RGD脂肪醇与17-AAG脂质体的制备及抗肿瘤活性研究

目的制备一种新的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-苯丙氨酸-脂肪醇(Arg-Gly-Asp-Phe-fatty alcohol,RGDFOC12)与17-丙烯氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin,17-AAG)的脂质体(RGDFOC12liposomes-loaded 17-AAG,RLAs)。方法采用薄膜分散-探头超声法制备;采用激光纳米粒度仪、透射电镜和扫描电镜测定粒径,Zeta电位和外观形态;采用动态透析法测定药物释放;采用四甲基偶氮唑盐〔3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT〕考察其对5种人肿瘤细胞株增生的抑制作用;通过瘤质量、存活数、体质量、脏器指数比评价其在小鼠体内抗肿瘤效果。结果制备得到的RLAs的粒径为(130.6±0.6)nm,Zeta电位为(-28.37±1.67)m V,外观形态为球形,包封率为80%以上。RLAs在p H 5.4环境的累积释放百分数大于在p H 7.4环境的累积释放百分数。RLAs在血浆中可稳定存在,12 h累积释放百分数为(15.85±0.71)%。RLAs对5种肿瘤细胞有抑制增生作用。RLAs对接种S180腹水瘤的ICR小鼠有抑制肿瘤生长作用。结论本研究制备了一种新的RLAs,制备方法简单、包封率高,具有较好的抗肿瘤活性。     

不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及对相关基因表达的影响

目的 探讨不同时间、不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基（N-nitrosobis-2-oxopropylamin,BOP）诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因表达的变化.方法 72只仓鼠按完全随机法分为3组,每组24只.A组采用小剂量BOP长周期皮下注射诱导造模（10 mg/kg体质量,每周1次,连续8周）;B组采用大剂量BOP短周期皮下注射诱导造模（首次剂量70 mg/kg体质量,后3周每周20 mg/kg体质量）;C组为未注射BOP的对照组.成模后取胰腺组织及肝脏组织行病理组织学检查.采用实时PCR法及蛋白质印迹法检测仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因的表达.结果 A组仓鼠中19只成功诱导胰腺癌模型;B组均未见胰腺肿瘤形成,而18只仓鼠成功诱导肝内胆管细胞癌;C组胰腺及肝脏均未见异常.仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ mRNA的表达量分别为对照组的1.93、2.03、1.57、5.55和3.54倍,差异有统计学意义（P值均＜0.05）;COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ蛋白的表达量分别为2.47 ±0.22、0.56 ±0.05、1.23 ±0.05、1.55 ±0.13、2.02 ±0.01,而对照组仓鼠正常胰腺组织的蛋白表达量分别为0.80±0.08、0.39 ±0.01、0.60 ±0.01、0.53 ±0.03、0.40 ±0.02,两组差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.两组MHC-ⅡmRNA及蛋白表达的差异无统计学意义.结论 小剂量BOP长周期皮下注射能成功诱导仓鼠胰腺癌模型,胰腺癌组织的COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ基因表达上调,可能参与仓鼠胰腺癌的发生和发展.     

HPLC法同时测定复方阿胶补血颗粒中4种氨基酸

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定复方阿胶补血颗粒中4种氨基酸。方法 采用Waters Sunfire C₁₈色谱柱（4.6 mm × 250 mm,5 mm）,以乙腈-0.1 mol·L^-1醋酸钠溶液（用36%乙酸调节pH值至6.5）（7∶93）为流动相A,以乙腈-水（4∶1）为流动相B,梯度洗脱（0~13 min,100% A ® 93% A;13~17.9 min,93% A ® 88% A;17.9~29 min,88% A ® 85% A;29~39 min,85% A ® 66% A;39~45 min,66% A ® 0% A）,柱温43 °C,体积流量1.0 mL·min^-1,检测波长254 nm。结果 L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸进样量分别在0.012 ~ 0.117、0.022 ~ 0.218、0.010 ~ 0.097、0.016 ~ 0.160 mg范围内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系;平均回收率（n=6）分别为96.4%、97.3%、97.1%、99.4%;RSD分别为1.2%、1.9%、1.7%、0.9%。结论 该方法操作简单,重复性好,为控制复方阿胶补血颗粒的质量提供了可靠的方法。     

甘氨酸通过PTEN/Akt通路减轻脑出血大鼠神经损伤

探讨甘氨酸对脑出血大鼠神经损伤的保护作用及其机制。将48只大鼠随机分为假手术组、模型组、甘氨酸组(分别给予0.5 mg/kg或2 mg/kg甘氨酸)。采用侧脑室注射自体血建立大鼠脑出血模型;干湿重法检测脑组织含水量,甲酰胺法检测血脑屏障通透性,原位末端标记法(TUNEL)法检测脑组织细胞凋亡的情况,实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸酶与张力蛋白同源物基因(PTEN)mRNA的表达,免疫印迹(Western blot)法检测脑组织中Akt、PTEN蛋白的表达水平。结果显示,与模型组比较,2 mg/kg甘氨酸组大鼠脑组织含水量、EB含量、血肿块体积、凋亡细胞数量显著降低,Akt mRNA和蛋白的表达显著升高,PTEN mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P＜0.05)。结果表明甘氨酸对大鼠脑出血造成的大鼠脑神经的损伤有一定的保护作用,这可能与甘氨酸干预的PTEN/Akt通路有关。     

甘氨酸龈下喷砂联合引导组织再生术治疗种植体周围炎

目的探讨甘氨酸龈下喷砂联合引导组织再生术（GTR）治疗种植体周围炎的有效性。 方法28例伴有牙槽骨吸收的种植体周围炎患者,按照随机、双盲、对照原则将种植体（共34枚）分成2组,分别行GTR,其中试验组（n= 18）在术中使用甘氨酸龈下喷砂系统对种植体表面进行清创;对照组（n= 16）采用塑料刮治器对种植体表面进行清创。在治疗前（基线）、治疗后3个月、治疗后6个月和治疗后12个月进行临床指标的检测,包括菌斑指数（PLI）、出血指数（BI）、探诊深度（PD）、临床附着水平（CAL）及影像学垂直骨增量。数据采用重复测量资料的方差分析,每个时间点采用独立样本t检验进行分析,试验组和对照组分别进行治疗前与治疗后的自身对比,并在基线、治疗后3个月、治疗后6个月和治疗后12个月进行临床指标的组间对比,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果在基线,试验组和对照组各临床指标差异无统计学意义（P>0.05）。各组术后PLI、BI、PD、CAL及影像学垂直骨增量均较治疗前（基线）有明显改善,差异有统计学意义（P<0.05）。患者治疗后3个月,试验组与对照组BI、PLI、PD、CAL差异均有统计学意义（t_BI= 5.103,P_BI= 0.031;t_PLI= 5.556,P_PLI= 0.025;t_PD= 4.440,P_PD= 0.043;t_CAL= 4.879,P_CAL= 0.034）。患者治疗后6个月,试验组和对照组的PD、CAL差异均有统计学意义（t_PD= 4.994,P_PD= 0.033;t_CAL= 4.831,P_CAL= 0.035）。患者治疗后12个月,试验组和对照组的PD、CAL差异均有统计学意义（t_PD= 4.302,P_PD= 0.046;t_CAL= 4.325,P_CAL= 0.048）。患者治疗后6及12个月,试验组与对照组种植体的PLI和BI均有改善,但差异无统计学意义（P>0.05）。患者影像学垂直骨增量在治疗后3、6、12个月试验组较对照组增加更明显,差异均有统计学意义（t₃=4.831,P₃= 0.035;t₆= 4.412,P₆= 0.044;t₁₂= 5.087,P₁₂= 0.031）。 结论在改善种植体周围炎炎症水平及促进牙槽骨再生方面,甘氨酸龈下喷砂联合GTR较机械刮治联合GTR更具优势,可考虑在GTR中使用甘氨酸龈下喷砂来提高种植体周围炎的治疗效果。     

整合素αvβ3受体靶向分子成像和药物递送系统在肝纤维化领域的研究进展

<正>肝纤维化具有高发病率和高死亡率特点,早期肝纤维化可以逆转,通过消除潜在病因和积极治疗可减少肝损伤,否则可进展为肝硬化甚至肝癌,故早期诊断和治疗对预后至关重要。分子成像技术可以将基因表达、生物信号传输等复杂过程转化为视觉图像,从而使早期发现纤维化肝脏的分子和病理变化成为可能。在     

UPLC-MS/MS法同时检测大鼠血浆中参芪扶正注射液主要成分的含量及其药动学

目的：建立超高效液相-三重四极杆质谱联用（UPLC-MS/MS）法同时测定大鼠血浆中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷和党参炔苷的浓度,研究参芪扶正注射液在大鼠体内的药动学。方法：血浆样品加入适量内标,50%甲醇-乙腈沉淀蛋白,离心后取上清进样。采用ACE Excel 1.7 C₁₈柱（50 mm×2.1 mm,2.1 μm）,柱温：40℃,流速：0.6 mL·min^-1,流动相由0.1%甲酸水和0.1%甲酸-乙腈组成,采用梯度洗脱,分析时间2.5 min。质谱采用ESI源,正离子检测。大鼠尾静脉注射参芪扶正注射液浓缩液,眼眶采血测定血浆中药物浓度,药动学参数以DAS 3.0软件处理。结果：黄芪甲苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷、党参炔苷的浓度分别在5~2 000 ng·mL^-1、2~800 ng·mL^-1、10~4 000 ng·mL^-1内均呈良好线性关系（R ≥ 0.991 5）;日内、日间精密度良好,RSD均小于13.3%（n=6）;提取回收率均在79.0%~97.1%之间,RSD均小于11.4%（n=6）。药动学结果表明,黄芪甲苷、党参炔苷和毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷在大鼠体内的AUC_0-t分别为（38.84±17.20）、（23.11±6.84）、（5.32±0.36）μg·min·L^-1,t_1/2分别为（56.44±28.25）、（47.48±9.54）、（10.01±4.42）min,CL分别为（0.15±0.06）、（1.18±0.47）、（0.47±0.11）mL·min^-1·kg^-1。结论：本法简便、快速、灵敏度高、专属性好,可用于参芪扶正口服液大鼠血浆中黄芪甲苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷和党参炔苷的含量测定及药动学研究。     

不同生长年限重庆庙党3种成分的动态变化

目的 研究不同生长年限重庆庙党3种活性成分的动态变化,为庙党的标准化种植、采收及质量控制等提供参考。方法 采用UV方法测定取1～5年生重庆庙党多糖及总皂苷的含量变化,采用HPLC方法测定党参炔苷的含量变化。结果 重庆庙党1～4年生长过程中,多糖含量随着生长年限的增加而增大,与第1年比较,第4年增长约100%,第5年增长约90%（第5年与第4年比较,负增长10%）;总皂苷及党参炔苷呈逐年递增趋势,第5年总皂苷合计增长约57%,党参炔苷合计增长约42%。重庆庙党生长过程中多糖、总皂苷及党参炔苷三者含量无明显相关性。结论 考虑活性成分的增长趋势、生产成本、生产效率、药材产量等因素,重庆庙党种植4年采收即可。     

不同剂量硫磺熏蒸对党参化学成分的影响

目的 研究不同剂量硫磺熏蒸对党参化学成分的影响及硫熏党参贮藏不同时间化学成分的变化,为党参饮片的科学炮制及质量评价提供参考。方法 不同剂量硫磺熏蒸党参并贮藏期12个月,采用UV及HPLC方法测定党参多糖、5-羟甲基糠醛、党参炔苷等化学成分的变化。结果 硫磺熏蒸对党参多糖的影响较小,最高剂量（2.0%）硫熏,放置12个月,多糖含量降低5.83%;对5-羟甲基糠醛、党参炔苷的影响大,最高剂量（2.0%）硫熏,放置12个月,5-羟甲基糠醛含量增加83.27%,党参炔苷含量降低54.09%。结论 硫熏对党参化学成分有显著影响。应严格控制药材加工处理及炮制过程中硫磺的使用,确保中药材及饮片的质量。