心力衰竭患儿血浆心房利钠肽水平变化及临床意义

目的:探讨心力衰竭患儿血浆心房利钠肽(ANP)的变化及其临床意义。方法:心力衰竭患儿34例,分成3个亚组,Ⅰ度心衰组14例,Ⅱ度心衰组13例,Ⅲ度心衰组7例。分别测定治疗前后血浆ANP水平、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,并作超声心动图检查,观察血浆ANP水平与左室射血分数(LVEF)之间的关系。选取健康儿童20例作为对照组,以了解小儿心力衰竭时ANP、CK-MB变化情况。结果(:1)心力衰竭组ANP、CK-MB水平均明显高于正常对照组,随着心力衰竭程度的加重,血浆ANP水平逐渐增高,与心衰程度呈正相关,与LVEF呈负相关。而CK-MB与心衰程度、LVEF之间均没有相关性。(2)心功能好转后ANP、CK-MB水平均明显下降(P<0.01),LVEF明显增高(P<0.01)。结论:心力衰竭时,血浆ANP水平明显增高,并且与心衰程度、LVEF有较好的关联。     

应用噬菌体随机肽库筛选结肠癌患者血清中的肿瘤标记物的研究

目的用噬菌体随机呔库技术对结肠癌病人血清进行差异性筛选。以获得特异性的肿瘤标志物。方法用噬菌体随机十二肽库与结肠癌病人血清和正常人血清进行淘选．经过几轮吸附和洗脱得到重组噬菌体库。采用ELISA方法进行单克隆鉴定。挑选20个阳性范隆测序获得相同的序列：19B（GSMSRYVRWYIP）。人工合成小肽19B的寡核苷酸序列，并将其与原核表达载体PGEX-4T—I连接。转化大肠杆菌BI-21（DF3），诱导融合蛋白的表达。以Glutathione Sepharose 4B进行纯化。结果用纯化的蛋白包被抗原板检测24例正常人血清和24例结肠癌病人的血清．证实小肽在正常人血清和结肠癌病人血清间存在差异。结论小肽19B有可能作为检测结肠癌的生物标志物。     

过氧化物酶增生物激活受体γ激动剂对肝星状细胞α1(I)胶原表达的影响

目的观察过氧化物酶增生物激活受体γ(PPARγ)激动剂15d-PGJ2对肝星状细胞株(HSC-T6)前胶原α1(Ⅰ)表达的影响,以进一步探讨PPARγ在肝纤维化进程中的作用机制。方法体外培养HSC-T6细胞,取对数生长期的细胞分为空白对照组、TGFβ-对照组和15d-PGJ2处理组,TGF-β对照组和15d-PGJ2处理组均给予TGF-β因子(终浓度3 ng/ml)共孵育6 h,15d-PGJ2处理组再用1、2、3μmol/L的PPARγ激动剂15d-PGJ2作用24 h。应用RT-PCR、Westernblot方法观察分析各组间肝星状细胞PPARγ、前胶原α1(Ⅰ)基因表达的变化。结果15d-PGJ2能够显著上调PPARγmRNA和蛋白的表达水平,15d-PGJ2处理组的相对吸光度值较空白对照明显升高(P<0.05),而TGFβ-对照组与空白对照组差异无显著性意义(P>0.05)。在TGFβ-刺激下,TGF-β对照组前胶原α1(Ⅰ)mRNA水平均升高,同空白对照组相比差异有显著性意义(P<0.05);15d-PGJ2处理组细胞前胶原α1(Ⅰ)mRNA水平与空白对照组相比差异无显著性意义(P>0.05),但与TGFβ-对照组相比,其表达明显受抑制(P<0.05)。结论PPARγ激动剂15d-PGJ2能够通过上调PPARγ表达而抑制前胶原α1(Ⅰ)转录,提示PPARγ可抑制肝纤维化的发生发展。     

绝经后妇女骨密度与Ⅰ型胶原α1链及α2链基因多态性相关性研究

目的探讨人Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)及α2链(COL1A2)基因型与绝经后妇女骨密度相互关系.方法选取年龄≥42岁绝经后妇女(自然绝经≥2年)231例,采用双能X线吸收法(DEXA)测定其全身、腰椎2～4(L2～4)、股骨颈(Neck)、Ward'三角和大转子区等部位的骨密度(BMD)值,并采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测外周血白细胞基因组Ⅰ型胶原α1链及α2链基因型.结果231例受试对象中,Ⅰ型胶原α1链PCR扩增产物未发现ACCB7I酶切位点,Sp Ⅰ结合位点不存在G→T突变,Ⅰ型胶原α1链基因型均为SS型;Ⅰ型胶原α2链基因型分别为EE型113例,Ee型91例,ee型27例(分别占48.9%、39.4%、11.7%),等位基因频率E和e各为68.6%、31.4%.基因型分布符合Hardy-weinberg定律.携带EE基因型的个体比Ee基因型和ee基因型个体的骨密度值为低,但只在腰椎侧位(L2-L4)、股骨颈(Neck)、大转子(Troch)、Ward's三角(Ward's)等部位的骨密度值EE基因型比Ee基因型携带者明显降低(P＜0.05).结论广州地区绝经后妇女COL1A1 Sp Ⅰ结合位点不存在G→T突变.COL1A2基因EE型个体较Ee基因型及ee基因个体的骨密度值低,绝经后妇女骨密度与COL1A2基因多态性存在一定相关性.     

肺动脉高压专题继续教育讲座(六)肺血管重构

5.3成纤维细胞：对缺氧性肺动脉高压大鼠模型的研究发现，缺氧2-3天时，主肺动脉外壁的成纤维细胞增殖和肥厚达到第一个高峰，同时该部位的Ⅰ型胶原与弹性蛋白的沉积也明显增多。在外周的肌型小肺动脉，成纤维细胞的增殖以及细胞外基质合成也明显增多。肺动脉外膜的Ⅰ型胶原与弹性蛋白沉积增多是肺动脉高压时管腔狭窄、血管扩张能力下降的一个重要原因。     

肠易激综合征和胶原性结肠炎患者粪便中炎性标志物的检测

目的：与腹痛及腹部不适症状相关的排便习惯改变的长期反复发作是肠易激综合征（IBS）和胶原性结肠炎（CC）的共有症状。该研究旨在明确IBS和CC患排泄物中能否检测到炎性标志物，并探讨此种检测能否作为一种无创性方式用于这些功能紊乱性疾病的鉴别。材料与方法：采集18例CC患、46例IBS患和20例健康对照（HC）的粪便，经处理后留取上清液，采用免疫法测定嗜酸粒细胞蛋白X（EPX）、髓过氧化物酶（MPO）、纤维蛋白溶酶、白介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果：与IBS组（中位数0．44μg／g，95％CI0．25～1．8；P〈0．001）和HC组（中位数0．46μg／g，95％CI0．21～1．3；P〈0．001）相比，EPX水平在CC组中有所增加（中位数3．81μg／g，95％CI0．47～16．2）。另外，MPO水平在CC组中也有所增加（中位数11．7μg／g，95％CI2．0～124），显高于IBS患组（中位数1．7μg／g，95％CI0．81～5．2；P〈0．01）和HC组（中位数2．5μg／g，95％CI1．1～6．3；P〈0．05）。     

慢性乙型肝炎肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原及MMP1、TIMP1的表达

目的观察慢性乙型肝炎患者肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的沉积以及基质金属蛋白酶1(MMP1)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)的表达,从胶原降解的角度探讨慢性乙型肝炎肝纤维化的发病机制。方法不同纤维化程度慢性乙型肝炎肝组织标本50例,用免疫组化方法检测肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及MMP1、TIMP1的表达。结果随着肝组织纤维化程度的加剧,慢性乙型肝炎患者肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及TIMP1表达显著增加,肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达与TIMP1呈明显正相关。结论慢性乙型肝炎患者肝纤维化的发生与TIMP1增加、间质胶原蛋白的分解降低有关。     

血脑利钠肽在急性呼吸困难鉴别诊断中的价值

目的:探讨床边即时检测血脑利钠肽(BNP)在急性呼吸困难鉴别诊断价值。方法:荧光免疫法测定100例呼吸困难患者血浆BNP,心脏超声测定心脏左室射血分数(EF)。结果:(1)心力衰竭(HF)引起呼吸困难患者血浆BNP水平明显高于非心力衰竭组患者[(635．9±360．1)pg／ml与(54．5±35．7)pg／ml,P<0．01];(2)如以100pg／ml为正常参考值,BNP诊断心力衰竭敏感性为91．8％,特异性为92％;排除心力衰竭的阴性预测价值为92．1％;(3)如以大于500pg／ml为参考值BNP诊断HF特异性为100％。结论:床边即时检测BNP诊断心力衰竭敏感且特异,快速,可作为急性呼吸困难鉴别诊断的一个观察指标。     

重组人类杀菌肽基因在CHO细胞中的表达

目的 检测重组人类杀菌肽基因（BPI）在真核细胞中的表达.方法 采用脂质体转染法将本室构建的pCDNA3.1-BP1500及pCDNA3.1-BPI600重组子导入中国仓鼠卵巢上皮细胞（CHO）,G418筛选出带有重组子的细胞集落,RT-pCR检测BPI在CHO细胞集落中的表达.结果 转染后G418抗性CHO细胞中可检测到BPImRNA的表达.结论 pCDNA3.1-BPI重组子被成功转染至CHO,并得到有效表达.     

微囊藻毒素致毒机理的研究进展

微囊藻毒素是一种单环七肽毒素，主要由微囊藻产生。近年来有许多研究表明微囊藻毒素能诱导细胞凋亡、氧化应激和线粒体功能的改变，并发现凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白家族和P53在其中起重要作用。