RP-HPLC法同时测定枫蓼肠胃康胶囊中4种黄酮苷成分的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定枫蓼肠胃康胶囊中芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷含量的方法。方法:采用Waters X bridge C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相系统:乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min~(-1);柱温:25℃;检测波长:350 nm。结果:芦丁、金丝桃苷、槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷的质量浓度分别在12.42~310.50、5.95~148.75、6.85~171.25、7.88~197.00μg·mL与色谱峰面积呈良好的线性关系,加样回收率分别为98.6%、104.2%、104.5%、101.0%(n=6),RSD分别为1.3%、1.1%、1.3%、1.6%。结论:本方法符合方法学验证要求,简便、快捷,可用于枫蓼肠胃康胶囊中4种黄酮苷成分的同时测定。     

HPLC指纹图谱和多成分定量结合化学模式识别法评价不同产地胡桃楸叶质量

目的 基于HPLC指纹图谱与多成分含量测定,结合化学模式识别法评价胡桃楸Juglans mandshurica叶质量,为其深入研究和开发提供依据。方法 采用HPLC法建立30批不同产地胡桃楸叶指纹图谱;通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）进行相似度评价;通过对照品比对指认了3种化学成分,并测定了样品中3种成分的含量;使用SPSS 25.0软件进行聚类分析、主成分分析和相关性分析。结果 30批胡桃楸叶指纹图谱共标定了12个共有峰,指认的3个共有峰为绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷,指纹图谱相似度范围是0.827～0.995,具有较好的一致性;样品中绿原酸、金丝桃苷和异槲皮苷3种化学成分的质量分数分别为0.258～5.607mg/g、0.113～3.974mg/g和0.439～6.537mg/g;聚类分析将样品分为3类,30批样品中28批样品聚为一类,铁岭鸡冠山乡（S3）、本溪东营坊乡（S6）的样品各自聚为一类;主成分分析用2个主成分进行综合评价,综合得分大于1的前6位分别为S3、S6、S12、S8、S24和S18;30批样品中3种成分的总含量与主成分综合得分存在明显相关性。结论 建...     

基于指纹图谱结合化学模式识别绿萼梅质量标志物的评价研究

目的 利用化学模式识别技术对绿萼梅药材指纹图谱数据进行分析,筛选特征性指标成分从而建立绿萼梅Q-Marker的定量分析策略,为绿萼梅质量评价提供科学依据。方法 采用超高液相色谱法建立3个产地绿萼梅的指纹图谱,运用相似度分析、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析等化学模式识别技术筛选出不同产地绿萼梅化学成分的特征成分作为绿萼梅Q-Marker,并定量分析。结果 30批绿萼梅UPLC指纹图谱标定8个共有峰,相似度在0.816～0.969;通过聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析较好的区分各产地绿萼梅,综合分析筛选绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷作为绿萼梅Q-Marker,质量分数分别在3.08%～4.71%、0.41%～0.71%、0.13%～0.25%、0.25%～0.38%。结论 通过指纹图谱结合化学模式识别技术的分析策略可快速有效的筛选绿萼梅Q-Marker,为绿萼梅质量评价提供参考。     

星点设计-效应面法优化pH值响应及线粒体靶向双功能金丝桃苷脂质体的处方及其体外评价

目的 优化线粒体靶向金丝桃苷脂质体（DLD/Hyp-Lip）制备的最佳处方,并研究研究其在胎牛血清中的稳定性及体外释放行为,考察其线粒体靶向性。方法 采用薄膜分散法制备DLD/Hyp-Lip,以包封率和载药量为考察指标进行单因素实验,考察磷脂总量与金丝桃苷（hyperoside,Hyp）用量比、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇（DSPE-PEG）与DLD用量比等条件对DLD/Hyp-Lip的影响,结合星点设计-效应面法优化DLD/Hyp-Lip处方。使用透射电子显微镜和粒径仪观察测定脂质体粒子外观、平均粒径和Zeta电位,采用血清稳定性实验和体外释药、线粒体靶向性对该载药系统进行评价。结果 DLD/Hyp-Lip最佳处方为磷脂总量和金丝桃苷用量比为12.50：1,磷脂总量与胆固醇用量比为6.00：1,DSPE-PEG与DLD用量比为3：5;测得金丝桃苷包封率为（95.57±0.56）%,载药量为（8.55±0.57）%。所制备的DLD/Hyp-Lip外观良好,平均粒径为（124.9±3.4）nm,Zeta电位为（-6.2±1.9）mV;在胎牛血清中性状稳定,在体外释放介质中24 h累积释放量达到40%。线粒体靶向实验表明DLD/Hyp-Lip可以促进药物聚集在线粒体部位。结论 采用此方法能够精准有效的优化DLD/Hyp-Lip的制备工艺,该方法操作简单方便,可以用于DLD/Hyp-Lip制备与处方的优化,制备的DLD/Hyp-Lip包封率高,粒径小,分布均匀,且具有良好的缓释作用,为DLD/Hyp-Lip的进一步体内研究奠定了基础。载金丝桃苷的DLD/Hyp-Lip具有良好的肝癌细胞线粒体靶向性,是一种潜在高效的肝癌细胞线粒体靶向给药系统。     

蒙药蜀葵花HPLC指纹图谱及rbcL序列分子鉴定研究

目的 建立蜀葵花HPLC指纹图谱及rbcL序列DNA条形码（barcoding）分子鉴定方法。方法 色谱柱为Welchrom Column C₁₈（300 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相、梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温35℃，检测波长365 nm，进样量10 μL；采用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012版A版）"进行相似度评价；同时以rbcL为引物，对11份蜀葵花进行PCR扩增并测定序列，运用DNDMAN和MEGA7.0及CodonCode Aligner17.0软件进行分析。结果 建立了11份蜀葵花的HPLC指纹图谱，得到21个共有峰，相似度均大于0.88，并标定了金丝桃苷（7号峰）、槲皮素（15号峰）、芹菜素（19号峰）、山柰素（20号峰）4个成分；rbcL序列扩增和测序成功率100%，测序到的长度500 bp，GC含量为44.10%~44.40%，种内遗传距离0~0.004 0，平均遗传距离0.001 4，变异位点数10个，相似度为99.00%。结论 建立的HPLC指纹图谱方法稳定可靠、rbcL序列DNA barcoding分子鉴定方法重复性好，可用于蜀葵花的质量控制。     

金丝桃苷通过NOS/NO系统调控血管内皮影响动脉粥样硬化进程的实验研究

目的 探讨金丝桃苷通过一氧化氮合酶（NOS）/一氧化氮（NO）系统调控血管内皮影响动脉粥样硬化进程。方法 采用高脂饲料喂养ApoE^-/-小鼠复制动脉粥样硬化模型。在造模的同时给予金丝桃苷（200 mg/kg）和辛伐他汀（阳性对照,5.2 mg/kg）进行干预,每天给药2次,连续12周,每周称小鼠体质量;全血项分析仪检测小鼠血清中总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量;ELISA法检测小鼠血清中丙二醛（MDA）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、NO和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的含量;HE染色法和油红O染色法观察小鼠胸主动脉病理学变化情况和脂质沉积状况;Western blotting检测小鼠胸主动脉中聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1（PARP1）、精氨酸酶Ⅱ（ARG2）、eNOS和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白的表达。结果 与模型组比较,金丝桃苷显著抑制小鼠体质量增长（P<0.05、0.01）;显著降低小鼠血清中LDL-C、MDA和IL-6的水平（P<0.05、0.01）,显著升高NO和eNOS的水平（P<0.05、0.01）;显著减小小鼠主动脉管腔内斑块面积（P<0.05、0.01）并改善脂质沉积状况;显著下调小鼠主动脉组织PARP1、ARG2、iNOS的表达,并上调eNOS的表达（P<0.01）。结论 金丝桃苷可以减缓动脉粥样硬化的病理进程,可能是通过降低LDL-C水平、影响NOS活性、调节NO的合成,改善血管内皮功能实现的。     

醉马草中黄酮类化学成分研究

目的研究禾本科芨芨草属植物醉马草Achnatheruminebrians中的化学成分。方法综合运用HP-20大孔树脂、ODS中压色谱、SephadexLH-20凝胶柱色谱以及制备型高效液相色谱等方法进行系统的分离纯化,根据化合物的理化性质及其波谱数据,并通过对比文献报道的波谱数据,鉴定化合物的化学结构。结果从醉马草乙醇提取物中分离得到15黄酮类化合物,分别鉴定为异红草素(1)、金丝桃苷(2)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(3′→O-3′′′)-槲皮素-3?-O-β-D-吡喃半乳糖苷(3)、3?-甲氧基槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、异鼠李素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(7)、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、8-甲氧基槲皮素-3-O-β-吡喃葡萄糖苷(10)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃半乳糖基-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11)、5,7,3?-三羟基-8,4?,5?-三甲氧基黄酮(12)、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷-6??-甲酯(13)、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷(14)和金圣草黄素(15)。结论所有化合物均为首次从醉马草中分离得到。     

HPLC法测定益心酮滴丸中金丝桃苷含量

目的 测定益心酮滴丸中金丝桃苷含量.方法 高效液相色谱法,色谱柱:Kromsil C18 (5 μm,250 mm×4.6 mm),流动相:0.5%磷酸(三乙胺调pH3.0)-乙腈-甲醇-四氢呋喃(76∶1∶1∶22),流速:1.0 ml·min-1,柱温35℃,检测波长359 nm.结果 金丝桃苷的线性范围为10.41～52.05 mg·L-1,平均加样回收率为99.65% .结论 本法简捷、快速可靠,可用于控制制剂质量.     

盘龙七化学成分研究(Ⅱ)

目的研究盘龙七Bergenia scopulosa的化学成分。方法采用多种色谱技术对其进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定化合物结构。结果从盘龙七甲醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为岩白菜素(1)、(+)-儿茶素(2)、熊果苷(3)、6-O-没食子酰基熊果苷(4)、(+)-儿茶素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、苯丙氨酸(6)、琥珀酸(7)、原儿茶酸(8)、没食子酸(9)、没食子酸甲酯(10)、槲皮素(11)、金丝桃苷(12)、芦丁(13)、阿福豆苷(14)、大黄酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15)、11-O-没食子酰岩白菜素(16)。结论化合物5～16为首次从该植物中分离得到。     

Pharmacokinetic Study on Hyperoside in Beagle’s Dogs

Objective To develop and validate a simple, rapid, sensitive, and reproducible HPLC method for determination of hyperoside in plasma of dogs and for the subsequent pharmacokinetic (PK) study. Methods An accurate and reproducible HPLC-UV method was developed and validated for the determination of hyperoside in plasma of dogs, using kaempferol as internal standard. The plasma samples of dogs following ig administration of hyperoside were analyzed for the detection of quercetin after enzymatic hydrolysis treatment with combined β-glucuronidase and sulphatase. The analytes were separated on a Diamonsil C 18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm). The mobile phase consisted of methanol-buffer solution (0.1 mol/L NH 4 Ac + 0.3 mmol/L EDTA-Na 2 )-acetic acid (60:40:1) and was delivered at a flow rate of 1 mL/min. The UV detector was set at 370 nm and the column temperature was maintained at 35 ℃. The sample injection volume was 20 μL. Data were collected and analyzed using the ANASTAR software. PK parameters were calculated with DAS software (2.0). Results Linear relationships were validated over the range of 0.01-1 μg/mL for hyperoside (r = 0.9997). The intra- and inter-day precision values for all samples were within 10.0%, and the accuracies of intra- and inter-day assays were within the range of 92.4%-102.4%. The validated method was successfully used to determine the hyperoside concentration in plasma of dogs for up to 12 h, after a single ig administration (25 mg/kg). The mean PK parameters for male and female dogs were as follows: C max (0.18 ± 0.05) and (0.16 ± 0.05) μg/mL, AUC 0-∞ (0.79 ± 0.34) and (0.86 ± 0.27) μg/(mL·h), t 1/2(ka) (0.89 ± 0.41) and (0.88 ± 0.28) h, respectively. Statistical analysis on the PK of hyperoside in male and female groups showed that sex had no significant impact on the PK of hyperoside (P > 0.05). Conclusion The method is able and sufficient to be used in drug PK studies of hyperoside.