重组人角质细胞生长因子-2基因的克隆和表达

目的：克隆人KGF-2基因，并在大肠杆菌中进行表达。方法：通过PCR扩增，从人胎肝cDNA文库中获得编码人KGF-2的cDNA，并将其分别克隆入pBV220，pLEX和pGEX4T-1质粒中，研究其在不同表达质粒和大肠杆菌中的表达情况。结果：克隆得到的KGF-2cDNA经测序证明与文献报道的序列一致。将其克隆于pBV220质粒中，在E．coli JM109中表达量相对最高，约占茵体总蛋白的4％；克隆于pLEX质粒中，在E．coli G1724中的表达量约占全茵总蛋白的5％；克隆于pGEX4T-1中，在E．coli JM109中的表达量可占到全茵总蛋白的20％。结论：采用GST融合蛋白表达质粒pGEX4T-1对KGF-2进行表达，较pBV220和pLEX具有明显优势，能实现对KGF-2的高效表达，为进一步的功能研究奠定了基础。     

核因子-κB与急性胰腺炎(文献综述)

核因子 - κB(nuclear factor- kappa B,NF- κB)是一种具有基因转录调节作用的核蛋白 ,调控多种炎性细胞因子的表达。它在急性胰腺炎中的作用日益引起人们的关注。本文就 NF- κB的构成、活化途径、在急性胰腺炎中所起的作用 ,及其抑制剂的治疗价值等研究进展作一综述     

核心蛋白聚糖在脏器纤维化防治中的应用前景

核心蛋白聚糖为一富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖 ,是细胞外基质的组成成分 ,与胶原纤维紧密相连 ,广泛分布于人和动物的肌腱、皮肤、骨、软骨、脐带、韧带及角膜等各种组织。近十几年的研究表明 ,它可与TGF β结合 ,并中和TGF β的所有生物学活性 ,因此在TGF β过度表达引起的脏器纤维化的防治中有着广泛的应用前景     

Ⅰ型糖尿病血清α-醋酸萘酯酶同工酶出现变异谱带的初步分析

目的 :探讨血清α-醋酸萘酯酶 (α-ANE)及其同工酶在不同类型糖尿病的实用价值。方法 :采用琼脂糖凝胶电泳法分离α-ANE同工酶。结果 : 型糖尿病和胰腺炎 ,谱形基本正常 ; 型糖尿病谱形异常 ,多分离出 1～ 2条慢速的谱带 ,分别 E4和E5 ,并按其比例和色度 ,可分为 3种表现型 E4( )、E5 ( )、E4+ E5 ( ) ,相对迁移率为 0 .2 5 4和 0 .182。相对电泳位置 :β和β/pre-γ之间。结论 :E4和 E5带经过神经胺酸酶处理证明属脱 SA带 ,初步认定 E4带可能是 型糖尿病患者的一种特殊酶学特征 ,E5带在部分肝癌患者也有发现。     

鸢尾中鸢尾酮的鉴定及含量测定

目的 建立鸢尾中鸢尾酮的鉴定和分析方法。方法 采用气相色谱-质谱法鉴定了鸢尾酮的3种异构体，并采用气相色谱法测定了鸢尾浸膏中鸢尾酮的含量。结果 根据质谱裂解规律鉴定了3种鸢尾酮的异构体：α-、β-、γ-鸢尾酮，并且鸢尾浸膏中主要含γ-鸢尾酮。两批鸢尾中鸢尾酮的质量分数分别为687、238μg/g(n=6)，质量分数差异较大。结论 采用气相色谱一质谱法和气相色谱法分析鸢尾中鸢尾酮，方法高效、准确，分析时间适中。     

代谢综合征患者胰岛素敏感性和β细胞功能研究

目的研究单纯性肥胖、单纯性高血压、肥胖伴糖耐量减退(IGT)、高血压伴IGT和肥胖2型糖尿病(T2DM)患者的胰岛素敏感性及早期胰岛β细胞功能. 方法用减少样本数的Bergman最小模型技术结合多样本静脉葡萄糖耐量(FSIGT)试验分别测定各类受试组患者的胰岛素敏感性指数(SI)、葡萄糖自身代谢效能(SG),并计算FSIGT试验中推注葡萄糖后胰岛素分泌第一时相时的胰岛素峰值与基础值之差(Ip-b),进而评估各组人群早期胰岛β细胞的胰岛素分泌功能. 结果1.正常组、单纯性肥胖组及单纯性高血压组间的SG无显著性差异,但均明显高于肥胖伴IGT、高血压伴IGT和T2DM组,后三组间的SG无显著差异.2.正常组的SI显著高于其他病理性5组.3.与正常组相比,单纯性肥胖组、高血压伴IGT组Ip-b值明显升高,肥胖伴IGT和T2DM组Ip-b值明显降低. 结论胰岛早期β细胞分泌功能在单纯性高血压组正常,在单纯性肥胖、高血压伴IGT组处于代偿性亢进状态,而在肥胖的T2DM及肥胖伴IGT患者,机体早期即刻葡萄糖负荷后胰岛β细胞分泌胰岛素功能已经不足,以前者更为严重,甚至缺如.     

Ⅳ型胶原、MMP-9和TIMP-1基因表达在早期放射性肺纤维化启动中的作用

目的 观察早期放射性肺纤维化启动过程中Ⅳ型胶原、明胶酶B(MMP-9)、金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)的基因表达特点,探讨其在放射性肺损伤中的作用.方法 C57小鼠于20Gy 60Co γ射线全肺照射后照射后1、2、4周活杀,每个时间点分别配有相应的正常对照组.RT-PCR检测Ⅳ型胶原、MMP-9、TIMP-1 mRNA水平的变化,并应用图像分析仪测定电泳条带的平均光密度值.结果 Ⅳ型胶原mRNA于照射后1周开始增高(0.202),4周达高峰(0.340);MMP-9 mRNA于照射后1周即有明显增高并且达到高峰(0.730),于第2周开始降低(0.592);TIMP-1 mRNA于照射后1周开始轻度增加(0.987),4周时达高峰(2.027).结论 60Co γ射线可刺激Ⅳ型胶原、MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达,但随照射后时间的延长呈现不同的变化趋势,它们之间的相互制约导致了放射性肺损伤早期的组织重建,与后来形成的肺纤维化有必然的内在联系.     

牛皮癣并发骨髓重度受抑患者与急性再生障碍性贫血患者血液形态学的比较

1 资料与方法 1999-2002年本院血液内科收治的以全血细胞减少为主要症状的12例患者,其共同特点是均患有牛皮癣,而且此次住院前都有在个体诊所服中药史,诊断为药物所致造成的骨髓抑制,后经合理治疗痊愈,其中男7例,女5例.另外收集20例急性再障患者.分别在入院治疗2周左右时采集骨髓进行涂片、骨髓活检;末梢血采集进行常规涂片,瑞姬氏染色.选择取材、涂片、染色良好的骨髓片、血片,在1000×下进行血细胞分类计数;另外采末梢血进行血常规检测.     

生物素标记的免疫电镜技术对α-平滑肌肌动蛋白在乳腺癌新生血管表达研究中的应用

目的 :探讨生物素标记的免疫电镜技术在观察周细胞的形态特点及确定α-平滑肌肌动蛋白在乳腺癌组织中表达部位的应用。方法 :应用免疫电镜技术检测乳腺癌中 α-平滑肌肌动蛋白的表达。结果 :周细胞紧贴内皮细胞外侧 ,周细胞胞质中可见散布大量圆形黑色颗粒 ,而内皮细胞中见不到这些黑色颗粒。结论 :免疫电镜技术可作为蛋白精确定位的有效手段 ,α-平滑肌肌动蛋白可作为周细跑的标记物