血清或血浆MicroRNAs——一种癌症诊断的潜在生物标志物

MicroRNAs(miRNAs)是一类小片段非编码RNA调控因子,广泛存在于各种真核细胞中,参与调节细胞生长发育、分化、凋亡等生命进程。miRNAs以癌基因和抑癌基因方式在肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。最近,有证据显示miRNA稳定地存在于人类的血清/血浆中,大量的实验开始探究循环性miRNAs作为一种新的、非侵入性的生物标志物的机制。因此,血清/血浆中的miRNAs有望为肿瘤的诊断提供临床依据。     

MiR-590-3p在胰腺癌干细胞中的表达

目的 应用无血清培养基分离胰腺癌干细胞,检测其miR-590-3p的表达。方法 运用无血清培养基克隆培养ASPC-1、PANC1细胞,检测其单克隆形成、分化及细胞周期、半数抑制浓度(IC50)和表面标记物CD24+、CD44+表达。实时定量PCR法检测细胞miR-590-3p的表达。结果 经无血清培养基培养,(0.94±0.53)％的ASPC-1细胞和(0.57±0.12)％的PANC1细胞能存活,呈克隆球样悬浮生长,并可以在体外连续传代。加入血清后细胞球又重新贴壁生长。ASPC-1细胞球G0/G1期比例和CD24+、C44+、CD24+ CD44+的细胞比例及IC50分别为(75.3±5.4)％、0.96％～2.01％、27.52％～34.47％、0.35％ ～0.44％和(224.37±5.71) μg/ml,均显著高于亲本细胞的(43.7±3.8)％、0.38％～0.42％、17.65％ ～ 18.25％、0.05％～ 0.08％、(11.43±2.10) μg/ml(P值均＜0.05)。PANC1细胞球G0/G1期比例和CD24+、CD44+、CD24 +CD44+的细胞比例及IC50分别为(80.1±4.7)％、5.31％ ～9.84％、72.05％ ～93.06％、4.91％ ～5.21％、(296.58±4.27) μg/ml,均显著高于亲本细胞的(46.1±5.3)％、4.09％～4.97％、47.71％～55.66％、1.48％ ～2.63％、(26.17±3.81) μg/ml(P值均＜0.05)。ASPC-1、PANC1细胞球miR-590-3p表达分别是亲本细胞的4.67和4.52倍。结论 应用无血清培养基可以从ASPC-1、PANC1细胞系中分离出具有干细胞特性的胰腺癌细胞球,其miR-590-3p表达上调,该基因可能是胰腺癌干细胞特性维持的关键基因。     

胰腺癌患者血浆miR-155检测及其诊断价值

目的 检测胰腺癌患者血浆miR-155表达量,评价其对胰腺癌的诊断价值.方法 收集62例胰腺癌、61例慢性胰腺炎(CP)及36例正常对照者的血标本,抽提血浆RNA,应用实时PCR检测miR-155表达量,并分析其与胰腺癌临床参数的关系.应用接受者操作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评价血浆miR-155表达量对胰腺癌的诊断价值.结果 胰腺癌、CP和正常对照组的血浆miR-155表达量分别为5.41±3.14、2.59±2.49和0.77±1.17,胰腺癌血浆miR-155表达量显著高于CP及正常对照组(P＜0.01).胰腺癌血浆miR-155表达量与患者年龄、性别、肿瘤大小等均无显著相关性,而与肿瘤TNM分期呈显著负相关(r=-0.323,P=0.01).经ROC分析,胰腺癌对正常对照组的AUC为0.943(95%CI0.902～0.985),敏感性和特异性分别为87.1%和83.3%;胰腺癌对CP的AUC为0.762(95%CI0.678～0.846),敏感性和特异性分别为64.5%和73.8%;胰腺癌对正常对照组+CP组的AUC为0.829(95%CI0.767～0.892),敏感性和特异性分别为62.9%和84.5%.结论 胰腺癌患者血浆miR-155表达量显著升高,对胰腺癌的诊断可能有一定的应用价值.     

微小核糖核酸-204和211在人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞分化过程的变化

目的 观察人胚胎干细胞（hESC）向视网膜色素上皮（RPE）细胞诱导分化过程中微小核糖核酸（miRNA）-204和211的变化特征。方法 采用自然分化法诱导hESC向RPE细胞分化,细胞鉴定。按细胞诱导分化时间秩序,分为hESC组、含色素细胞组、hESC源性RPE细胞组和原代培养的人胎RPE（hfRPE）细胞组。行miRNA基因表达谱芯片分析、miRNA-204和211实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测。 结果 miRNA芯片分析结果显示,随细胞诱导分化过程, miRNA-204持续上调。其中,含色素细胞组是hESC组的5.026倍,hESC 源性RPE细胞组是含色素细胞组的3.337倍;hfRPE细胞组是hESC源性RPE细胞的13.574倍。miRNA-211在细胞诱导分化过程中上调不明显,但从hESC源性RPE细胞到hfRPE细胞,上调倍数为44.333倍,是miRNA表达谱中差异最大的miRNA。RT-PCR检测结果显示,hESC组、含色素细胞组、hESC源性RPE细胞组、hfRPE细胞组miR-204相对表达量分别为91.81±4.43、2 263.09±206.39、5 996.80±235.42、171 676.45±999.82,差异有统计学意义（t=18.22、20.66、279.38,P＜0.001）;miRNA-211相对表达量分别为2.23±0.31、129.33±3.75、125.76±4.78、16 682.00±352.97。含色素细胞组和hESC细胞组、hfRPE细胞组和hESC源性RPE细胞组miR-211相对表达量比较,差异均有统计学意义（t=58.58、81.24,P＜0.001）。结论 miRNA-204和211在hESC向RPE细胞诱导分化过程中持续单一变化。     

MicroRNAs的表观遗传学调控机制及其在肝癌中的表达特征

MicroRNAs（miRNAs）是一类广泛存在于动、植物中的内源性非编码小RNA,通过与靶基因mRNA 3′端非翻译区互补结合调控编码基因的表达。miRNAs具有调控细胞增殖、分化和凋亡的作用,与肿瘤的发生有密切关系。表观遗传学调控对miRNAs的转录非常重要。肝细胞癌中miRNAs的表达具有一定特点。     

大鼠肝癌细胞与胎肝细胞间抑癌微小RNAs的表达差异

微小RNAs(miRNAs)是一类短序列、非编码、具有调控功能的单链小分子RNA[1],通过与其靶mRNA分子互补结合,在翻译水平上特异性抑制基因表达,参与调控生物生长和发育等许多复杂的生命过程[2,3],异常的miRNAs表达可能与人类许多疾病乃至肿瘤的发生和发展都密切相关[3,4].已知的miRNAs参与癌症发生的机制包括细胞黏附、血管生成、蛋白质水解、细胞信号系统、细胞增殖、侵袭转移和细胞死亡[5].miRNAs在肝癌组织中异常表达,它可能参与了肝细胞癌变及肝癌转移的病理过程[6].本研究应用Exiqon miRNA基因芯片技术,建立大鼠肝癌细胞和胎肝细胞之间miRNAs的差异表达谱,探索肝癌诊断和预后的新指标.DOI:10.3760/cma.j.issn.1007-3418.2009.02.016     

MicroRNAs在急性心肌梗死早期诊断中的评价

目的 用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法检测急性心肌梗死(AMI)患者血浆中的MicroRNAs水平,评价其在AMI早期诊断中的价值. 方法 选取AMI患者24例,对照组20例为研究对象,分别在症状发作后3h、6h、12 h、24 h、48 h、72 h检测血浆中microRNA-1、microRNA-133a、microRNA-208a、microRNA-499的水平. 结果 miRNA-1在缺血性胸痛发作后3 h血浆水平明显升高达到高峰,72 h基本降至正常;miRNA-133a在6h后血浆水平明显升高,12h达到高峰,48 h降至正常;miRNA-1和miRNA-133a表达水平与心肌肌钙蛋白I(cTnI)相关,miRNA-1的峰值出现在cTnI之前,miRNA-133a峰值与cTnI发生在同一时间. 结论 循环中升高的miRNA-1、miRNA-133a可能是诊断早期AMI的一种有潜力的、新型的生物标志物.     

微小RNA与胶质瘤干细胞放化疗敏感性

微小RNA（miRNA）的表达与胶质瘤干细胞对放疗及化疗的敏感程度密切相关。许多研究发现,调节单一miRNA能起到提高胶质瘤干细胞的放化疗敏感性、增加细胞凋亡、多方面综合抑制胶质瘤干细胞生长的效果。胶质瘤的治疗策略有望以miRNA为靶点,通过调节miRNA在细胞中的表达,从而达到提高胶质瘤干细胞放化疗敏感性的目的。     

血管生成拟态在恶性肿瘤的研究进展

血管生成拟态(VM)一种存在于恶性肿瘤的血液供应模式,乳腺恶性肿瘤VM的形成机制十分复杂.肿瘤细胞的可塑性和多种分子的调节在VM形成机制中起重要作用,同时缺氧微环境及微小RNA(miRNA)与VM的发生和发展具有相关性.缺氧微环境及miRNA与乳腺恶性肿瘤VM关系尤为密切,将有望成为乳腺癌临床研究中重要的诊断及判断预后的指标.