应用胶原凝胶构建组织工程化皮肤的研究

目的探讨以胶原凝胶为支架材料构建组织工程化皮肤的可行性。方法体外分离、培养人皮肤表皮细胞和成纤维细胞;利用自制的胶原蛋白制成胶原凝胶作为组织工程支架材料;在成功构建人工真皮的基础上种植表皮细胞,构建复合人工皮肤;采用HE染色与免疫组织化学的方法对复合人工皮肤进行组织学检测。结果HE染色可见,构建的复合人工皮肤具有表皮和真皮双层结构;免疫组织化学染色显示,Ⅳ型胶原、纤维连接蛋白和层粘连蛋白阳性,在形态结构上与正常皮肤相似。结论培养的人表皮细胞和成纤维细胞种植于胶原凝胶支架上,气-液界面培养可构建出具有类似正常皮肤结构的组织工程化皮肤。     

血管平滑肌细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达在自发性高血压大鼠颈动脉血管间质胶原重构及逆转中的意义

目的　探讨血管平滑肌细胞及Bcl 2和Bax蛋白表达在自发性高血压大鼠 (SHR)颈动脉血管间质胶原重构及逆转中的意义。方法　选择 16周龄雄性SHR各 12只分别为厄贝沙坦组 (30mg·kg- 1·d- 1 )和非厄贝沙坦组 ,另选同龄雄性Wistar大鼠 12只为正常对照组 ;颈总动脉切片采用HE染色、苦味酸一天狼星红 (PSR)染色、免疫组化法染色和末端脱氧核苷酸转移酶介导dUIP缺口末端标记法分别检测颈动脉壁厚 腔径比值、胶原面积百分比、Bcl 2和Bax蛋白表达和血管平滑肌细胞 (VSMC)凋亡率(APOI)。结果　非厄贝沙坦组颈动脉壁厚 腔径比值较正常对照组高 2 5 0 .11%± 15 .6 3% (P <0 .0 1) ,厄贝沙坦组治疗 2 0周后 ,较非厄贝沙坦组下降了 4 3.2 4 %± 8.6 2 % (P <0 .0 1) ;非厄贝沙坦组胶原面积百分比较正常对照组SBP高 2 0 1.6 7%± 16 .73% (P <0 .0 1) ,厄贝沙坦组治疗 2 0周后 ,较非厄贝沙坦组仅仅下降了 17.70 %± 6 .4 5 % (P <0 .0 1) ;非厄贝沙坦组的VSMC率APOI较正常对照组显著增高 ,经药物治疗后下降 ;非厄贝沙坦组的VSMCBcl 2蛋白表达阳性率明显高于正常对照组 ,用厄贝沙坦治疗后 ,VSMCBcl 2阳性率较非厄贝沙坦组明显减少 ;非厄贝沙坦组和正常对照组的VSMCBax蛋白表达阳性率无明显差别 ,用厄贝沙坦治疗后 ,VS     

天鹅型形状记忆合金接骨器对实验性骨折愈合中皮质骨胶原构筑与力学性能的影响

目的探讨天鹅型形状记忆合金接骨器(SMC)对实验性骨折愈合中皮质骨胶原构筑和力学性能的影响。方法45只新西兰大白兔双侧肱骨干截骨后,随机选取一侧用SMC固定,另一侧用4孔动力加压接骨板(DCP)固定;分别于术后2、4、8、16、32周各处死9只动物取材,4只用于扫描电镜观察固定段皮质骨胶原构筑的变化,5只用于骨干扭转生物力学性能的测定。结果SMC组在整个固定过程中,皮质骨结构与正常对照组相比无明显变化。而DCP组术后4周,胶原排列出现稀疏,局部有小吸收陷窝形成;术后8周时,胶原排列紊乱,且有多个吸收腔形成;术后16周时,胶原纤维出现中断;术后32周,骨质疏松化更加明显。术后2周时,两组肱骨骨断端尚未形成骨性连接,不能测得力学数据。术后4～32周,SMC组骨折愈合部位的扭转刚度明显优于DCP组,差异有统计学意义(F= 5．468,P＜0．05)。术后16周,SMC组骨折愈合部位的力学性能即接近正常,而DCP组术后16周扭转刚度即不再增加。结论SMC具有材料特性和几何构型上的优势,对骨干不产生应力遮挡效应,而且能有效防止骨质疏松的发生,使骨的力学性能尽早恢复。     

强脉冲光对大鼠皮肤胶原蛋白影响的定量分析

目的　定量分析强脉冲光对大鼠皮肤胶原蛋白含量的影响,进一步明确强脉冲光在治疗皮肤光老化中的作用机制。方法　选择15只SD大鼠,每只选3个部位用强脉冲光治疗,采用同一治疗参数,能量密度34J/cm2 ,分为3个脉冲,脉宽各为4ms、5ms、6ms,脉冲延时为2 0ms及2 5ms。分别切取治疗后第1、3、5、7、15、30天皮肤和未治疗部位皮肤,进行组织学观察。结果　治疗后,第1、3、5、7天皮肤胶原蛋白染色与未治疗部位比较无明显差别,第15天强于未治疗部位,第30天明显强于未治疗部位,免疫组化染色Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多(P <0 .0 0 1)。结论　强脉冲光治疗大鼠皮肤后可引起胶原含量的增加,在实验基础上为强脉冲光的临床应用提供了理论依据。     

体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成及结缔组织生长因子的表达

目的　探讨结缔组织生长因子在人增生性瘢痕发病机制中的作用。方法　体外培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞 ,通过H3 脯氨酸掺入法检测细胞胶原合成 ,通过免疫细胞化学染色和逆转录聚合酶链反应检测细胞结缔组织生长因子蛋白质和mRNA的表达。结果　和正常皮肤成纤维细胞相比 ,增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成和结缔组织生长因子蛋白质及mRNA的表达均显著增高 (P <0 0 1)。结论　结缔组织生长因子可能在增生性瘢痕纤维化过程中发挥重要促进作用。     

胶原凝胶复合骨胶原基质(BCM)负载关节软骨细胞的实验研究

目的 探讨胶原凝胶包埋软骨细胞接种BCM支架的三维培养对软骨细胞生长及功能的影响.方法 将胶原凝胶包埋的关节软骨细胞接种BCM支架并在体外培养,应用倒置相差显微镜和扫描电镜观察软骨细胞的粘附、生长和增殖情况,培养14d,行苏木精-伊红、甲苯胺蓝染色观察软骨组织形成情况.结果 软骨细胞在支架上粘附、生长和增殖良好,体外培养14d能形成较成熟的软骨组织.结论 胶原凝胶复合BCM支架具有良好的细胞相容性,可作为负载生长因子的载体.     

实验性肝纤维化胶原变化的研究

目的：研究肝纤维化过程中胶原成分的变化规律。方法：制作四氯化碳肝纤维化模型，测定肝组织羟脯氨酸含量，用ＶＧ、ＲＦ染色显示Ⅰ、Ⅱ型胶原并进行计算机图像分析，放免法测定肝匀浆及血清Ⅲ型前胶原水平，应用上述指标反映肝纤维化过程中胶原的变化规律。结果：随实验时间延长，肝内胶原含量逐渐增加。肝纤维化早、中期以Ⅲ型胶原增生为主，肝纤维化后期及肝硬化期以Ⅰ期胶原为增生为主。血清ＰＣⅢ与肝内胶原变化基本同步。结论     

High Cell-Density Culture System of Hepatocytes Entrapped in a Three-Dimensional Hollow Fiber Module with Collagen Gel

Abstract: A compact three-dimensional (3D) module is needed for hepatocyte culture in order to develop an effective hybrid artificial liver system that can retain hepa-tocellular structure and differentiated functions. We treated the 3D module with collagen gel to entrap rat hepatocytes. This method yielded a high hepatocellular density (2 times 10⁷ cells/ml) over a period of 14 days and maintained the secretion of albumin and ureogenesis at the same level as the control monolayer method. The ammonia removal remained at 43% of the Day 0 value over 8 days of perfusion. Our data show that this approach may be useful for liver support therapy in an ex-tracorporeal circuit.     

NO2和LPG燃烧产物对大鼠肺脂质过氧化,胶原含量和尿HOP的影响

本研究分别观察了ＮＯ２染毒和ＬＰＧ燃烧产物自然暴露对Ｗｉｓｔａｒ雄性成年大鼠肺脂质过氧化、肺胶原含量和尿ＨＯＰ排泄的影响及其相互关系。结果发现７．５２ｍｇ／ｍ＾３的ＮＯ２对三者均有一定影响，染毒剂量不同大鼠尿ＨＯＰ排泄也有相应的变化。尿ＨＯＰ的变化早于肺胶原含量，且两者有一定的相关关系。ＬＰＧ燃烧产物暴露期间，尿ＨＯＰ含量一直高于对照组，但未见肺胶原含量的变化，８周时尿ＨＯＰ与肺脂质过氧化物之间有     

An ultrastructural study on anterior cruciate ligament reconstruction using autogenous patellar tendon grafts in dogs

An ultrastructural study was undertaken concerning morphological changes within the autografted patellar tendon (PT) after being transplanted to the anterior cruciate ligament (ACL) in mongrel dogs. After 4 weeks, the arrangements of both large and small collagen fibrils in the PT graft became disordered, and the number of inflammatory cells increased. However, the same PT grafts revealed postsurgical signs of newly-produced collagen fibrils around activated fibroblasts at 12 to 24 weeks. At 52 weeks after the transplantation, small collagen fibrils increased in both number and density, showing a remarkable morphological similarity to the collagen fibrils of normal ACL. These data indicate that the characteristics of the PT graft eventually resemble those of a normal ACL. This paper was presented in part at the Combined Meeting of the Orthopedic Research Societies of the USA, Japan and Canada in Banff, Alberta, Canada, October, 1991.