全程电子病历质量管理的实施

目的随着CPR应用的不断深入，其管理和使用过程中的有关问题逐步暴露出来，如何确保CPR信息准确、安全，保持其原始性、真实性，是电子病历开发、使用者和医院管理者高度重视的课题。在电子病力使用过程中存在的主要问题是程序和电子病历模板设计不完善、智能化程度低、病历内涵和外在质量问题较多(病历的客观真实性受到挑战，病历内容的雷同化现象，存在严重的质量缺陷，病案首页信息不规范，打印质量问题，His网上数据欠准确)、保密设置功能不完善、医一护之间的脱节现象、病历的存储和流通格式有待规范。方法为此需要采取如下措施：不断完善电子病历源程序；建立智能化平台；建立网络模式下新的病案监控手段和管理方式、加强HIS网上数据监控、开发电子病历质量监控软件、健全电子病历的安全防范措施等。结果电子病历质量明显提高。     

结缔组织生长因子的克隆及其真核表达载体的构建

目的结缔组织生长因子(CTGF)在肿瘤发生,胚胎发育、骨折愈合、细胞增殖和分化、血管形成等众多领域都有着重要的作用,对结缔组织生长因子进行克隆及构建其真核表达载体,对其在功能上的进一步研究及应用有积极意义.方法以含有鼠CTGF基因序列的EST克隆为模板,通过PCR的方法克隆出目的基因CTGF,再以分子克隆学的方法将CTGF克隆入真核表达载体pAdTrack-CMV,进一步以PCR、酶切、DNA测序的方法筛选出正确的真核表达质粒.并通过Western-Blotting的方法对质粒的表达功能进行研究.结果 PCR、酶切、DNA测序的方法均证实已经成功克隆获得序列正确的目的基因CTGF,并将CTGF克隆入真核表达载体pAdTrack-CMV.Western-Blotting的结果表明构建的表达CTGF的真核表达载体高表达CTGF蛋白质.结论成功克隆目的基因CTGF并构建其真核表达质粒,证实在蛋白质水平获得了表达.     

纹理分析技术应用于舌象研究的问题与对策

探讨了目前在舌诊纹理研究中需要解决的,如标准模板的制定,加强对正常舌象的研究,避免过度追求舌诊自动化等问题。分析和探讨了成立舌象标准制定专业组来研究制定异常典型舌象的标准模板以及从正常舌象的研究入手进行正常舌象纹理特征的获取与规范的相关问题。认为医生的舌诊评价与仪器的舌图评估应该相互参照,不主张以仪器评估替代医生诊断,采取临床医生参与的半定量评估方法可能是当前舌诊客观化的最佳模式。     

T7启动子介导体外构建Nucleostem in特异性短发夹状干扰RNA

目的体外构建合成针对Nuc leostem in(核干细胞因子,NS)基因的短发夹状干扰RNA(shRNA),用于进一步研究以该基因为靶目标、RNA干扰(RNA interference,RNA i)为手段的白血病基因治疗可行性。方法从Nuc leostem in基因的三个变异体cDNA共同序列中筛选出2个3′端为AA的21个碱基片段作为shRNA合成的对应序列,9个碱基的5′-UCUCUUGAA-3′作为Loop环。以23个碱基的5-′GGATC-CTAATACGACTCACTATA-3′作为T7启动子(T7 Promoter)序列,构建shRNA的体外合成双链DNA模板,一条链5′端无AA,顺序为启动子、shRNA正义信息链、Loop环、shRNA反义信息链,共70个碱基;另一条是该链的互补链,5′端带有AA,共72个碱基。在T7 RNA聚合酶(T7 RNA polym erase)作用下合成shRNA,纯化后通过凝胶电泳比较灰度值确定shRNA浓度;shRNA作用于HL-60细胞,通过观察细胞形态变化和NS-mRNA抑制率验证干扰效果。结果体外合成的两条shRNA电泳无降解和弥散现象,浓度分别为5.24μmol.L-1和3.35μmol.L-1;干扰HL-60细胞48 h后,细胞密度和聚集程度下降,细胞之间大小相差悬殊,经shRNA-NS-2作用的HL-60细胞一部分由圆形变成了梭形并有明显的伪足;与对照组相比NS-mRNA抑制率分别达到37.82%和71.88%。结论体外成功构建和合成了两条针对Nu-c leostem in基因的shRNA,且抑制该基因表达的作用明显,shRNA-NS-2使HL-60细胞形态发生了改变。所合成的shR-NA-NS-2可作为进一步研究该基因和探索白血病的基因治疗的工具。     

真皮"生物模板"对创面愈合中胶原影响的研究

目的探讨真皮"生物模板"对创面愈合中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响.方法采用真皮"生物模板"(同种异体无细胞真皮基质)加自体刃厚皮片复合移植的方法,修复深度烧伤病人切痂后创面,并以单纯自体刃厚皮片移植为对照,分别于术后1、2、3、4周取组织标本,共48例次,采用免疫组化、原位杂交技术和图像分析技术对组织标本中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量和Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达进行检测.结果真皮"生物模板"移植术后1~4周,组织标本中Ⅰ型胶原含量逐渐增加,Ⅰ型前胶原mRNA表达第2、3周达到高峰,然后逐渐降低,真皮"生物模板"试验组和对照组两者之间无显著差异(P＞0.05).组织标本中Ⅲ型胶原含量,随着创面愈合,试验组明显减少,对照组则减少不明显(P＜0.05);同时,试验组Ⅲ型前胶原mRNA的表达在术后1、2周达高峰,随后逐渐降低,而对照组Ⅲ型前胶原mRNA的表达一直在较高水平,且各时相点均高于试验组,两组差异明显(P＜0.05).结论真皮"生物模板"通过减少创面局部Ⅲ型胶原的产生,减少和(或)减轻疤痕增生,改善愈合质量.     

仙台病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

目的建立仙台病毒的RT—PCR方法并应用于常规检测。方法根据仙台病毒（gi：9627219）F蛋白的基因序列，设计Ff和Fr引物，以仙台病毒总RNA逆转录的cDNA为模板扩增出约609bp预期条带；将建立的RT—PCR方法应用于人工感染小鼠和送检细胞样品检测。结果八份感染小鼠样品中全部扩增出约609bp目的条带，16份肿瘤细胞样品有12份扩增出609bp目的条带。结论建立的仙台病毒RT—PCR方法是一种灵敏、快速、特异的方法，能够用于常规检测。     

微创模板法内固定钢板取出术的手术配合

对40例四肢骨折愈合患者术前B超定位钢板,术中利用模板钢板定位取出内固定钢板和螺钉.结果 切口长度仅为原切口长度的1/3～1/2,本组术后当天即可下床活动,12 d后拆线,住院7～16 d,平均10.0 d.随访3～32个月,平均11.0个月,36例手术切口一期愈合;4例二期愈合.提出通过做好术前心理护理,了解新术式及掌握手术流程,密切配合医生手术的要求,迅速、及时做好各种准备,才能为手术顺利进行创造条件,保证手术顺利完成.     

新农合绩效综合评价Excel模板与SPSS程序的研制

[目的]研制新型农村合作医疗（NCMS）绩效综合评价Excel速算活模板与SPSS程序,供县级评分和全省各县市综合评分排序。[方法]按照全国大连培训班定下的10个指标及其方向、权重和参考值,用＂指数法＂标化,研制县级用的Excel速算活模板和SPSS速算程序。[结果]在完整录入14个原始指标数据库的前提下,研制成功的Excel速算模板可马上算得县级评价总分;SPSS速算程序可在几分钟内算得全省各县市的排序结果。[结论]研制成功的新农合绩效Excel速算活模板和SPSS速算程序直观实用,在国内有很大的推广应用价值。     

聚合酶链反应技术应用中的问题

聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术是特异性ＤＮＡ序列体外引物定向酶促技术。经过十多年的发展，此技术渗透了生物学科的各个分支，已在细菌、病毒、遗传基因和肿瘤基因分析等领域广泛应用［１］。可以说，ＰＣＲ技术的发明是分子生物学技术的革命性突破。然而，目前ＰＣＲ技术在应用中尚存在不少问题，现综述如下。１仪器设备不配套或性能不良如没有配置旋涡混合器、ＰＨ计，没有标准的微量加样器和超净工作台，没有合格的紫外透射仪，更重要的是ＰＣＲ热循环仪的性能差。有些ＰＣＲ仪导热元件质量差或仪器上的管孔与反应管不匹配，使导热性能下…     

什么是GeXP技术？

答：GeXP技术是一种全新的基因表达谱定量分析平台。它能够对多至25重的RT—PCR反应产物进行定量分析比较，是多重PCR领域的突破性技术。它巧妙的将多重PCR技术和毛细管电泳技术结合起来。采用通用引物与特异引物相结合的方法，通过专利技术来保持反应体系中各模板DNA的比例在扩增过程中不变而实现多重PCR产物定量检测的目的。GeXP技术是芯片和Q-PCR技术的换代产品。