绞股蓝愈伤组织的生长和总皂甙合成的化学调节

通过绞股蓝Gynostemma. pantaphyllum愈伤组织培养,系统观察不同前体的中间体和抑制剂类物质对愈伤组织生长和总皂甙积累的影响。结果表明,醋酸钠(25ppm)单独使用可提高其鲜重与干重生长速率,与氨硫脲协同可提高鲜重与干重生长速率及皂甙产率。香叶醇(0.01％)单独或与氨硫脲协同均可提高其皂甙产率。此外,绞股蓝愈伤组织生长曲线和总皂甙积累曲线显示,总皂甙积累峰期滞后于愈伤组织生长峰期4—8天。     

引种绞股蓝化学成分研究

将栽培于广东省花都市(花县)的日本优良品种绞股蓝皂甙类化学成分进行了初步研究,分离出三个主要成分,经光谱分析,分别鉴定为绞股蓝皂甙ⅩⅦ、ⅩⅤ和ⅩⅩⅩ。     

Haemolytic activities and adjuvant effect of Gynostemma pentaphyllum saponins on the immune responses to ovalbumin in mice

In this study, the haemolytic activities of Gynostemma pentaphyllum saponins (GPS) and its adjuvant potential on the immune responses of ICR mice against ovalbumin (OVA) were evaluated. GPS showed a slight haemolytic effect, with its haemolytic activity being 10.20% and 4.90% at concentrations of 500 and 250 microg/mL, respectively. ICR mice were immunized subcutaneously with OVA 100 microg alone or with OVA 100 microg dissolved in saline containing aluminium hydroxide gel (Alum, 200 microg), QuilA (10 and 20 microg) or GPS (50, 100 or 200 microg) on days 1 and 15. Two weeks later (day 28), concanavalin A (Con A)-, lipopolysaccharide (LPS)- and OVA-stimulated splenocyte proliferation and OVA-specific antibodies in serum were measured. GPS significantly enhanced the Con A-, LPS- and OVA-induced splenocyte proliferation in the OVA-immunized mice, especially at a dose of 100 microg (p < 0.05 or p < 0.001). OVA-specific IgG, IgG1 and IgG2b antibody levels in serum were also significantly enhanced by GPS compared with the OVA control group (p < 0.05, p < 0.01 or p < 0.001). In conclusion, the results suggest that GPS could be used safely as an adjuvant with low or no haemolytic effect.     

广西6种栽培绞股蓝中多糖的分析

目的:建立绞股蓝中多糖的测定方法,比较广西6种绞股蓝中多糖的含量。方法:采用苯酚-硫酸比色法,于490nm处测定含量。结果:该方法线性关系良好,平均加样回收率为98.7%,RSD=1.68%。绞股蓝中多糖的含量范围是0.96%～2.98%。结论:本法较准确,可作为绞股蓝中多糖的质量控制。广西产的几种绞股蓝中,扁果绞股蓝(Gynostemme campres-sum)中的多糖含量最高。     

绞股蓝复方抗氧化作用临床观察

观察了绞股蓝复方对老年气阴两虚证患者抗氧化指标的影响。结果表明,３１例气阴两虚证患者,经绞股蓝复方治疗后,红细胞超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）与过氧化氢酶（ＣＡＴ）、血谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）的活性明显提高,血清过氧化脂质（ＬＰＯ）含量显著降低。反映机体抗氧化指标的ＧＳＨ－Ｐｘ／ＬＰＯ与ＳＯＤ／ＬＰＯ比值的提高,更好地证实了绞股蓝复方良好的抗氧化作用。     

绞股蓝多糖抗肿瘤作用及其对荷瘤动物免疫机能的影响

从江苏地区产的绞股蓝中提取的多糖成分进行了药理试验。结果表明,绞股蓝多糖对小白鼠移植性肿瘤S_(180)有显著的抑制作用;用绞股蓝多糖无任何毒副作用,且能对抗化疗药引起的骨髓抑制等不良反应;保护细胞免受自由基的攻击,对机体的免疫机能有一定的增强作用。     

绞股蓝及单体Rb_1对小鼠学习记忆的促进作用

采用一次性被动回避条件反应—跳台法及避暗法的行为实验和5种化学药物所致记忆障碍的模型,观察了葫芦科植物绞股蓝的3种提取剂及单体Rb_1对小鼠学习记忆的影响。结果表明绞股蓝3种提取剂均可改善樟柳碱引起的记忆获得障碍;Rb_1可对抗30％乙醇和戊巴比妥钠所致记忆获得障碍;绞股蓝20％醇提剂对蛋白合成抑制剂(环已酰亚胺、氯霉素)造成的记忆巩固不良以及20％乙醇引起的记忆再现障碍均有拮抗作用。     

绞股蓝对海马注射Aβ1-40大鼠脑内细胞周期蛋白表达和钙稳态变化的影响

目的：探讨绞股蓝对海马注射Aβ₁-40大鼠脑内细胞周期蛋白异常表达和钙稳态变化的影响。方法： 动物随机分为绞股蓝组、模型组、对照组。运用淀粉样β蛋白双侧海马注射,模拟阿尔茨海默病脑内Aβ对神经系统的损害。Y型迷宫测试大鼠学习记忆能力,免疫组织化学染色和积分吸光度分析检测细胞周期蛋白A、B₁(cyclin A、cyclin B₁)，Fura-2/AM-荧光法测定海马细胞内Ca2＋含量；并对绞股蓝组大鼠给予绞股蓝皂苷灌胃，观察其对AD大鼠上述各项指标变化的影响。结果： Aβ₁-40海马注射大鼠学习记忆能力明显低于对照组(P＜0.05)，脑内细胞周期蛋白A、B₁蛋白水平明显高于对照组，海马神经元内Ca2＋含量显著高于对照组；而给予绞股蓝在一定程度上能改善大鼠学习记忆能力，降低cyclin A、cyclin B₁蛋白和Ca2＋含量的水平(P＜0.05)。结论：绞股蓝对Aβ引起的动物学习记忆能力减退、海马神经元内异常表达细胞周期蛋白和钙稳态失衡有一定的逆转作用。     

三七、绞股蓝抗兔血管重构的实验研究

目的：研究三七、绞股蓝单方及配伍方对实验性兔动脉粥样硬化（AS）模型血管重构的影响。方法：64只3—4月龄新西兰雄兔随机分为正常组（Contr01）、模型组（Model）、三七组（sQ）、绞股蓝组（JGL）、复方组（FF）、卡托普利组（Captopril）。除正常对照组外，均予耳缘静脉注射牛血清白蛋白250mg／ks后继喂高脂饲料，同时各药物组给予相应的药物，连续12周。于12周末行胸主动脉HE、EF（弹力纤维）染色，观测VSMC（血管平滑肌细胞）核个数、EF的变化；免疫组织化学标记胸主动脉PCNA（增殖细胞核心抗原）、TGF—β1（转化生长因子-β1）表达。结果：（1）与模型组比较，各药物组主动脉病变不同程度减轻，尤以复方组为优；（2）复方组与模型组比较VSMC核个数显著下降；（3）模型组与正常组比较，主动脉PCNA数密度百分数、TGF—β1面积百分比显著升高（P〈0．01），各药物组有不同程度的降低。结论：三七、绞股蓝及复方通过降低TGF—B1表达，减轻该因子致细胞增殖的作用，减轻血管壁肥厚性重构。     

绞股蓝50%总皂苷提取物指纹图谱定性和人参皂苷Rb1定量分析的研究

目的：建立绞股蓝50%总皂苷提取物HPLC-ELSD法的指纹图谱定性和定量分析方法。方法：使用Agilent ZOBAXSB-C18（250 mm×3.0 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙酸-异丙醇-水（2∶8∶90）和乙腈进行梯度洗脱,ELSD检测器;流速：0.5 mL/min,柱温：20°C,理论塔板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于5 000。对绞股蓝50%总皂苷提取物进行指纹图谱定性分析,对其中的有效成分人参皂苷Rb1进行含量测定。结果：在色谱条件下,10份不同产地的绞股蓝50%总皂苷提取物的HPLC-ELSD指纹图谱中确定12个共有峰作为定性的指标峰;人参皂苷Rb1在1.03μg~5.32μg范围内呈线性关系（r=0.999 8）,平均加样回收率为98.0%,RSD为1.78%。结论：绞股蓝50%总皂苷提取物皂苷部位HPLC-ELSD指纹图谱定性和有效成分定量分析方法具有较强的针对性和准确性,可用于绞股蓝提取物及其制剂的质量控制。