基因芯片快速HLA-DR52组分型

目的 用基因芯片对HLA-DR52组快速分型。方法 根据中国汉族人群常见的HLA-DRB位点及其基因多态性的独特序列，设计特异性的寡核苷酸分型探针，制成寡核苷酸芯片。通过组间特异引物扩增基因组DNA，扩增中用荧光标记，扩增标记后的产物与芯片的探针杂交，通过杂交产生的荧光信号确定样品的基因亚型。83份样本分别用基因分型芯片和序列特异性引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)对HLA-DR52组分型。结果PCR-SSP分型DR52组57个位点中，经芯片分型有2个无DR52组位点，3个PCR-SSP分型为DR52组纯合子，芯片为DR52组杂合子，1个PCR-SSP分型为非DR52组纯合子，芯片分型为含有1个DR52组位点的杂合子。结论 基因芯片能对HLA-DR52组快速、准确的分型，比PCR-SSP能更多的检出DR52组位点，特别是能将纯合子进一步分型，适合临床应用。     

腺病毒介导的P16／CDKN2基因对TJ899细胞系活性的影响

（1）目的 研究5型腺病毒载体（Ad5)携带P16基因对恶性脑胶质瘤细胞系TJ899生长状态的影响。（2）方法 免疫组化（SP法）测定P16蛋白表达，MTT（methly thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定恶性脑胶质瘤细胞系生长状态，克隆形成实验。（3）结果 重组体腺病毒能介导P16外源基因在恶性脑胶质瘤细胞系TJ899细胞中阳性表达，6d时肿瘤细胞生长抑制率为93%，并且能显地抑制肿瘤细胞的克隆形成能力。（4）结论 腺病毒介导P16基因能在肿瘤细胞中表达。并能明显抑制肿瘤细胞生长的状态。     

人白细胞介素12双亚基共表达真核载体的构建

目的 :为满足基因治疗的需要构建人白细胞介素 12 (hIL 12 )双亚基共表达质粒。方法 :先从人胚肾组织的逆转录产物中用PCR方法扩增出它的两个亚基P4 0 和P3 5的cDNA全长 ,分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+/ )中构建单亚基质粒———P(+) /P4 0 和P( ) /P3 5,然后再将二者串联克隆入真核表达载体 pcDNA3.1(+)中得到P(+) /IL 12质粒。脂质体转染HepG2后 2 4,48hELISA检测细胞培养上清内hIL 12蛋白质表达。结果 :P(+) /IL 12质粒经酶切和测序证明两亚基连接方向正确 ,序列无突变 ;ELISA检测细胞上清结果证实可表达hIL 12蛋白质。结论 :成功构建P4 0 和P3 5双亚基真核共表达质粒———P(+) /IL 12 ,为模拟hIL 12生理表达方式 ,简化hIL 12基因治疗操作奠定了基础。     

一氧化氮诱导肝癌细胞凋亡过程bcl-2和bax mRNA表达水平的变化

目的 探讨在一氧化氮(NO)诱导肝癌细胞凋亡过程bcl-2和bax mRNA表达水平的动态变化。方法 用NO供体硝普钠(SNP)诱导SMMC-7721和HepG2肝癌细胞株凋亡，RT-PCR的方法检测bcl-2、ba xmRNA表达水平，并采用凝胶分析系统进行半定量分析。结果 1．0mmol/L可降低SMMC-7721和HepG2细胞bcL2、bax mRNA的表达水平，提高bax/bc1-2 mRNA的比值并呈时间依赖性。HepG2细胞bcl-2和bax mRNA降低的幅度较SMMC-7721细胞小(P＜0．05)，开始变化的时间也较SMMC-7721细胞迟。结论 NO诱导肝癌细胞株的凋亡，可能与其bcl-2、bax mRNA表达水平变化导致bax/bc1-2 mRNA比值上升有关。     

凋亡抑制因子一Survivin最新研究进展

Survivin是IAP(凋亡抑制蛋白 )家族的最新成员 ,是 1997年耶鲁大学的AltieriDC[1] 等利用效应细胞蛋白酶受体 - 1(effectorcellproteasereceptor 1,EPR 1)cDNA在人类基因组库中筛选分离出来的。由于对凋亡抑制基因的深入研究已成为分子肿瘤学的一个热点 ,且细胞凋亡抑制与恶性肿瘤的发生发展以及放化疗的不敏感性有着密切关系 ,故近几年来 ,对Survivin的结构、功能及与恶性肿瘤之间的关系研究取得了一些进展。大量研究表明 :Sur vivin在正常终末分化组织中不表达或低表达 ,而在人类各种肿瘤组织中广泛表达。1　Survivin的结构与功能S…     

地塞米松对内毒素作用下人脐静脉内皮细胞表达组织因子、凝血酶调节蛋白和蛋白S的影响

目的观察地塞米松(DEX)对内毒素(LPS)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)后表达组织因子(TF)、凝血酶调节蛋白(TM)和蛋白S(PS)的影响.方法24孔板培养的第1～5代HUVEC,在含不同浓度LPS和DEX的无血清培养基中培养一定时间后裂解细胞,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定裂解液中的TF、TM和PS含量.结果在LPS刺激下,HUVEC表达TF的量呈剂量依赖性升高,在LPS0.1μg/ml下TF的表达量为对照组的4倍(P＜0.01),同时加入0.5 μg/ml和1.0 μg/ml DEX则可使TF的表达量由128.3±25.7 pg/105细胞分别降至94.9±19.4 pg/105细胞和98.8±7.8 pg/105细胞(P＜0.05);LPS(0.01～10μg/ml)可抑制HUVEC表达TM,在LPS 10 μg/ml下,TM表达量降至对照组的60%(P＜0.05).DEX可拮抗LPS抑制HUVEC表达TM的效应,0.1 μg/ml、0.5 μg/ml和1.0 μg/ml DEX可使LPS(10 μg/ml)作用下TM的表达量由0.282±0.014 ng/105细胞分别增至0.409±0.009、0.462±0.017和0.362±0.019 ng/105细胞(P＜0.05);LPS(0～10 μg/ml)可抑制HUVEC表达PS,在LPS浓度1.0 μg/ml及10 μg/ml时,PS的表达量分别为对照组的43%和38%(P＜0.01).DEX则拮抗LPS抑制HUVEC表达PS的效应,0.5 μg/ml DEX可使LPS刺激下PS的表达量由13.1±4.8%/2×105细胞增至48.5±10.2%/2×105细胞(P＜0.01).结论LPS促进HUVEC表达TF,抑制HUVEC表达TM和PS.DEX能部分拮抗上述作用,提示DEX可能纠正内毒素血症时的高凝状态.     

胆固醇酯转运蛋白基因多态性在多囊卵巢综合征中的初步研究

目的:探讨胆固醇酯转运蛋白(CETP)在PCOS患者中的基因多态性和血脂、性激素的关系,以进一步认识PCOS脂代谢的特点。方法:应用PCR酶切方法检测108例PCOS患者及60例对照组的CETPTaqIB位点基因多态性。结果:CETPTaqIB基因频率及基因型分布在两组间分布差异无显著性。结论:CETPTaqIB基因多态性影响PCOS患者的HDLC水平,该基因在PCOS患者分布与正常人群分布无差异性。     

“教人吃饭”也能赚钱

两年前，于清大学毕业后却找不到工作，很多用人单位都以不需要为由将她拒之门外，原因便是她所学的专业——人类营养学。那时，人们的意识里对营养学的认识还非常淡薄，很多人认为吃饭还需要人教吗?于清整日愁眉不展，甚至后悔当初选错了专业。