褪黑素对急性胰腺炎相关性肺损伤中趋化因子MIP-2表达的影响

目的观察褪黑素(MT)对ANP大鼠肺组织趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)表达的影响,探讨MIP-2在ANP相关肺损伤发病机制中的作用。方法35只SD大鼠随机分为假手术组(SO组),ANP 3h、6h、12h组和MT 3h、6h、12h组,每组5只。采用4%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制备ANP动物模型,MT组在ANP诱导前30min腹腔注射MT 20mg/kg体重。检测血淀粉酶,观察肺组织病理学改变,采用实时定量RT-PCR法和免疫组化检测肺组织中MIP-2 mRNA和蛋白的表达。结果与SO组相比,ANP 3h、6h和12h组肺组织MIP-2 mRNA表达分别增加48%,137%和230%。ANP组MIP-2蛋白表达量分别为3.40±0.84,5.80±0.55和6.40±0.45。MT干预组肺组织损伤得到改善,MIP-2 mRNA表达分别为ANP相应时间点的87%,77%和84%,MIP-2蛋白表达分别为2.20±0.84.4.20±0.45和5.20±0.50,与ANP相应时间点比较,相差显著(P<0.05)。结论MIP-2在ANP相关肺损伤发病中起一定作用,MT可能通过下调MIP-2的表达以减轻ANP相关肺损伤的程度。     

内毒素血症时大鼠脂多糖结合蛋白的变化及其意义

目的　探讨内毒素血症时大鼠肝组织中脂多糖结合蛋白mRNA的表达、血浆中脂多糖结合蛋白 (LBP)含量的变化及其意义。方法　经大鼠尾静脉注入内毒素 (5mg/kg)建立内毒素血症动物模型 ,检测不同时点模型鼠肝组织中LBPmRNA的表达 ,同时检测血浆中LBP、内毒素、TNF α及IL 6含量的变化 ,并与对照组相比较。另取肝组织在电镜下观察其病理学改变。结果　随着内毒素血症时间的延长 ,内毒素组大鼠肝组织LBPmRNA的表达明显增强 ,血浆中LBP、TNF α和IL 6含量也明显增加 ,与对照组比较差异有高度显著性 (P<0 .0 1)。电镜观察见肝细胞脂肪变 ,线粒体空化 ,枯否氏细胞数量增多、体积增大、吞噬功能增强。结论　内毒素血症时 ,大鼠肝组织中LBPmRNA表达明显增强 ,血浆中LBP含量也明显增加。由此提示 ,增高的LBP可能在脂多糖介导的枯否氏细胞激活及产生、释放各种炎性介质中可能起了重要作用。     

巨噬细胞集落刺激因子与急性冠状动脉综合征及其斑块稳定性的临床研究

目的探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)在急性冠状动脉综合征(ACS)患者各时间段血清中的水平变化及其与斑块稳定性的关系。方法采用酶联免疫法定量检测ACS患者发病后各时间段、稳定性心绞痛(SAP)患者和健康成年人血清中M-CSF、高敏C-反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,根据冠状动脉造影及血管内超声检查结果确定冠状动脉粥样斑块的性质。结果ACS患者发病后第1、2、3天血清中M-CSF、hs-CRPI、L-6、TNF-α的水平均较SAP患者和健康成年人显著增高,差异有统计学意义(P<0.01);同时M-CSF的水平与hs-CRPI、L-6和TNF-α的水平均呈显著正相关(r值分别为0.812、0.733、0.741);而且M-CSF在整个急性炎症过程中均显著增高。同时明确ACS患者的冠状动脉粥样斑块为富含薄纤维帽和脂质池的不稳定斑块。结论M-CSF在ACS急性炎症反应中较hs-CRPI、L-6、TNF-α这三种标志物更具特异性,ACS患者的发病与冠状动脉粥样斑块的稳定性有关。     

苦地丁对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的　探讨苦地丁对小鼠免疫功能的影响。方法　实验组小鼠灌胃给苦地丁水煎剂 (0 .2g ml) ,每次 0 .5ml,每日 1次 ;对照组小鼠灌胃给同等量生理盐水 ;7d后两组小鼠同时测定脾、胸腺重量 ,腹腔巨噬细胞吞噬功能 ,脾淋巴细胞增殖反应及IL 2活性。结果　苦地丁可使脾和胸腺萎缩 ,巨噬细胞吞噬功能降低 ,淋巴细胞增殖反应受到抑制 ,IL 2活性减弱 ,与对照组比较具有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　苦地丁对小鼠免疫功能有明显的抑制作用     

球囊成形术后氯沙坦对兔血管内膜增殖及巨噬细胞表达的影响

目的　通过观察AT1受体的特异性拮抗剂氯沙坦 (Losartan)对兔腹主动脉球囊成形术后内膜增殖和巨噬细胞表达的影响 ,探讨氯沙坦治疗血管再狭窄的机制。方法　采用内皮剥脱加高脂饮食 (含 1 5 %胆固醇 )喂养 8周制作兔腹主动脉粥样硬化膜型 ,然后对狭窄部位行球囊成形术。术后氯沙坦组给予氯沙坦 10mg·kg-1·day-1口服 ,对照组喂生理盐水。 4周后取腹主动脉行组织形态学观察 ,用免疫组织化学方法分析巨噬细胞。结果　对照组内膜厚度 /中膜厚度比值为 0 65± 0 17,氯沙坦组则减少为0 44± 0 11(P <0 0 1) ,对照组内膜面积 /中膜面积比值为 0 74± 0 16,氯沙坦组则减少为 0 5 4± 0 13(P <0 0 1)。氯沙坦组新生内膜中巨噬细胞数亦较对照组显著减少 (P <0 0 1)。结论　氯沙坦通过抑制AngⅡ的作用进而抑制巨噬细胞的浸润 ,抑制炎症反应 ,从而减轻再狭窄     

当归对链脲佐菌素糖尿病小鼠腹腔巨噬细胞受损吞噬功能的影响

当归增强正常小鼠的细胞免疫和体液免疫功能以及提高其单核吞噬系统的非特异性吞噬能力的研究,国内外均有文献报道。本实验仅就当归对糖尿病状态下小鼠受损的巨噬细胞吞噬功能的影响和高浓度葡萄糖对当归效应的作用作了观察,现将结果报告如下。材料和方法一、动物:C_57纯系小鼠,重庆医科大学实验动物中心提供,体重19～24g,不分雌雄。二、当归注射液:四川雅安制药厂出品,批号850912,每安瓿2 ml含生药0.22g。三、糖尿病模型建立:用pH4.5的柠檬酸缓冲液将链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ,Sigma公司产品)配制成1%溶液,按190mg/kg体重给小鼠1次性腹腔注射。注药后第5天用邻甲苯胺法测血糖。血糖     

应用微波辐射技术及天青伊红瑞氏改良法显示切片中巨噬细胞的探讨

巨噬细胞是一种广泛分布在结缔组织中的多功能细胞。在HE染色切片中,巨噬细胞不易与成纤维细胞区别;而显示组织切片中巨噬细胞的天青伊红瑞氏染色法,不仅着色需要8～12h,且切片着色背景杂乱,巨噬细胞吞噬颗粒不明显,不易查找,给诊断、计数工作带来很多困难。为改进以上弊端,我们用微波辐射(MWI)技术显示病变组织切片中的巨噬细胞,不仅大幅度缩短了着色时间,面且巨噬细胞染色效果较理想。现将方法、结果报道如下。     

大鼠骨髓巨噬细胞的分离,纯化,培养以及鉴定

目的：为深入研究骨髓巨噬细胞的生物学功能，探索一种简便的骨髓巨噬细胞的分离，纯化和培养的方法。方法：分离获取大鼠骨髓细胞，在60％DMEM培养液，20％马血清，20％(v／v)L929培养上清的诱导条件下进行体外贴壁培养，6～7天时获得纯度较高的贴壁细胞。采用倒置显微镜下观察生活状态、Wrights染色光镜观察、电子显微镜观察检测贴壁细胞形态学；酸性磷酸酶及非特异性酯酶染色测定细胞内酶的表达；吞噬鸡红细胞及墨汁颗粒实验检测其吞噬功能；免疫细胞化学染色观察细胞表面标志等生物学技术鉴定培养的贴壁细胞性质。结果：获得高纯度的巨噬细胞，且具有良好的吞噬功能，并且具备巨噬细胞的形态特征，特有的水解酶类及特有的表面标志-CD68。结论：本法是一种简易实用的体外分离、纯化、培养骨髓巨噬细胞的方法。