左金方对幽门螺旋杆菌感染的人GES-1细胞增殖与凋亡的作用研究

目的研究左金方对幽门螺旋杆菌引起人正常胃黏膜上皮(GES-1)细胞增殖与凋亡的影响。方法幽门螺旋杆菌以不同的感染复数(1∶1、50∶1、100∶l、200∶1、300∶1)感染GES-1细胞,于12、24、48 h后,CCK-8检测细胞的增殖活性;以不同质量浓度(0.5、1.0、2.0、4.0μg/m L)左金方作用幽门螺旋杆菌感染的GES-1细胞12、24、48 h后,收集细胞,CCK-8检测细胞的增殖活性,流式细胞仪和Western blotting检测细胞的凋亡率;Hochest染色检测凋亡细胞的形态学改变。结果幽门螺旋杆菌感染GES-1细胞后,感染复数越大,侵染时间越长,抑制细胞生长和促进细胞凋亡的作用越强,幽门螺旋杆菌以100∶1的感染复数作用人GES-1细胞12、24、48 h后,细胞存活率分别降低到(80.57±1.21)%、(70.04±3.21)%、(67.74±2.91)%,细胞的凋亡率分别增加到(23.74±1.71)%、(53.60±1.87)%、(70.67±2.87)%;与1.0μg/m L左金方共培养24 h后,细胞存活率上升到(97.67±1.04)%,细胞凋亡率降低到(31.04±1.02)%,与相应模型组对比,差异显著(P0.01);Westernblotting结果表明,左金方各处理组细胞Caspase-3蛋白水平表达均明显降低;Hochest荧光染色,从形态学的角度进一步验证了这一结果。结论幽门螺旋杆菌感染人GES-1细胞后,可以抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,左金方可以降低幽门螺旋杆菌引起的细胞损伤,保护GES-1细胞。     

基于正交试验设计与BP神经网络优化益气活血方水提工艺研究

目的优化筛选益气活血方的水提工艺参数。方法在单因素实验基础上,采用正交试验设计,以加水量、提取时间、浸泡时间为考察因素,丹酚酸B和羟基红花黄色素A的转移率及浸膏得率为评价指标,采用G1-熵权法赋权得到综合评分。通过正交试验设计进行分析得到最佳水提工艺,再通过BP神经网络建模进行网络模型优化和目标寻优。验证试验对比2种分析方法,寻找益气活血方的最佳水提工艺参数。结果基于2种分析方法对比发现,正交试验分析得到最佳水提工艺的综合评分略高于BP神经网络建模结果,故最终确定该益气活血方最佳水提工艺参数为水提3次、浸泡0.5h、加水量20倍、提取时间3.5 h。结论优选出的益气活血方水提最佳工艺稳定可行,为复方中药的新药开发和现代化研究提供了新的思路和参考。     

HPLC指纹图谱结合化学模式识别评价舒筋活血制剂的整体质量

目的建立舒筋活血制剂(舒筋活血胶囊、舒筋活血片)HPLC指纹图谱的方法,为其整体质量评价提供参考。方法色谱柱为Agilent Poroshell 120 SB-C18(150 mm×4.6 mm,2.7μm),以乙腈-0.2%甲酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱;体积流量0.5mL/min,检测波长277nm,柱温30℃。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)考察23批舒筋活血制剂的相似度,结合主成分分析(principal component analysis,PCA)、聚类分析(cluster analysis,CA)以及正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)对舒筋活血制剂进行整体质量评价。结果舒筋活血制剂的HPLC指纹图谱中18批样品(S1～S17和S23)的相似度0.900,通过PCA、CA和OPLS-DA,23批样品聚成3类,S1～S16来自同一厂家为一类;S23和S17为一类;S18～S22为一类,并从10个共有峰中确定差异较大的4个共有峰,分别为1、3(5-羟甲基糠醛)、6(苯乙酸)和10(4-甲氧基水杨醛)号峰。结论所建立的指纹图谱结合化学模式识别方法稳定、简单,可用于评价舒筋活血制剂质量。     

益气活血通络方通过抑制P2X7介导的脊髓小胶质细胞活化改善糖尿病大鼠神经病理性疼痛

目的 探讨益气活血通络方对糖尿病神经病理性疼痛（diabetic neuropathic pain,DNP）的影响及其作用机制。方法 高脂喂养大鼠4周后,35 mg/kg链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）腹腔注射复制2型糖尿病大鼠模型,通过观测大鼠机械痛阈和热缩足反应时间作为判定DNP模型复制成功的标准。将DNP大鼠随机分为模型组,益气活血通络方高、中、低剂量组和阳性对照组（甲钴胺）,另设空白对照组。Western blot法和免疫荧光双标检测脊髓中补体受体- 3的单克隆抗体（monoclonal antibody of complement receptor type 3,OX42）和P2X7（purinergic 2X7）的表达水平;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子- α（tumor necrosis factor- α,TNF- α）、白细胞介素- 1β（interleukin- 1β,IL- 1β）和趋化因子配体3（CC- chemokine ligand 3,CCL3）水平。结果 益气活血通络方干预后,DNP大鼠的机械痛阈和热缩足反应时间均得到显著的改善;大鼠血清TNF- α、IL- 1β和CCL3水平显著降低（P<0.05）;脊髓组织中OX42和P2X7表达水平均显著降低（P<0.05）。结论 益气活血通络方对DNP大鼠具有显著的治疗作用,其作用机制可能是通过抑制脊髓小胶质细胞活性,调节P2X7的表达,从而减轻神经炎症反应。     

补肾润肺口服液辅助治疗稳定期COPD的临床研究

目的:研究补肾润肺口服液辅助糖皮质激素治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的临床疗效。方法:收集我院于2014年12月~2015年12月的COPD住院患者90例,按入院顺序分成2组,每组45例,共脱落12例,对照组(38例)给予布地奈德/福莫特罗粉吸入剂(2次/d),观察组(40例)在对照组基础上给予口服补肾润肺口服液(3支/d),采用MMRC评分表对2组患者呼吸困难进行分级,治疗前后肺功能状态,ELISA试剂盒检测炎性介质浓度,评定临床疗效。结果:呼吸困难评分值(MMRC)与肺功能(FEV1%)分别在治疗前无显著性差异,治疗后MMRC显著降低、肺功能增强,且观察组显著优于对照组(P0.05);ELISA法检测炎性因子结果显示,治疗前IL-8、TNF-α水平比较无显差,治疗后各组患者的炎性因子水平均较同组显著降低(P0.05,P0.01),且观察组显著低于对照组,下降的幅度大于对照组(P0.05);临床疗效结果显示,观察组总有效率显著高于对照组(P0.05)。结论:补肾润肺口服液对布地奈德/福莫特罗粉吸入剂治疗COPD具有积极的辅助作用。     

益气补肾复方联合化疗治疗非小细胞肺癌的临床观察

目的:建立中西医联合治疗非小细胞肺癌患者的优化方案,达到更好的临床疗效,提高病人生活质量,尽量延长其生存周期。方法:按照单中心、随机、平行对照、单盲的方法,把符合纳入标准的患者分为试验组和对照组。试验组:西医常规化疗+协定方,服用益气补肾复方4个月,同时化疗4个疗程;对照组:同试验组相同的化疗方案,不服用中药,连续化疗4个疗程。并在预计时间评价RECIST标准评分、KPS评分来统计分析。结果:按照RECIST标准评价,两组在缩小瘤体疗效方面无统计学差异(P0.05);按KPS评分评价,两组在KPS评分的比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:从观察指标的总有效率来讲,中西医结合治疗IIIb-IV期NSCLC的总体疗效相对于单纯的西医化疗,具有一定优势,益气补肾法在治疗中晚期NSCLC中有减毒增效的功效。     

益气活血冲剂治疗弥漫性轴索损伤对格拉斯哥评分的影响

目的：观察中西医结合治疗弥漫性轴索损伤的疗效,探讨益气活血冲剂口服后对格拉斯哥（Glasgow）计分的影响。方法将62例弥漫性轴索损伤的患者,随机分为治疗组和对照组,每组各31例,对照组采用常规的脱水降低颅内压、止血药物的运用、护脑治疗及维持水电解质的平衡。治疗组在对照组的基础上加用益气活血冲剂口服,两组疗程一个月,治疗后评定疗效。结果治疗组与对照组治疗前后Glasgow评分组内比较差异有统计学意义（P<0.05）;两组治疗后比较,差异有统计学意义（P<0.05）;两组总显效率平均为75.16%和35.48%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论中西医结合治疗弥漫性轴索损伤有促进患者康复的作用。     

补肾活血方对去卵巢大鼠子宫ER及Cyclin B表达影响的实验研究

目的观察补肾活血方对去卵巢大鼠子宫的雌激素受体及周期蛋白(Cyclin)B表达的影响,探讨其治疗围绝经期综合征的作用机制。方法选择SD雌性大鼠54只,随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、补肾活血方组、联合用药组、补肾活血方+假手术组,每组9只。以双侧卵巢切除法建立大鼠围绝经期模型。各组灌胃给药40 d后取血清和子宫称重;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)浓度;HE染色观察子宫组织病理改变并测定子宫内膜厚度;免疫组化法观察雌激素受体(ER)α、ERβ在子宫组织中分布与表达情况;蛋白质印迹法(Western blot)法检测子宫组织中周期蛋白(Cyclin B)蛋白表达。结果补肾活血方治疗40 d后,与模型组比较,血清LH、FSH明显降低(P0.05或P0.01),血清E2水平升高(P0.05);同时,子宫脏器指数、子宫内膜厚度、子宫组织中ERα、ERβ和Cyclin B蛋白表达均明显升高(P0.05),与雌激素组呈现相似的作用,但作用强度均低于雌激素;补肾活血方+假手术组大鼠各项指标与假手术组比较无明显差异。结论补肾活血方具有雌激素样作用,但作用强度弱于雌激素,对正常大鼠子宫组织无显著影响。     

补肺活血胶囊治疗慢性阻塞肺疾病稳定期临床观察

目的观察补肺活血胶囊治疗稳定期慢性阻塞肺疾病(COPD)患者临床疗效。方法将80例COPD患者随机分为两组,对照组给予西药沙美特罗替卡松粉吸入治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加以补肺活血胶囊治疗,治疗2个月后,采用圣·乔治呼吸问卷(SGRQ)评分评定治疗前后生活质量改善情况,并比较两组治疗前后肺功能、动脉血气变化、中医证候总积分治疗疗效。结果治疗组治疗总有效率显著高于对照组(P0.05);两组患者治疗后的SGRQ评分、肺功能和动脉血气指标较治疗前均有显著改善(P0.05),且治疗组较对照组改善明显(P0.05);两组治疗后的中医症状总积分较治疗前显著下降,但治疗组下降更为明显(P0.05)。结论在西药常规治疗基础上,加以补肺活血胶囊治疗稳定期COPD较单独使用西药治疗更为有效,可以显著提高患者生活质量和改善肺功能。     

益气活血风静胶囊对大鼠及家兔血液流变学的影响

目的：研究益气活血风静胶囊对大鼠及家兔的血液流变学的影响。方法：采用SD大鼠及家兔分别灌胃给药14 d及10 d,检测SD大鼠及家兔血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FIB）及血小板聚集率。另采用SD大鼠,大脑中动脉阻塞（MCAO）大鼠造模后灌胃给药5 d,检测MCAO大鼠PT、APTT、TT、FIB及脑组织含水量。结果：与空白组比较,益气活血风静胶囊高、中剂量组及阳性对照组,能显著延长大鼠血浆的PT、TT、APTT （P<0.05）,并能显著降低FIB的含量（P<0.05或P<0.01）,显著降低以二磷酸腺苷（ADP）诱导的大鼠血小板聚集率（P<0.05）。与空白组比较,益气活血风静胶囊高、中、低剂量组及阳性对照组能显著延长家兔血浆的PT、TT、APTT （P<0.05或P<0.01）,并能显著降低FIB的含量（P<0.01）,显著降低以ADP诱导的大鼠血小板聚集率（P<0.05或P<0.01）。MACO大鼠模型组给药后,与假手术组比较,模型组大鼠PT、APTT、TT明显缩短（P<0.05）,FIB含量升高（P<0.05）,脑组织含水量明显增加（P<0.01）;与模型组比较,益气活血风静组和人参有效部位组能延长大鼠血浆PT、APTT、TT时间（P<0.05或P<0.01）,降低纤维蛋白原的含量（P<0.01）,显著降低模型大鼠脑组织含水量（P<0.05）,牡丹皮有效部位组大鼠TT延长（P<0.05）,降低纤维蛋白原的含量（P<0.01）,显著降低模型大鼠脑组织含水量（P<0.05）。结论：益气活血风静胶囊具有显著的抗凝血以及抑制以ADP诱导的血小板聚集的作用,并对MCAO大鼠有较好的活血作用。