单波长荧光分光光度计测定细胞内Ca^2＋浓度的方法探索

在使用单波长荧光分光光度计测定细胞内游离钙浓度时，通过快速（４～６ｓ）手动转换激发波长（ＥＸ），分别测定ＥＸ３４０和３８０ｎｍ时的荧光强度变化，并计算出３４０ｎｍ与３８０ｎｍ时的荧光强度比率（Ｒ），然后也采用双波长荧光分光光度计测定细胞内Ｃａ２＋浓度的计算公式计算细胞内游离钙浓度。结果显示单波长荧光分光光度计按比例法测得的细胞内游离Ｃａ２＋浓度与使用双波长荧光分光光度计测得的结果相似。     

用DIG标记的寡核苷酸基因探针杂交技术进行人轮状病毒VP7G血清型鉴定

目的：建立用地高辛（Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ，ＤＩＧ）标记的寡核苷酸基因探针鉴定Ａ群轮状病毒ＶＰ７Ｇ血清型的分子杂交技术，并应用该技术研究河南Ａ群轮状病毒的Ｇ血清型分布。方法：根据轮状病毒编码糖蛋白ＶＰ７的基因核苷酸序列，选择该基因高保守区序列中与ＶＰ７Ｇ血清型高度相关的核苷酸片段，人工合成，并用ＤＩＧ标记。在优选的杂交条件下进行杂交：结果：①Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３和Ｇ４四种Ｇ血清型特异性寡核苷酸探针只与同血清型的轮状病毒参考毒株杂交，无交叉杂交现象。灵敏度和特异性达到放射性同位素３２Ｐ标记的水平。②１８８份经ＰＡＧＥ确定的轮状病毒阳性标本中，７９份（４２．０％）、３５份（１８．６％）、１５份（７．９％）分别与Ｇ１、Ｇ２或Ｇ３型探针杂交；未检出Ｇ４型；５６份（２９．８％）未能分型；３份分型特殊。结论：该Ｇ血清型分型技术具有高度特异性和灵敏度     

ATP测定技术在尘肺研究中的应用

细胞的ATP能反映细胞代谢,是最灵敏的粉尘致巨噬细胞的细胞毒性指标。本实验采用沸水抽提法提取ATP,实验结果表明:沸水抽提法简单、可靠,而且测得的ATP含量较常用的酸提法提高1～2倍;用沸水抽提法,通过荧光酶测定仪检测肺泡巨噬细胞中的ATP含量,能为尘肺研究提供新的手段。     

高效液相色谱-荧光检测法测定血浆总同型半胱氨酸浓度

目的 :建立测定血浆总同型半胱氨酸的高效液相色谱 (HPLC) 荧光检测分析方法。方法 :用TCEP将血浆中各种形式的同型半胱氨酸 (Hcy)还原成总同型半胱氨酸 (tHcy) ,以光胺作内标 ,巯基特异性荧光衍生剂SBD F对Hcy ,胱胺等含巯基化合物进行柱前衍生 ,然后行HPLC 荧光检测。结果 :本方法所检测的Hcy浓度在 2 .5～ 16 0 μmol·L- 1 范围具有良好的线性关系 (r =0 .9975 ) ,Hcy最低检测限 0 .6 2 5 μmol·L- 1 ,批内变异小于 5 .5 % ,批间变异小于 9.0 % ,平均回收率 98.87%。结论 :本法简便、灵敏、精确、稳定     

LightCycler实时监测PCR定量分析血清HBV DNA

目的 检验LightCycler实时监测PCR（real-time detection PCR,RTD-PCR)对血清中HBV DNA定量检测的灵敏性和可重复性，探讨HBV血清标志物与HBV DNA定量的关系。方法 HBV定量按深圳匹基公司乙肝PCR荧光检测试剂盒使用说明，对乙肝标志物已明确的773例血清中HBV DNA定量结果进行统计分析。结果 实时监测PCR对血清中HBV DNA定量检测的灵敏性高，可检测低至1000拷贝／ml血清；可重复性好，批间误差＜20％；各种标志物类型的血清HBV DNA含量分布情况表明，HBV血清标志物中HBeAg与HBV DNA含量有明显的关系，一般HBeAg阳性血清HBV DNA含量较高，但也有相当一部分例外。结论 LightCycler实时监测PCR对血清中HBV DNA定量检测灵敏性高可重复性好；仅根据HBV血清标志物往往不能确定乙肝患者HBV DNA复制水平的高低，HBV DNA定量检测具有十分重要的临床意义。     

眼底荧光血管造影中按摩内关与合谷穴对恶心和呕吐的影响

观察按摩内关和合谷穴对上有底荧光血管造影中恶心和呕吐的影响。眼底荧光血管造影中发生恶心和呕吐的６０例患者随机分为治疗组和对照组。治疗组按摩一侧或双侧内关穴和合谷穴；对照组未进行治疗，在发生恶心患者中，治疗组３０例中发生哎者２例；对照组发生呕吐者９例，两组的发生率有显著差异     

家兔缺血与再灌流肾内脂质过氧化物含量的变化

本研究发现:家兔缺血60min(未再灌流)肾皮质和髓质内,脂质过氧化物含量均显著降低;缺血60min再灌流15min的肾皮质和髓质内,脂质过氧化物含量均显著增加。实验提示:缺血再灌流贤内氧自由基“爆发性”生成所引发的脂质过氧化可能是肾缺血性损伤的重要机制之一。     

人类线粒体DNA多态区荧光标记序列分析的研究及其在法庭科学中的应用

人类线粒体ＤＮＡ多态区荧光标记序列分析的研究及其在法庭科学中的应用张纯斌周静倪锦堂李伯龄（公安部第二研究所）ＤＮＡ分析技术在法庭科学中的应用是一个重要的分支，以往的ＤＮＡ个体识别与亲子关系鉴定分析技术主要有对存在于细胞核中的ＤＮＡ做各种不同方式的分析...     

金属离子与人红细胞膜相互作用的顺磁和荧光光谱研究

研究金属离子与细胞膜的相互作用与金属离子性质的关系。