地高辛素标记探针原位杂交法检测鼻咽癌组织中EB病毒

应用原位杂交技术对４１例鼻咽癌组织进行ＥＢ病毒潜在膜蛋白（ＬＭＰ）的检测，其中４例角化型鳞癌中有２例ＬＭＰ－１阳性，６例未分化癌，１０例泡状核细胞癌ＬＭＰ－１均阳性，２１例低分化癌中有１９例ＬＭＰ－１阳性，２４例癌旁组织中２１例ＬＭＰ－１阳性，提示本地区的鼻咽癌与ＥＢ病毒感染有关。     

食管鳞癌中miR-122-5P的表达及其临床病理学意义

目的 探究食管鳞癌组织中miR-122-5P的表达、临床病理学意义及生物学行为。方法 选取食管鳞癌患者74例,收集手术切除的食管鳞癌组织及其配对的癌旁正常食管组织。采用原位杂交技术检测miR-122-5P的表达,比较食管鳞癌组织与癌旁正常食管组织miR-122-5P表达差异,分析其表达及与肿瘤直径、病理分级、淋巴结转移等临床病理特征的关系。结果 miR-122-5P在食管鳞癌中的阳性表达率35.1%(26/74)明显低于癌旁正常食管组织77.0%(57/74)(X²=26.363,P=0.000)。miR-122-5P与食管鳞癌的肿瘤部位、浸润深度表达差异有统计学意义(X²=16.662,P=0.000;X²=10.723,P=0.005)。食管鳞癌组织中miR-122-5P的表达水平与患者性别、年龄、病理类型、肿瘤直径、病理分级、脉管转移、神经转移及淋巴结转移差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-122-5P在食管鳞癌组织和癌旁组织表达不同,食管鳞癌组织中表达下调,推测其可能具有抑癌基因的功能。     

应用FISH技术检测肺腺癌,鳞癌细胞部分染色体数量的改变

目的研究肺癌细胞７号，１７号及Ｙ染色体的数目改变及其意义。方法应用荧光原位杂交技术（ＦＩＳＨ）技术，对１７例腺癌和鳞癌的细胞印片进行检测。结果７号染色体：三体细胞占细胞总数的３１．７３％。１７号染色体：二体细胞占细胞总数的４３％。Ｙ染色体：单体细胞占细胞总数的５８．０４％。结论在肺腺癌和肺鳞癌中，７号染色体数目均有明显增加，并以三体所占比例最高。肺腺癌与肺鳞癌７号染色体数目分布差异明显。     

乙型肝炎病毒（HBV）相关性肾炎患者肾活检组织中HBVDNA分布…

为探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）相关性肾炎的发病机理，应用地高辛素标记ＨＢＶＤＮＡ探针原位分子杂交（ＩＳＨ）和直接原位聚合酶链反应（Ｓ－ＰＣＲ）技术，对２０例临床诊断为ＨＢＶ相关性肾炎患者肾活检石蜡包埋组织切片检查。在ＩＳＨ中采用ＨＢＶ ＤＮＡ两种探针；用全长段探针；８５％（１７／２０）ＨＢＶＤＮＡ阳性，这１７例阳肾组织切片再用ＨＢＶＤＮＡＳ加Ｃ段探针检测，１４例阳性（８２．３５％）。在ＩＳ－ＰＣＲ中     

眼附属器淋巴组织增生性病变的临床病理和分子遗传学特征及其意义

目的 分析眼附属器淋巴组织增生性病变的临床病理特点,探讨其分子遗传学特征及其意义.方法 收集1995-2007年37例眼附属器淋巴组织增生性病变石蜡组织标本(其中5例为反应性增生性病变,32例为淋巴瘤),依据2001年WHO肿瘤分类标准对32例淋巴瘤标本重新诊断分类.采用IgH、MALT1、bcl-6、c-Mye、bcl-2、CCND1、bcl-10、FOXP1双色分离重排探针、IgH/bcl-2双色融合易位探针和18号染色体着丝粒探针,利用间期荧光原位杂交(FISH)的方法 检测眼附属器淋巴组织增生性病变的分子遗传学特点.结果 32例淋巴瘤均为非霍奇金B细胞淋巴瘤.其中,黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT)淋巴瘤28例(87.5%),滤泡性淋巴瘤2例,弥漫性大B细胞淋巴瘤2例.60.7%(17/28)的眼附属器MALT淋巴瘤携带分子遗传学异常.其中,IgH基因断裂1例,但未找到与其发生相互易位的伙伴基因;基因3拷贝者16例,其中MALT1基因、bcl-6基因和c-Myc基因3拷贝的发生率分别为25%(7/28)、43%(12/28)和7%(2/28).16例基因3拷贝病例中,两种基因3拷贝合并存在者5例,其中bcl-6基因合并MALT1基因3拷贝者4例,bcl-6基因合并c-Myc基因3拷贝者1例.进一步研究显示,MALT1基因3拷贝者均存在18号染色体三体.2例滤泡性淋巴瘤都携带t(14;18)(q32;q21)/IgH-bcl-2.2例弥漫性大B细胞淋巴瘤均存在遗传学异常,1例表现为bcl-6基因3拷贝合并18号染色体三体,另1例表现为bcl-6基因3拷贝合并IgH和c-Myc基因双断裂.5例反应性淋巴组织增牛性标本均未见分子遗传学异常.结论 MALT淋巴瘤是眼附属器最常见的淋巴瘤类型;间期FISH有助于淋巴组织增生性病变的良恶性鉴别及淋巴瘤的分类;MALTI基因3拷贝者由18号染色体三体所致;18号染色体三体和bcl-6基因3拷贝(可能为3号染色体三体所致)是眼附属器MALT淋巴瘤常见的分子遗传学异常.     

原位检测新基因SNC66在胃癌组织与正常胃粘膜中的表达

目的: 观察新基因SNC66在胃癌组织中的表达水平,分析SNC66表达水平与胃癌发生的相关性。 方法:以β-actin为对照,对20例胃癌组织及其配对正常胃粘膜的石蜡切片,进行原位cRNA/mRNA分子杂交和原位RT-PCR扩增。 结果:两种检测方法表明,SNC66在正常胃粘膜组织中都呈强阳性表达。而在胃癌组织中,原位分子杂交检测表明,20例标本SNC66不表达和弱阳性表达各8例,强阳性表达4例。原位RT-PCR检测表明,当循环数为10时,此20例胃癌标本中不表达、弱阳性和呈强阳性表达数分别为6,9和5;而当循环数为25时,则4例不表达,16例呈强阳性表达。 结论:SNC66基因在胃癌组织中存在明显的表达降低和表达缺陷。SNC66可以作为一个胃癌负相关基因加以进一步研究。     

组织芯片及其在肿瘤病理学研究中的应用

组织芯片是一类新型生物芯片，它可以快速、高效地对大量组织样本进行分析，在肿瘤病理学研究中已得到有效的应用。本就组织芯片的制备及其应用进行了综合讨论。     

含生长抑素mRNA神经元在移植视网膜发育中的表达

将６０例鼠龄１４ｄＳＤ大鼠视网膜移植到出生后１ｄ大鼠中脑偏左侧处，同时摘除新生鼠的右眼。术后１０ｄ至２２ｄ分别取移植视网膜及其中脑，在相应的年龄取正常视网膜作对照，应用原位杂交组化技术──地高辛标记的生长抑素的ｃＲＮＡ探针检测移植和正常视网膜中含生长抑素ｍＲＮＡ神经元出现时间、发育规律及定位分布。同时用免疫组化方法显示生长抑素免疫反应神经元的形态，以作对照和补充。原位杂交组化实验结果表明：在出生当天的移植视网膜节细胞层已出现阳性表达，出生后４ｄ，外核层也出现小的含生长抑素ｍＲＮＡ神经元，此种神经元随后减少、消失；与此同时内核层及节细胞层内含生长抑素ｍＲＮＡ神经元逐渐增多，至生后１２ｄ接近成年水平。通过对非移植大鼠视网膜进行正常对照观察，移植视网膜与非移植的正常视网膜生后发育的结果相似。生长抑素免疫反应神经元与原位杂交含生长抑素ｍＲＮＡ神经元的表达部位是一致的，但生长抑素免疫反应神经元可见其突起。     

老龄大鼠内侧隔核TrkB mRNA的表达及人参皂甙的保护作用

目的:探讨人参皂甙对老龄大鼠内侧隔核TrkB mRNA表达的影响,为老年记忆减退性疾病的发病机制及人参皂甙的临床应用提供分子生物学基础。方法:选用Wistar大鼠,分成青年组、老龄组、给药组,采用原位杂交组织化学方法检测大鼠内侧隔核TrkB mRNA含量的变化情况。结果:老龄组内侧隔核TrkB mRNA阳性反应物的平均灰度值与青年组相比呈非常显著增高,而给药组的平均灰度值比老龄组呈显著降低。结论:老龄时内侧隔核TrkB mRNA表达低于青年组,而给药组较老龄组明显增加。说明人参皂甙具有增强TrkB mRNA表达,防止中枢神经系统神经元退行性改变的作用。     

马桑内酯致痫后大鼠海马生长抑素mRNA表达的变化

为探讨马桑内酯致痫与生长抑素的关系，用原位杂交组织化学法研究了马桑内酯致痫后大鼠海马生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元的变化，结果表明：致痫组大鼠ＣＡ１，ＣＡ２区及齿状回生长抑素ｍＲＮＡ的反应明显增强，以上各区的中，小神经内生长抑素ｍＲＮＡ神经元的数目及强度明显高于正常对照组，两者有显著性差异。