乳猪肝细胞的分离、培养及功能检测

目的 为构建生物人工肝进行肝细胞的准备。方法 采用胶原酶半原位灌流法分离单个乳猪肝细胞,并对其活力及单层和聚集培养后的白蛋白、尿素合成功能进行检测。结果 采用本方法从每头乳猪中分离到的单个肝细胞数为(3.1±1.5)×10~(10),活性超过95％。在加入激素和生长因子的培养基中单层培养时,肝细胞功能良好,可维持2周左右。而在未加入激素和生长因子的培养中肝细胞虽能存活1周,但功能于24h后即丧失。球形聚集培养可实现肝细胞的大量培养,且生物学活性较单层培养显著提高。结论 采用胶原酶半原位灌注法所得单个乳猪肝细胞基本能满足构建生物人工肝对肝细胞数量的要求。聚集培养接种密度大,细胞生物学活性高,可用于构建生物人工肝。     

Age-related effects of transection of the testicular blood vessels on subsequent testicular development in the pig

Pigs of different ages were studied to assess the effect of age on the development of the testes after intra-abdominal transection of the testicular artery and vein. Transection of the testicular artery and vein at different stages of sexual development had a variable effect on the growth and differentiation of the testes. Transection performed at a young age (2 months) had no effect on the development of the testes (previous study). The animals used in this study were between 3 and 12 months (adult) at the time of surgical intervention. Their testes appeared to be more sensitive to disturbance of the main blood supply. The alternative vascular pedicle (vasal artery) was unable to adapt sufficiently to the increased physiological requirements of the testis during development in more than 50% of the animals. The results obtained from adult males indicate that intra-abdominal transection of the testicular vessels invariably has a deleterious effect on the testis.     

中等强度冲击波负压暴露对豚鼠耳蜗毛细胞游离钙浓度的影响

目的:观察实验性冲击波负压(BUP)暴露对豚鼠耳蜗外毛细胞内游离钙浓度([Ca2 ]i)的影响。方法:在激光共聚焦显微镜下,用钙敏荧光探针Fluo-3作为指示剂,观察豚鼠暴露中等强度实验性BUP后耳蜗外毛细胞[Ca2 ]i的变化。结果:中等强度BUP暴露后8 h,至暴露后24 h和3 d稍有回落,但仍高于正常对照组。上述这些变化与听性脑干反应阈值的升高是一致的。结论:豚鼠暴露中等强度性BUP可引起耳蜗外毛细胞内[Ca2 ]i的明显增高,且可能是听功能损害的主要原因之一。     

低压状态下猪鼾症模型的建立及其CT研究

目的探讨低压环境对动物上气道软组织形态学的影响。方法将试验猪置于一个低压环境饲养6个月建立猪的鼾症模型,当出现类似鼾症临床症状和鼾症相似的咽腔压力波形时,再进行CT扫描影像学检查。并与正常状态饲养的对照组进行对比。结果模型猪咽后壁及软腭明显增厚,分别为(0.94±0.16)cm和(1.06±0.23)cm;对照组分别为(0.60±0.11)cm和(0.59±0.13)cm。模型猪的气管截面积在在前、中、后部分别为(1.49±0.12)cm2、(1.37±0.32)cm2和(1.00±0.21)cm2,其中以悬雍垂水平(后部)最为狭窄;对照组前、中、后部分别为(1.30±0.14)cm2、(1.57±0.32)cm2和(2.48±0.42)cm2。结论低压状态是鼾症的重要的致病因素之一,低压状态可建立鼾症的动物模型。     

N-乙酰半胱氨酸对脑死亡巴马小型猪心脏的保护作用及其机制

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对脑死亡状态下巴马小型猪心脏形态与功能的影响。方法 应用改进的缓慢间断颅内加压法建立巴马小型猪脑死亡模型。将实验动物随机分为3组，每组5只。对照组（A组）：动物麻醉后仅行开颅与开关腹手术。非药物干预组（B组）：建立脑死亡模型，不进行药物干预。NAC处理组（N组）：建立脑死亡模型，于脑死亡后1和12h，按200mg／kg的剂量将NAC加入100ml生理盐水中，经静脉缓慢滴注。分别于脑死亡后6、12和24h检测各组血清中肌钙蛋白T（cTnT）的水平以及干扰素α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）以及白细胞介素6（IL-6）含量。脑死亡后24h，取各组心尖部心肌组织，光镜下观察心脏组织结构变化，电镜下观察心脏组织超微结构变化，免疫组织化学染色法观察核因子κB（NF-κB）的表达水平，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测NF-κB mRNA的变化。结果 脑死亡6h后，B组及N组的血清cTnT、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均开始升高，但N组升高幅度显著低于B组。脑死亡后24h可见心肌细胞出现损伤性改变；N组心肌细胞损伤明显轻于B组。B组及N组心肌细胞中NF-κB mRNA及其蛋白表达水平均升高，但N组显著低于B组。结论 N-乙酰半胱氨酸能够减轻脑死亡状态下心脏的形态和功能损伤性改变，其机制可能与抑制NF-κB mRNA及其蛋白的表达，减少炎症介质的释放有关。     

Effects of buffering in hypercapnia and hypercapnic hypoxemia

Anesthetized, paralyzed and mechanically ventilated pigs were exposed to extreme hypercapnia (Paco_2-20 kPa) at Fio₂ 0.4 for 480 min, with (n = 6) or without (n = 6) continuous infusion of isotonic buffers (bicarbonate and trometamol). Arterial pH was higher in buffered animals than controls, 7.21 ±0.01 vs 7.01±0.01 (mean ± s.e.mean, P < 0.01). Serum osmolality and Paco₂ did not differ between groups throughout the experiment. The hemodynamic response to hypercapnia was attenuated in the buffered group, who had lower heart rate, 133 ± 6 vs 189±12 min^-1 (P < 0.01), mean arterial pressure (MAP) 109 ± 4 vs 124 ± 4 mmHg (14.5 ± 0.5 vs 16.5 ± 0.5 kPa) (P < 0.05), mean pulmonary arterial pressure 16±1 vs 23 ± 1 mmHg (2.1 ±0.1 vs 3.1 ±0.1 kPa) (P < 0.01), and pulmonary vascular resistance (PVR) 249 ± 21 vs 343 ± 20 dyn s-cm^-5 (2490±210 vs 3430±200 μN-s-cm^-5) (P < 0.01), compared with the control group. Subsequently, both groups were exposed to hypercapnic hypoxemia by stepwise increases in Fio₂ (0.15, 0.10, 0.05) at 30-min intervals, while Fico₂ was kept at 0.2. PVR increased in both groups (P < 0.05) but, except for heart rate, all hemodynamic differences between the groups disappeared during hypoxia. At Fio₂ 0.15, buffered animals had higher arterial oxygen saturation (73 ± 5%) than the controls (55 ± 5%), (P < 0.05). The control animals died after 1–29 min (mean 14 min) at Fio₂ 0.10, while all buffered animals survived Fio₂ 0.10 with stable MAP (122 ± 14 mmHg (16.3 ± 1.9 kPa). The buffered animals died after 4–22 min (mean 15 min) at Fio₂ 0.05. We conclude that buffering to a pH of 7.21 attenuates the observed hemodynamic response in extreme hypercapnia and improves survival in hypercapnic hypoxemia.     

豚鼠内耳前庭感觉毛细胞的分离

用机械分离法从豚鼠前庭感觉上皮中分离出不同种类的前庭感觉毛细胞（ＶＨＣ）。ＶＨＣ主要可分为Ⅰ型和Ⅱ型细胞。两种细胞形态虽有所差异，但一般均有四形或瓶形胞体，胞核位于细胞基部，胞颈和纤毛变化较大。细胞的活性可通过１％中性红染色鉴定，发现在室温下，１ｈ内大约９０％以上的分离ＶＨＣ可维持其正常形态和活性。并参照对外毛细胞形态的研究提出活性ＶＨＣ的鉴别标准。此项工作为进一步研究ＶＨＣ的感觉机制和某些疾病的发生机理打下了基础。     

极低频强磁场对豚鼠听阈的影响

本研究以豚鼠皮层听觉诱发电位反应阈为指标，采用自体或群体对照方法，观察０．１Ｈｚ极低频磁场对豚鼠听力的影响。结果表明，豚鼠经５０ｍＴ（毫特）、４ｈ，１００ｍＴ、４８ｈ及１０ｍＴ、４周暴露后，听阈降低；５０ｍＴ、４８ｈ，２０ｍＴ、４周暴露后听阈无明显变化。提示０．１Ｈｚ极低频磁场对豚鼠听敏度无不利的影响，在某些暴露条件下，听敏度尚有改善。     

广西巴马长寿乡壮族长寿老人永生细胞库的建立

目的：建立广西巴马长寿乡壮族长寿老人永生细胞库。方法：使用EB病毒转化外周血B淋巴细胞方法。结果：建立了长寿者外周血细胞转化永生细胞株的方法，转化成功率77．4％。建立了65株长寿老人、直系亲属永生细胞株及长寿老人资料库和完整的细胞株档案。结论：广西巴马长寿乡壮族长寿老人永生细胞库的建立为永久保存细胞系及后续研究提供了必要的基础。     

卡介苗对哮喘豚鼠的影响

目的 研究卡介苗对哮喘豚鼠的防治作用。方法 24只豚鼠随机分为阳性对照组、地塞米松组、卡介苗组及阴性对照组,每组6只,除阴性对照组用生理盐水外,其余三组每只腹腔内注射鸡卵蛋白100mg,2周后用1％鸡卵蛋白激发致敏,每次30min,每日1次,持续3d,地塞米松组每次激发前肌注地塞米松2mg/kg,卡介苗组每次激发前肌往卡介苗30mg/kg,阳性对照组每次激发前30min肌注生理盐水2ml,最后用乌拉坦麻醉,检验动脉血气分析参数,嗜酸粒细胞(EOS)计数等参数,所有参数用t检验或卡方检验分析。结果 阳性对照组与其它三组比较,在豚鼠的发病程度、动脉血气分析、外周血EOS计数、支气管肺泡灌洗液中EOS计数、支气管病理切片每20个高倍视野EOS计数均有明显差异(P<0.05或P<0.01)。结论 卡介苗能够抑制动物模型中的哮喘反应。