抗人T细胞单克隆抗体与商陆毒蛋白结合物的制备及其抗白血病细胞活性

将美洲商陆抗病毒蛋白通过二硫键与抗人T细胞单克隆抗体Wu71偶联制备免疫毒素。结合物经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫双扩散和间接荧光检测,表明该结合物对人T淋巴细胞白血病CEM细胞显示很强的杀伤作用,在10~(-9)mol/L浓度下可杀灭76.4%的靶细胞,而对抗原阴性的SP_2/O细胞杀灭作用很弱。~(14)C-亮氨酸掺入蛋白质合成抑制试验显示结合物在10~(-9)mol/L时可抑制72.4%的蛋白质合成。这一免疫毒素有可能用于白血病自体骨髓移植时白血病细胞的体外清除。     

商陆多糖研究进展

对商陆多糖ＰＥＰ－Ⅰ,Ⅱ的提取分离、基本组成、结构特征和药理研究的进展,以及多聚酶ａ、ＮＫ细胞、骨髓细胞、脾细胞和ＬＡＫ细胞的活性的影响进行了综述。     

商陆皂苷甲致肝毒性的研究

目的通过体外、体内实验相结合的方法考察商陆皂苷甲所致的肝毒性。方法 MTT法测肝细胞(L-02细胞)活力;以不同质量浓度的商陆皂苷甲与肝细胞共培养后,测细胞培养上清中的AST(谷草转氨酶)、ALP(碱性磷酸酶)和LDH(乳酸脱氢酶)水平,并在光镜下对细胞形态进行观察;Hoechst-PI双标染色观察细胞的凋亡和坏死情况;取KM种小鼠分为正常组和给药组,给药组的小鼠每天尾静脉注射10 mg/kg商陆皂苷甲,连续给药7 d,考察小鼠血清肝功能指标和肝组织的病理学变化。结果 MTT的结果显示,商陆皂苷甲能显著抑制肝细胞活力,其IC50为360.18μg/mL;400μg/mL的商陆皂苷甲能升高细胞培养上清中的AST、ALP和LDH(P<0.01)并使肝细胞出现变圆、减少和死亡的现象;300和350μg/mL的商陆皂苷甲能使肝细胞发生凋亡和坏死;体内实验表明,小鼠血清中的AST和ALT(谷丙转氨酶)水平均明显升高(P<0.01),小鼠肝脏多出现肝细胞多发灶性坏死及肝细胞再生现象。结论大剂量的商陆皂苷甲对肝脏具有一定的毒性作用。     

商陆对阿霉素肾病大鼠肾组织NO表达的影响

目的:研究商陆对阿霉素肾病大鼠肾组织一氧化氮(NO)的影响。方法:经大鼠尾静脉分次注射阿霉素合计7.5mg/kg制备肾病模型,分别灌以商陆粗提物4g/kg.d和1g/kg.d或强的松16mg/kg.d,连续2周,观察各组动物肾组织NO的改变。结果:商陆粗提物对阿霉素肾病模型大鼠具有减少尿蛋白、降低肾组织内NO浓度作用。结论:商陆对阿霉素肾病具有治疗作用,其治疗作用可能与降低肾组织内NO浓度有关。     

商陆皂甙甲对阿霉素致肾小球硬化大鼠TGF-β_1表达的影响

目的观察商陆皂甙甲对阿霉素致肾小球硬化大鼠TGF-β1表达的影响及其可能机制。方法采用单侧肾切除并阿霉素尾静脉注射的方法建立大鼠肾小球硬化模型。将48只SD大鼠随机分为假手术组(N组)、模型组(M组)、商陆皂甙甲组(S组)、依那普利组(Y组),分别给予生理盐水、商陆皂甙甲、依那普利治疗,共100 d。观察商陆皂甙甲对肾小球硬化大鼠肾小球病理改变及24 h尿蛋白、肾功能的影响。用免疫组化方法测定肾小球TGF-β1的表达。结果术后第7,13周S组大鼠24 h尿蛋白排泄量、处死前血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平、肾小球硬化指数显著低于M组(P均<0.01),肾小球病理损害轻于M组,血清白蛋白较M组显著增高(P<0.01)。结论商陆皂甙甲可下调肾小球硬化大鼠肾小球TGF-β1的表达,减少细胞外基质的沉积,进而保护肾功能,延缓肾小球硬化的发生、发展。     

商陆皂苷甲对BXSB狼疮性肾炎小鼠的治疗作用

[摘要]目的 观察商陆皂苷甲（EsA）在LN模型BXSB小鼠体内的作用,来探讨其对LN的治疗价值。方法 12周龄雄性BXSB小鼠24只,随机分成模型对照组、EsA低剂量治疗组和EsA高剂量治疗组。腹腔注射4周,每日一次至治疗终点。留取标本,行尿蛋白、血清肌酐、白蛋白测定及肾脏病理检查。结果 1.模型小鼠尿蛋白升高,治疗组经治疗后较对照组下降,高剂量治疗组进一步下降。2.经药物治疗后,BXSB小鼠肾组织病理损伤明显减轻。3.各组血清肌酐及白蛋白均不高,无统计学差异。结论 1.EsA具有降低BXSB狼疮性肾炎小鼠的尿蛋白的作用。2.EsA可以改善BXSB狼疮性肾炎小鼠的肾脏病理。     

醋商陆饮片的炮制工艺研究

目的 确定醋商陆饮片的最佳炮制工艺。方法 选择炒制温度、炒制时间和加醋量3个因素,采用L₉（3⁴）正交试验设计,以RP-HPLC法测定炮制品中活性成分商陆皂苷甲的量,以小鼠胃肠道试验评价刺激性毒性,通过多指标综合评分法优选醋商陆的炮制工艺。结果 优选出的醋商陆炮制工艺为：加入30%醋拌匀,闷润至醋被吸尽,于120 ℃炒制30 min。结论 优选出的醋商陆炮制工艺稳定可行,重现性好。     

商陆药理作用及毒性研究进展

查阅了近20年有关商陆药理效应,毒性作用及不良反应的报道。药理研究发现具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、增强免疫等多重疗效,临床主要用于治疗血小板减少性紫癜、急慢性肾炎、肾水肿、银屑病等病症。其在抗炎和免疫方面的作用尤为突出,多糖和皂苷类成分能够广泛调节多种细胞因子。目前已有关于商陆急性中毒的临床报道,表现为不同程度的交感神经兴奋和胃肠道刺激症状,甚至可能引起死亡。毒性表现涉及消化、中枢神经、心血管、呼吸等多系统;动物实验也证实其毒性,甚至有潜在突变性。为此,在商陆的研究中需要特别关注毒性与减毒的研究,以达到临床使用安全有效的目的。     

商陆的临床应用

商陆性寒,味苦辛,有毒,本品泻下逐水,消肿散结、祛痰止咳,对腹胀水肿、二便不利、痰饮咳喘及肿毒恶疮等症有确切疗效。药理研究表明,商陆有利尿、祛痰、增强免疫力、降低转氨酶、抗炎、抗肿瘤及抗病毒等作功效,用于慢性肾炎及肝硬化腹水、心包积液、渗出性胸膜炎、非感染性咽喉水肿、支气管炎、功能性子宫出血、乳腺增生、血小板减少性紫癜、银屑病及恶性肿瘤等,     

Effects of aqueous extracts of Aconitum carmichaeli,Rhizoma bolbostemmatis,Phytolacca acinosa,Panax notoginseng and Gekko swinhonis Gūenther on Bel-7402 cells

AIM: To investigate the anticancer activity of a chinese medical mixture, WRCP (warming and relieving Cold Phlegm), on hepatocarcinoma Bel-7402 cells. METHODS: Fingerprints of WRCP, which were composed of aqueous extracts of Aconitum carmichaeli, Rhizoma bolbostemmatis, Phytolacca acinosa, Panax notoginseng and Gekko swinhonis Gūenther, and aconitine, which could be isolated from Aconitum carmichaeli and have the potential toxicity, were identified by high pressure liquid chromatography. Bel-7402 cells were grown in the presence of WRCP, As2O3 or all-trans-retinoic acid (ATRA). Cell proliferation and viability were determined by trypan blue stain. Apoptosis and cell cycle of Bel-7402 cells were detected by flow cytometry. Morphologic and ultrastructural variations were determined under optic and electronic microscopy. The secretion of alpha-fetoprotein and albumin was detected by radioimmunoassay. RESULTS: The average quality of aconitine is 1.15 ± 0.10 μg per 7.5 g extracts. WRCP could suppress the proliferation and viability of Bel-7402 cells. The percentage of apoptosis cells and S phase cells increased on WRCP-treated cells. Treated with WRCP, Bel-7402 cells showed ultrastructural features of differentiation. The alpha-fetoprotein secretion decreased while the albumin secretion increased (P < 0.001, P < 0.001, respectively) markedly in WRCP-treated cells.CONCLUSION: WRCP can affect the proliferation, differentiation and apoptosis of Bel-7402 cells. It can arrest cells in S phase and has strong cytotoxicity to Bel-7402 cells.