全文获取类型
收费全文 | 27142篇 |
免费 | 2095篇 |
国内免费 | 1736篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 151篇 |
儿科学 | 244篇 |
妇产科学 | 409篇 |
基础医学 | 5411篇 |
口腔科学 | 563篇 |
临床医学 | 1648篇 |
内科学 | 3937篇 |
皮肤病学 | 285篇 |
神经病学 | 2027篇 |
特种医学 | 834篇 |
外国民族医学 | 8篇 |
外科学 | 2102篇 |
综合类 | 5499篇 |
现状与发展 | 2篇 |
预防医学 | 985篇 |
眼科学 | 275篇 |
药学 | 2211篇 |
2篇 | |
中国医学 | 957篇 |
肿瘤学 | 3423篇 |
出版年
2024年 | 18篇 |
2023年 | 181篇 |
2022年 | 251篇 |
2021年 | 530篇 |
2020年 | 496篇 |
2019年 | 486篇 |
2018年 | 456篇 |
2017年 | 677篇 |
2016年 | 718篇 |
2015年 | 839篇 |
2014年 | 1243篇 |
2013年 | 1393篇 |
2012年 | 1385篇 |
2011年 | 1731篇 |
2010年 | 1470篇 |
2009年 | 1474篇 |
2008年 | 1859篇 |
2007年 | 2048篇 |
2006年 | 2015篇 |
2005年 | 2031篇 |
2004年 | 1773篇 |
2003年 | 1567篇 |
2002年 | 1209篇 |
2001年 | 1035篇 |
2000年 | 806篇 |
1999年 | 683篇 |
1998年 | 549篇 |
1997年 | 460篇 |
1996年 | 340篇 |
1995年 | 267篇 |
1994年 | 254篇 |
1993年 | 143篇 |
1992年 | 135篇 |
1991年 | 102篇 |
1990年 | 106篇 |
1989年 | 77篇 |
1988年 | 41篇 |
1987年 | 25篇 |
1986年 | 21篇 |
1985年 | 27篇 |
1984年 | 12篇 |
1983年 | 6篇 |
1982年 | 11篇 |
1981年 | 10篇 |
1980年 | 6篇 |
1979年 | 5篇 |
1977年 | 1篇 |
1976年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
971.
目的 构建含小鼠FNDC5基因的绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C3-FNDC5,并初步探索其对C2C12肌细胞的线粒体能量代谢的影响。方法 应用反转录-聚合酶链反应法从小鼠腓肠肌和心脏组织中扩增出两端带有HindⅢ和EcoRⅠ酶切位点的FNDC5编码片段,经回收、纯化酶切后,依次连接到质粒PMD19-T和pEGFP-C3上,获得过表达载体后转染至C2C12肌细胞,48h后以激光共聚焦显微镜拍摄线粒体荧光强度,以荧光定量PCR检测与线粒体能量代谢相关的基因PGC-1β、ATPase6、ND1和ND6的表达情况。结果 PCR及测序结果表明:重组质粒pEGFP-C3含有FNDC5段,方向及大小正确,过表达FNDC5可以增强线粒体荧光强度,并增加线粒体能量代谢相关的基因PGC-1β、ATPase6、ND1和ND6的表达。结论 成功构建了小鼠真核表达载体pEGFP-C3-FNDC5,过表达FNDC5可以增强线粒体能量代谢。 相似文献
972.
目的:探讨和研究孤独症患儿对5种基本面部表情的认知特征。方法研究对象选取2014年1月~2014年12月被诊断为孤独症的46例患儿,设为观察组,选取基本情况与观察组匹配的100例正常儿童作为对照组,2组儿童分别被动观察高兴、悲伤、惊讶、愤怒、恐惧5种面部基本表情图,对比2组患者的视觉注意行为和自身情绪变化。结果视觉注意行为结果显示,观察组患儿对5种情绪的初次平均注视时间均显著低于对照组(P<0.05),且对5种情绪的回看次数也显著低于对照组(P<0.05);情绪反应结果显示,孤独症患儿的悲伤、惊讶、愤怒、恐惧的积极反应评分均高于对照组(P<0.05),高兴、悲伤、惊讶的消极反应评分均高于对照组(P<0.05),其他对比差异无统计学意义。结论孤独症患儿对于面部表情的视觉注意减少,存在一定程度的情绪感知缺陷,对于负性情绪的理解相对更为困难,应当引起临床关注。 相似文献
973.
【目的】观察针刺对胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。【方法】将32只SD大鼠随机分成正常组、正常针刺组、模型组和模型针刺组,采用葡萄糖氧化酶法、酶联免疫吸附法(ELISA)、实时荧光定量PCR等方法,检测并比较各组大鼠空腹血糖(FPG),血浆胰岛素(FINS),胰岛素敏感性指数(ISI),血清C-肽(C-P),骨骼肌IRS-1、 IRS-2、 GLUT4 mRNA表达。【结果】模型组大鼠的FPG、 FINS、C-P水平较正常组显著升高(P<0.01), ISI, IRS-1、 IRS-2、 GLUT4 mRNA表达较正常组显著降低(P<0.01);模型针刺组的FPG、 FINS、 C-P水平较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01), ISI, IRS-1、 IRS-2、 GLUT4 mRNA表达较模型组显著升高(P<0.01)。【结论】针刺可能在基因转录水平对IRS-1、 IRS-2、 GLUT4产生影响,从而改善PI3K通路的信号转导。 相似文献
974.
目的:探讨溃疡性结肠炎患者应用双歧杆菌四联活菌片联合奥沙拉嗪治疗临床疗效,及对免疫功能和Fas/FasL表达的影响.方法:本组96例溃疡性结肠炎患者随机分为观察组(n=48)和对照组(n=48).对照组口服奥沙拉嗪治疗,观察组在对照组基础上结合双歧杆菌四联活菌片治疗.两组均以2周为1个疗程,连续服用2个疗程评价两组临床疗效,对血清炎症因子、免疫功能、C-反应蛋白及Fas/FasL表达的影响.结果:观察组治疗2个疗程后总有效率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均明显低于各组间治疗前及对照组治疗后,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后CD4+、CD4+/CD8+表达高于治疗前及对照组治疗后,而CD8+明显低于治疗前及对照组治疗后,差异具有统计学意义(P<0.05);两组治疗后Fas、FasL表达均低于各组间治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后C-反应蛋白水平低于各组间治疗前及对照组治疗后,差异具有统计学意义(P<0.05);两组均无明显不良反应发生.结论:溃疡性结肠炎患者应用双歧杆菌四联活菌片联合奥沙拉嗪治疗临床疗效明显,双歧杆菌四联活菌片可使CD4+/CD8+比值恢复正常范围,经逆转Fas/FasL表达异常,而诱导淋巴细胞凋亡,故而具有重要临床研究价值. 相似文献
975.
【目的】观察龟板提取物诱导神经干细胞(neural stem cells, NSCs)向神经元细胞定向分化过程中相关microRNA表达的变化。【方法】分离培养孕14 d SD胎鼠原代神经干细胞,经免疫荧光染色鉴定神经干细胞的特异抗原及其多向分化能力。神经干细胞随机设空白对照组、龟板提取物低浓度组(3μg/mL)、龟板提取物高浓度组(30μg/mL)。诱导分化7 d,提取各组细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测不同组别miR-124和miR-9的变化。【结果】与空白对照组比较,龟板提取物低浓度组miR-124和miR-9表达均无显著变化,龟板提取物高浓度组均显著升高(P<0.05)。【结论】龟板提取物可能通过调控miR-124、 miR-9表达在NSCs向神经元细胞定向分化过程中起重要作用。 相似文献
976.
【目的】研究针刺少阳经穴与针刺非经非穴治疗无先兆偏头痛患者前后的基因表达谱。【方法】采用基因芯片技术,分析比较采用经穴(经穴组)和非经非穴(非经非穴组)治疗无先兆偏头痛患者(各10例)后基因表达谱的差异;选取部分基因进行Real-time聚合酶链反应(RT-PCR),验证基因芯片结果的准确性。【结果】经穴组治疗前后筛选出72个差异基因;非经非穴组治疗前后筛选出110个差异基因。经穴组差异基因涉及的功能包括脑内啡肽酶、 ATP合酶等,与治疗该病的关联性大。但非经非穴组涉及的基因功能广泛且分散,与治疗该病关联性较小,如细胞凋亡、 DNA修复等。 RT-PCR检测了经穴组的ATPAF2、 PTGS2、 TOR3A基因,非经非穴组的ACP2、 AURKA、 ARHGEF11、 CASP8基因,验证了基因芯片数据的可靠性。【结论】本经取穴治疗无先兆偏头痛的经穴效应在分子水平是多基因作用的综合结果,而非经非穴产生的安慰效应并未找到与之对应的与治疗无先兆偏头痛相关的靶基因,进一步证明了经穴效应的存在。 相似文献
977.
目的 :制备具有生物学活性的重组致死因子253(lethal factor 253,LF253)抗原,获得纯化的目的蛋白,检测其与全分子致死因子(lethal focfor,LF)蛋白竞争性结合保护性抗原(protective antigen,PA)的能力。方法:PCR扩增致死因子LF253片段的DNA,将目的基因插入p ET-28a(+)表达载体中,利用大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌,IPTG诱导重组蛋白表达,通过His标签亲和层析柱获得目的蛋白,Western blot和ELISA法检测蛋白抗原性,Biacore T-100测定重组蛋白与保护性抗原PA结合的亲和力,细胞毒性实验检测其生物学活性。结果:成功构建原核表达载体p ET-28a/LF253,诱导获得重组蛋白s LF253的表达。Western blot和ELISA检测结果证实,该重组蛋白具有良好抗原特异性;细胞毒实验结果表明,重组蛋白可在体内外中和致死毒素引起的生物学效应。结论:本研究制备的融合蛋白s LF253能够与保护性抗原PA结合,可竞争性抑制LF全分子蛋白与PA的聚合,阻断炭疽毒素的致死作用,为今后炭疽疫苗等药物的研发奠定了基础。 相似文献
978.
目的:研究miR-372(miR-372)对新血管生成因子AGGF1基因的表达调控?方法:通过生物信息学预测找到可能靶向调控AGGF1基因的候选miRNA;通过荧光素酶报告基因实验?荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blot检测等实验证实miR-372对AGGF1基因表达的靶向调控;通过体外血管内皮细胞成管实验检测miR-372对血管生成的影响?结果:生物信息学预测显示miR-372靶向AGGF1;荧光素酶报告基因实验证实miR-372可通过结合AGGF1基因3′-非翻译区(3′-untranslational region,3′-UTR)而抑制其表达;qPCR和Western blot实验分别表明miR-372在mRNA水平和蛋白水平下调AGGF1表达;体外血管生成实验表明miR-372所介导的AGGF1表达下调可明显抑制血管生成?结论:miR-372可通过靶向结合AGGF1基因的3′-UTR下调其表达,并抑制内皮细胞血管生成能力? 相似文献
979.
唐东红 《中国比较医学杂志》2015,25(12)
目的 分析荧光定量PCR 与半定量PCR 检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH/XO)的mRNA的相对表达量的差异,其结果具有一定的参考价值。方法 提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,使用相同的引物序列及内参基因,分别用荧光定量PCR 与半定量PCR 进行相对定量检测,结果做比对分析。结果 两种检测方法的特异性没有差异,荧光定量PCR较半定量PCR灵敏性高,均显示猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,对于表达量较低的其他组织,荧光定量PCR 与半定量PCR检测结果有一定差异。结论: 荧光实时定量PCR优于半定量PCR 法。 相似文献
980.
目的:构建Peroxiredoxin2(PRDX2)基因RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒表达载体,探讨PRDX2基因干扰后对结直肠癌SW480细胞增殖的影响。方法设计、合成靶向PRDX2的RNA干扰的序列,构建pGC‐EGFP‐shPRDX2慢病毒载体并进行鉴定,同时应用qRT‐PCR和Westernblot方法观察转染的SW480结肠癌细胞PRDX2mRNA和蛋白表达的抑制效果,并通过MTT、平板克隆形成实验检测细胞增殖变化。结果成功构建PRDX2基因慢病毒载体并经测序证实;pGC‐EGFP‐shPRDX2可有效抑制结直肠癌SW480细胞PRDX2的表达,感染慢病毒的SW480细胞中PRDX2mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);SW480细胞经PRDX2RNA干扰后其生长和增殖能力显著降低(P<0.05)。结论PRDX2基因RNAi慢病毒表达载体在SW480细胞中表达稳定可靠,PRDX2基因干扰后有效抑制了结直肠癌SW480细胞的增殖和生长,为进一步探讨PRDX2在结直肠癌发生、发展及转移中的作用奠定基础。 相似文献