慢性阻塞性肺疾病大鼠中磷酸化蛋白激酶B与γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶的表达研究

目的通过观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）与磷酸化蛋白激酶B（p-PKB）的表达,研究p-PKB和γ-GCS在COPD中可能的参与机制。方法28只健康雄性Wistar大鼠随机分为COPD组和对照组。采用每日熏香烟和两次气管内注入脂多糖（LPS）法制作COPD大鼠模型。检测肺组织中1-GCS活性,原位杂交检测肺组织中γ-GCS mRNA的表达,免疫组化和Western印迹分析肺组织中γ-GCS与p-PKB蛋白水平。结果γ-GCS活性在COPD组大鼠中明显高于对照组,组间差异有统计学意义（P〈0．05）。原位杂交显示COPD组大鼠支气管、肺泡上皮细胞与小动脉平滑肌细胞γ-GCS mRNA广泛表达,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。COPD组大鼠γ-GCS与p-PKB免疫组化可见肺泡、支气管壁细胞及小血管平滑肌细胞胞浆有较强蛋白阳性信号;图像定量分析显示COPD组γ-GCS与p-PKB蛋白表达高于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot显示,γ—GCS与p-PKB在COPD组蛋白表达高于对照组,且差异有统计学意义（P〈0．05）。SPSS10．0直线相关分析得出p-PKB蛋白表达与γ-GCS活性、mRNA及蛋白表达呈正相关。结论COPD大鼠肺组织1．GCS蛋白和mRNA表达增高,p-PKB蛋白也有相应高表达,提示p-PKB和γ-GCS可能在COPD的发病机制中起作用,且PKB可能参与了γ-GCS的信号转导。     

阻断肾素血管紧张素系统对长期高脂喂养胰岛素抵抗大鼠胰岛UCP2和GCLC表达的影响

目的： 观察长期高脂喂养的胰岛素抵抗大鼠胰岛氧化应激机制以及阻断肾素血管紧张素系统（RAS）对其的影响,探讨RAS与氧化应激、糖代谢之间的关系。方法: 雄性Wistar大鼠分为正常饲养组（NC组）、高脂饲养组（HF组）、高脂+培哚普利组（FP组）、高脂+替米沙坦组（FM组）,后2组大鼠喂养16周后分别以培哚普利2 mg·kg-1·d-1（FP组,n=15）和替米沙坦10 mg·kg-1·d-1（FM组,n=15）干预,8周后行正常血糖高胰岛素钳夹试验评估外周胰岛素抵抗程度,行静脉葡萄糖耐量试验检测胰岛β细胞功能 ,以RT-PCR检测γ谷氨酰半胱氨酸连接酶的催化亚基（GCLC）的表达,以免疫组化法检测胰岛局部线粒体解偶联蛋白2（UCP2）水平,以比色法测定胰腺组织丙二醛（MDA）的含量。结果: 与正常饲养组相比,高脂饲养组的葡萄糖输注率（GIR）降低了31.8%,胰岛GCLC表达降低了31.5% ,局部UCP2相对浓度增加了17.0%,胰腺MDA含量增加了0.46倍（均P<0.01）,0-10 min胰岛素曲线下面积（AUC10-10）为(271.8±33.8)vs（282.7±29.8）mIU·L-1·min-1,糖刺激后早期胰岛素分泌降低,但无显著差异;培哚普利或替米沙坦干预后,GIR分别增加了27.8%和30.8%,胰岛GCLC表达分别增加了26.6%和26.6% ,局部UCP2相对浓度分别下降了13.0%和15.6%,胰腺MDA含量分别下降了18%和20%（均P<0.01）,FP、FM组之间无显著差异。结论: 阻断RAS可以改善高脂喂养大鼠的胰岛素抵抗和胰岛β细胞分泌功能,其机制可能为通过下调胰岛局部UCP2和上调GCLC的表达,减轻氧化应激损伤,从而保护胰岛β细胞功能。     

血清谷氨酰转移酶检测在临床疾病诊断中的意义

目的探讨血清γ-谷氨酰转移酶在临床疾病诊断巾的意义。方法采用速率法测定肝硬化组78例,冠心病组73例,肝癌组38例,胆石症组34例,糖尿病组38例,脑梗阻组54例,肾功能衰竭组27例;正常对照组50例血清GGT水平。结果肝硬化组、冠心病组、肝癌组、胆石症组、糖尿病组、脑梗阻组、肾功能衰竭组GGT水平与正常对照组有显著性差异（P〈0．05）。结论血清GGT不仅作为肝胆疾病的诊断及鉴别诊断指标,在其它许多疾病也有一定的诊断价值。     

低剂量内毒素预处理保护内毒素介导的小鼠急性肝损伤及其机理探讨

目的研究低剂量内毒素(LPS)预处理对LPS介导的小鼠急性肝损伤的影响。方法LPS通过腹腔注射小鼠;丁基亚磺酰亚胺（BSO）处理耗尽小鼠肝脏谷胱苷肽(GSH)含量;血浆天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定用全自动生化分析仪;基因表达测定采用RT PCR。结果① 低剂量LPS预处理降低高剂量LPS诱导的小鼠肝功能损伤;② 低剂量LPS刺激肝脏GSH含量升高;LPS预处理组GSH水平显著高于高剂量LPS处理组;③ BSO预处理后,LPS预处理组与高剂量LPS组的血浆ALT和AST水平没有差别;④ LPS处理导致转硫途径关键酶——胱硫醚β合酶活性以及GSH合成途径关键酶——γ 谷氨酰半胱氨酸合成酶表达升高。结论低剂量LPS通过上调肝组织中GSH合成相关基因表达,增加GSH的含量,减轻高剂量LPS诱导的肝脏损伤。     

PGC-1α与Nrf2协同调控γ-谷氨酰半胱氨酸合酶对大鼠COPD的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（PGC-1α）和红系衍生的核因子相关因子2（Nrf2）对γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）表达的调控及其在COPD中的作用和意义。方法24只大鼠随机分为COPD组和对照组。COPD组用每日熏香烟和两次气管内滴入脂多糖（LPS）的方法制作COPD模型。观察大鼠的肺组织病理学改变,检测肺功能指标;应用免疫组化、Westernblot、原位杂交和逆转录-聚合酶链反应检测肺组织中PGC-1α、Nrf2和γ-GCS的蛋白及mRNA表达情况。结果COPD组的肺功能指标（FEV0.3、FEV0.3／FVC、PEF）和光镜下COPD组肺组织病理变化符合COPD的特征性改变。PGC-1α、Nrf2mRNA在两组大鼠肺组织中均有表达,且与γ-GCSmRNA的表达部位基本一致;PGC-1α、γ-GCS蛋白及mRNA表达在COPD组均显著高于对照组（P均〈0．05）;Nrf2蛋白表达在COPD组较对照组显著增高（P〈0．01）,而Nrf2mRNA在两组表达无明显差异（P〈0．05）。相关性分析显示PGC-1α蛋白与Nrf2蛋白及mRNA表达均呈正相关（r值分别为0．775和0．515,P均〈0．01）,PGC-1α、Nrf2蛋白与γ-GCS蛋白（r值分别为0．531和0．575,P均〈0．01）及mRNA表达（r值分别为0．616和0．634,P〈均0．01）均呈正相关。结论PGC-1α可能作为Nrf2的辅激活因子,通过辅助激活Nrf2,上调γ-GCS的基因表达;PGC-1α和Nrf2可能通过一个共同通路协同上调γ-GCS的基因表达,从而改善COPD的氧化／抗氧化失衡。     

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、转化生长因子β1在吸烟大鼠肺组织中的表达

目的 观察不同吸烟时间大鼠支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞和肺组织中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)和转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA及其蛋白的表达水平以及二者的相关性,探讨TGF-β1在吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)氧化/抗氧化失衡中的作用.方法 自制大鼠实验性被动吸烟装置,建立吸烟引起COPD的动物模型,将40只大鼠随机分为不吸烟组、吸烟1月组、吸烟2月组、吸烟3月组,每组各10只.分别采用免疫组织化学法、免疫细胞化学法和原位杂交半定量技术检测支气管上皮细胞及肺泡巨噬细胞中γ-GCSh(重链亚单位)和TGF-131 mRNA及其蛋白的表达水平.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测肺组织匀浆中γ-GCSh和TGF-β1 mRNA的表达水平.结果 吸烟3月组大鼠出现了肺气肿的病理改变.①吸烟1月、2月和3月组大鼠支气管上皮细胞γ-GCSh和TGF-β1 mRNA及蛋白表达水平、肺泡巨噬细胞γ-GCSh和TGF-β1蛋白表达水平明显高于不吸烟组(均P<0.01).②吸烟1月、2月和3月组大鼠肺组织匀浆中γ-GC-Sh和TGF-β1 mRNA表达水平明显高于不吸烟组(均P<0.05).③吸烟1月组和吸烟3月组大鼠支气管上皮细胞γ-GCShmRNA及其蛋白的表达水平与TGF-β1表达水平呈直线正相关,肺泡巨噬细胞γ-GCSh蛋白表达水平与TGF-β1表达呈直线正相关;吸烟3月组肺组织匀浆中γ-GCSh mRNA表达水平与TGF-β1表达呈直线正相关. 结论 随着吸烟时间的延长,支气管肺组织中γ-GCS和TGF-β1的mRNA及其蛋白表达水平逐渐增高,并且二者呈正相关;提示TGF-β1在吸烟所致COPD氧化/抗氧化失衡中可能发挥一定的作用.     

脂易消治疗非酒精性脂肪肝的临床研究

目的 在前期临床观察脂易消对非酒精性脂肪肝临床疗效的基础上[1,2],进一步研究验证脂易消对非酒精性脂肪肝的确切疗效.方法 选择非酒精性脂肪肝患者251例,按3:2比例随机分为治疗组150例和对照组101例.治疗组150例服用脂易消治疗,对照组101例服用易善复治疗.观察两组治疗后的总有效率、临床症状改善程度、B超体征改善程度、肝功能及血脂的变化.结果 总有效率治疗组明显优于对照组;临床症状改善程度经治疗后两组均有明显改善,组间比较治疗组明显优于对照组;B超体征改善程度经治疗后,两组体征均有较明显的改善,组间比较无显著性差异;肝功能检查谷丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和谷氨酰转移酶(Υ-GT),两组患者均较治疗前明显改善,治疗前后比较有显著性差异,组问比较无显著性差异;总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)较治疗前显著降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-ch)较治疗前显著升高,治疗前后比较差异有显著性,其中TG与对照组比较还有组问差异显著性.结论 脂易消治疗非酒精性脂肪肝疗效显著,能有效改善临床症状及体征,明显改善肝功能,降低血脂.其疗效与易善复相当,某些方面优于易善复.     

分次小剂量顺铂联合化疗对胃癌患者肾功能的影响

背景与目的:大剂量顺铂化疗对肾功能的损害已有共识,但小剂量的顺铂化疗对肾功能的影响还有待进一步考证,本研究旨在观察分次小剂量顺铂为主的联合化疗方案对胃癌患者肾功能的影响.方法:31例胃癌患者均采用分次小剂量顺铂(20 mg/m2,第1～3天)联合氟尿嘧啶、表阿霉素静脉化疗,于化疗前至化疗第14天,隔日查尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)、γ-谷氨酰转酞酶(gamma-glutamyltransferase,γ-GT)及尿常规,化疗第7天及第14天查血肌酐及血尿素氮.结果:31例患者中有13例在化疗前各项检查指标均正常,而化疗后各项指标正常者仅1例.18例化疗前有1项或多项指标异常,多为尿NAG、γ-GT增高,两者在化疗第4天明显增高,2周左右仍未降至正常水平;而血肌酐及尿素氮无明显变化.结论:分次小剂量顺铂联合化疗对患者肾功能仍有一定影响,且持续时间较长.     

熊去氧胆酸联合消炎利胆片对肝移植术后γ-谷氨酰转肽酶的影响

肝移植术后由于各种已知及未知原因常出现γ-谷氨酰转移酶（GGT）持续不降或升高,这种GGT的升高可为单独升高,亦可伴随其它肝酶及胆红素升高。对后两者一般可通过对因治疗及保肝降酶、退黄药物使其降至正常,而对于GGT,目前尚无有效降低之药物,2002年5月-2006年6月期间,我们尝试应用熊去氧胆酸（优思弗）联合消炎利胆片治疗32例肝移植术后GGT持续升高的患者,效果良好,现报告如下。     

妊高症患者尿γ-GT、NAG的检测及应用

γ-谷氨酰基转移酶 ( γ- GT)和 N-乙酰 - β- D氨基葡萄糖苷酶 ( NAG)在尿中活性的升高通常可较敏感地反映肾功能损害的程度。我们检测正常妊娠组及不同程度妊高症组尿 γ- GT、NAG活性的变化 ,探讨两种酶与妊高症以及病情变化的关系。对象和方法一、检测对象　 97例妊高症患者及 56例正常妊娠妇女均为 1 997年 1 0月至 1 999年 7月来我院就诊妇女。其中重度妊高症患者 41例 ,中度妊高症患者 30例 ,轻度妊高症患者 2 6例 ,年龄2 2～ 2 8岁 ,孕期 2 7～ 38周 ;诊断标准参见全国统编教材《妇产科学》第 4版[1] 。所有妊娠妇女既往均无肾…