Rac1、Cdc42在肿瘤方面的研究

近年来对Rho家族蛋白的研究进展很快,其中以RhoA、Rac1、Cdc42最为人们所关注。这些小分子量G蛋白具有GTP酶活性,参与细胞周期调控和基因转录的调节。在调节细胞骨架、细胞运动、细胞凋亡、细胞恶性转化及肿瘤的浸润、转移等方面发挥重要作用。     

前胡丙素对牛主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨前胡丙素(pra-C)对牛主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的影响 方法:细胞DNA的合成量由~3H-胸腺嘧啶核苷[~3H]TdR)掺入试验测定,应用流式细胞术测定细胞周期,用乳酸脱氢酶活性测定观察药物的毒性.结果:无论有无血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),在0.01μmol/L到10μmol/L浓度范围内,pra-C均可呈浓度依赖性地抑制SMC的增殖,抑制作用主要与阻止细胞进入有丝分裂期有关,而与细胞毒性无关.结论:pra-C能够完全阻断Aug Ⅱ诱导SMC的增殖效应,部分阻止小牛血清诱导的细胞分裂,这对于血管增生性疾病的防治有重要意义.     

亚砷酸对肝癌细胞增殖及PCNA,c-Myc蛋白表达的影响

目的:探讨亚砷酸对人肝癌BEL-7402细胞增殖及增殖细胞核抗原(PCNA),c-Myc蛋白表达的影响.方法:应用四氮唑盐(MTT)比色法、细胞群体倍增时间(TD)、细胞集落形成试验观察亚砷酸对BEL-7402细胞增殖的影响,免疫组织化学法观察亚砷酸对BEL-7402细胞PCNA,c-Myc蛋白表达的影响.结果:亚砷酸处理后BEL-7402细胞生长抑制率上升(2.0,4.0,8.0 μmol/L的亚砷酸作用24,48,72 h后抑制率分别为27.13%,42.65%,47.74%;35.52%,53.24%,60.41%;50.61%,65.88%,70.81%;与对照组比较P＜0.05),TD逐渐延长[2.0,4.0,8.0 μmol/L的亚砷酸作用48h后TD分别为(24.68±3.99);(32.42±4.46);(36.95±8.91);与对照组比较P＜0.05及P＜0.01],集落形成率下降(0,8.0 μmol/L的亚砷酸作用7d后集落形成率分别为46.00%,18.80%;P＜0.05),免疫组化结果显示亚砷酸处理后的BEL-7402细胞PCNA,c-Myc蛋白的表达明显减弱.结论:亚砷酸能抑制BEL-7402细胞增殖,其机制可能与PCNA,c-Myc蛋白的表达下调有关.     

CDC6在成人急性白血病中的表达与临床意义

目的：探讨细胞分裂周期蛋白6（Cell Division Cycle6，CDC6）在急性白血病中的异常表达及其临床意义。方法：以CDC6 mRNA为分子标志物，应用巢式PCR技术，分别检测未缓解及完全缓解的急性白血病患者和非肿瘤患者外周血待测基因的表达。结果：标志基因CDC6阳性表达率分别为，对照组27．66％，急性白血病完全缓解组56．25％，急性白血病未缓解组100％；CDC6在对照组的阳性表达率显著低于其它各组（P〈0．05）；在急性白血病未缓解组的表达率显著高于急性白血病完全缓解组（P〈0．05）。结论：CDC6的异常高表达与急性白血病细胞增殖有关．可作为成人急性白血病病情监测的分子生物学指标。     

抑制Src酪氨酸激酶对非小细胞肺癌细胞增殖的影响

目的探讨抑制Src酪氨酸激酶对非小细胞肺癌(non-smalllungcancer,NSCLC)体内外增殖的影响。方法Westernblot和免疫沉淀法检测Src蛋白在NSCLC细胞株中的表达和磷酸化情况;MTT法检测抑制Src酪氨酸激酶活化对NSCLC细胞体外增殖的影响;采用雄性严重联合免疫缺陷(severecombinedimmunitydeficiency,SCID)小鼠,建立肺腺癌PC-9和A549细胞诱导的皮下肿瘤动物模型,研究抑制Src酪氨酸激酶活化对皮下肿瘤增生的影响。结果NSCLC细胞株中Src蛋白明显活化而没有过度表达。Src酪氨酸激酶抑制剂对NSCLC细胞株中Src蛋白的自主磷酸化呈现剂量依赖的抑制作用。亚微摩尔Src酪氨酸激酶抑制剂(<3μmol/L)对PC-9和A549细胞株体外增生表现出剂量依赖性抑制作用,P<0·05。3μmol/LSrc酪氨酸激酶抑制剂也能够显著抑制H226细胞增生,P<0·01。在PC-9细胞诱导的皮下肿瘤模型中,口服Src酪氨酸激酶抑制剂2周后,10和50mg/(kg·d)治疗组对皮下肿瘤体积抑制率分别为73·28%和93·4%,P<0·001。在A549细胞诱导的皮下肿瘤模型中,50mg/(kg·d)治疗3周后差异有统计学意义,抑制率维持在39·4%,P<0·05。结论抑制Src酪氨酸激酶活化能够抑制NSCLC细胞体内外增殖。     

凋亡抑制因子Survivin与肿瘤诊治的研究进展

Survivin属凋亡抑制蛋白家族新成员，具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的双重功能；Survivin是肿瘤特异性凋亡抑制因子，高表达于多种肿瘤组织而在正常成人组织中未见表达。研究表明，Survivin在肿瘤的发生、发展过程中起关键作用，是估计肿瘤预后和复发的重要指标。Survivin还参与血管形成过程。近来，Survivin已成为肿瘤诊断、治疗的新靶点。     

佛波酯对食管癌EC9706细胞NDRG_1表达及细胞增殖影响的研究

目的:探讨12-氧-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA)作用于食管癌细胞EC9706后,对NDRG1mRNA表达、细胞增殖、细胞周期的影响。方法:采用50nmol/L的TPA作用于EC9706细胞,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期的变化,原位杂交法检测NDRG1mRNA水平。结果:TPA能上调NDRG1mRNA水平,抑制EC9706细胞增殖,细胞周期发生G1→S期阻滞。结论:TPA可能通过上调NDRG1mRNA的表达而抑制EC9706增殖,促进其分化。     

EB病毒感染对人胃上皮细胞GES-1增殖的影响

目的:探讨EB病毒感染人胃上皮细胞GES-1后对GES-1增殖的影响。方法:用携带新霉素抗性(NEOr)基因的重组EBV以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,同时以正常人胃上皮细胞GES-1为对照。经G418筛选出EBV感染阳性克隆,进行细胞形态学检测,并采用免疫组织化学染色法测定EBNA1的表达以鉴定EBV感染细胞克隆。对上述细胞用细胞计数法及MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术对细胞周期进行分析。结果:感染EBV的GES-1细胞大部分为EBNA1表达阳性,通过G418筛选,获得了稳定的EBV感染细胞克隆。EBV感染组细胞体积变大,核浆比增加。细胞计数法及MTT法绘制细胞生长曲线显示细胞增殖速度明显加快。流式细胞分析结果显示EBV感染组细胞S期延长。结论:EBV感染后使GES-1细胞稳定且高表达EBNA1,并且能够促进GES-1细胞的增殖。     

甲氧滴滴涕对小鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨甲氧滴滴涕(MXC)对小鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法:MTT法测定卵巢颗粒细胞在MXC作用后的细胞活力(A值);流式细胞技术检测细胞凋亡变化;电镜观察细胞的形态学改变等;综合评价MXC对卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。结果:1MTT法测得MXC在(2.5~10.0)μg/ml浓度范围内能明显抑制卵巢颗粒细胞的增殖,并具有浓度依赖性,10.0μg/mlMXC作用36h的卵巢颗粒细胞A值最低;2流式细胞仪检测结果显示5.0,10.0μg/mlMXC处理组卵巢颗粒细胞的凋亡率分别为27.8%和41.7%,明显高于对照组的9.9%(P<0.05);3电镜下可见卵巢颗粒细胞呈典型凋亡样改变。结论:MXC能明显抑制小鼠卵巢颗粒细胞增殖,并具有显著促进颗粒细胞凋亡的作用。     

Iressa抑制胃癌SGC-7901细胞生长的研究

目的:探讨iressa对胃癌SGC.7901细胞增殖,细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:用四氮甲唑蓝(MTT)法检测不同浓度iressa对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测不同浓度iressa对胃癌SGC-7901细胞周期分布和细胞凋亡的影响。结果:在5~20μmol/L浓度范围内,iressa对SGC-7901的生长具有明显的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性。10μmol/L和20μol/L的iressa可以导致SGC-7901细胞Gl期阻滞,并引起细胞凋亡。结论:Iressa可改变SGC-7901细胞周期分布,诱导细胞凋亡,从而抑制细胞增殖。