次乌头碱对乳大鼠原代培养心肌细胞Ca2+及Cx43表达的影响

目的 观察次乌头碱对原代培养的心肌细胞内Ca2+浓度及缝隙连接蛋白Cx43表达的影响.方法 体外培养乳大鼠心肌细胞,采用流式细胞技术观察30,60,120 μmol/L的次乌头碱在15,30,60 min对心肌细胞内Ca2+浓度变化的影响,并应用Western blot技术检测次乌头碱作用心肌细胞15 min后的细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达水平.结果 次乌头碱能提高心肌细胞[ Ca2+]i,这种作用在给药后15 min时最显著,随着作用时间的延长,细胞[Ca2+]i下降;次乌头碱作用心肌细胞15 min能降低心肌细胞Cx43的表达量,但无显著性差异.结论 次乌头碱能促进心肌细胞内Ca2+增高,进而导致细胞Cx43表达降低,增加心肌细胞发生心律失常的易感性.     

骨代谢生化指标临床应用专家共识（2019）

骨代谢生化指标包括钙磷代谢调节指标、骨形成标志物、骨吸收标志物、激素与细胞因子。骨代谢生化指标分别来源于骨、软骨、软组织、皮肤、肝、肾、小肠、血液及内分泌腺体等,是由成骨细胞或破骨细胞分泌的酶和激素,以及骨基质的胶原蛋白代谢产物或非胶原蛋白。骨代谢生化指标可及时反映骨转换状态,灵敏度高、特异性强,用于骨质疏松诊断分型、预测骨折风险、抗骨质疏松治疗疗效评价,以及代谢性骨病的鉴别诊断。并且在骨质疏松流行病学、发病机制、骨质疏松药物的研究方面具有重要的临床意义。     

白木香纤维素合酶家族基因的鉴定及表达分析

纤维素合酶(cellulose synthase, CesA)是纤维素生物合成途径中的一类关键酶,在植物生长发育和植物防御反应中有着重要的作用。本研究利用白木香基因组数据库,通过生物信息学手段,对白木香纤维素合酶家族成员及其编码蛋白的理化特性、蛋白保守基序、染色体定位、启动子区域等进行预测分析。系统分析鉴定了21个白木香AsCesA基因,并发现AsCesA蛋白主要分布于质膜,氨基酸数目为390～1 261个,分子质量为43.35～142.58 kD,等电点分布在5.67～8.86,均含跨膜结构域,数目为6～8;系统进化分析表明21个AsCesA分为3个亚组;保守基序分析表明,不同AsCesA蛋白的motif组成有一定差异,但均含有motif2、motif6、motif7和motif10。顺式作用元件分析表明, AsCesA基因家族具有响应植物激素作用、非生物胁迫和生物进程相关的顺式作用元件。分析NaCl诱导不同时刻的白木香愈伤组织的转录组数据,选择了7个具有差异表达的AsCesA并分析其在非生物胁迫下的表达量变化。实时荧光定量PCR结果表明,盐、低温、干旱和重金属胁迫均能不同程度影响白...     

中药复方防治肾纤维化的试验研究概况

目的 :通过检索中药复方防治肾纤维化实验研究方面的文献,进一步了解中医药在肾纤维化防治方面的研究概况。 方法 :在中国知网(CNKI)界面检索项"文献标题"检索"中药肾纤维化", 时限为2000年~2010年,将检索到的文献进行筛选,并归类总结。 结果 :调研发现,共有实验研究类文献25篇,进行了15个复方的研究,其中主要复方有11个。 结论 :中药复方在防治肾纤维化的实验研究方面已深入到细胞学、蛋白表达水平,但这些实验尚缺乏深入系统的研究。     

中医辨治慢性乙型肝炎应当重视脾阴虚病机

慢性乙型肝炎病程较长、迁延难愈,虽为实邪因素诱发,却有正气不足的基础,临床上亦可见到许多患者或呈现一派虚象,或实证不甚明显,常有纳差腹胀、饥而不欲食、口舌干燥、倦怠乏力等脾阴不足的表现。“脾阴”为脾本脏之阴精,与“胃阴”相比症状有相似之处但层次更深,涉及精血分而不只是气津的耗伤。在当前的诊疗指南中对于阴精的亏虚仅从肝肾考虑,对于脾虚一证又未离气虚阳虚,病机认识与辨治尚有不足。针对这种情况,本文基于藏象学说及通过查阅相关文献并对主要临床表现进行分析、归纳之后,认为“脾阴虚”证在慢性乙肝病情发展过程中普遍存在,能否抓住这一病机进行恰当治疗直接影响疾病转归。治疗不应只是疏肝理气活血、清热利湿解毒,同时应当重视脾脏的阴精、恢复中焦气机升降,可以养脾阴、助脾运、缓祛邪为治法,选用慎柔养真汤、资生丸等方剂进行加减,以期补充对慢性乙型肝炎的临床辨治。     

双辛鼻鼽散提取工艺研究

目的:筛选双辛鼻鼽散的最佳提取工艺。方法:针对方中各药味的药理作用,分别采用提取挥发油、水提和醇提工艺,采用正交实验法筛选提取工艺条件,以挥发油收率为指标优选挥发油提取条件,以收率、盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱含量优选水提条件,以黄芩苷含量和收率优选醇提条件。结果:挥发油提取条件为10倍水,提取6 h和水提条件为8倍量水,提取3次,每次1 h和醇提工艺条件为50%乙醇提取3次,提取溶剂量分别为12倍/10倍/8倍,每次1.5 h。结论:该方法遵从各药在复方中君臣佐使的特点,充分发挥了药物特性,保证了双辛鼻鼽散治疗过敏性鼻炎的药理药效。     

益肾生精方治疗少弱精子症的药效评价及作用机制

目的 采用环磷酰胺致大鼠少弱精子症模型，研究益肾生精方对少弱精子症的治疗作用及作用机制。方法 随机选取8只SD雄性大鼠为正常组，其余大鼠连续5 d腹腔注射环磷酰胺（35 mg·kg^-1·d^-1）制备大鼠少弱精子症模型，而后随机分为模型组、益肾生精方低、中、高剂量组（2.91、5.83、11.66 g·kg^-1），五子衍宗丸组（1.03 g·kg^-1），左卡尼汀组（0.17 g·kg^-1），每组8只。药物干预28 d后，记录大鼠体质量、睾丸质量和指数；采用计算机辅助精子分析（CASA）系统检测附睾中精子质量；苏木素-伊红（HE）染色观察睾丸组织形态；比色法检测睾丸组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）的水平；原位末端标志法（TUNEL）检测睾丸组织中细胞的凋亡情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测睾丸组织中B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、活化的胱天蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠体质量、睾丸质量和指数、精子浓度和活力显著降低（P<0.01），睾丸病理评分显著升高（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方中、高剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可提高体质量、睾丸质量和指数，并提高精子浓度和活力；降低睾丸病理评分。氧化应激水平检测结果显示，与正常组比较，模型组大鼠睾丸组织中SOD水平显著降低（P<0.01），MDA水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方高剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可以明显提高SOD活性，降低MDA水平（P<0.05，P<0.01）。血清激素水平检测结果显示，与正常组比较，模型组T水平显著降低（P<0.01），FSH和LH水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可以显著提高T水平（P<0.01），降低LH水平（P<0.05，P<0.01）。TUNEL结果显示，与正常组比较，模型组生精细胞凋亡率显著增加（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方中剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可显著降低凋亡率（P<0.01）。Western blot结果显示，与正常组比较，模型组Bcl-2蛋白水平明显降低（P<0.05）、Bax和cleaved Caspase-3蛋白水平明显升高（P<0.05，P<0.01）；益肾生精方高剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可以明显升高Bcl-2蛋白水平，降低cleaved Caspase-3蛋白水平（P<0.05，P<0.01）。结论 益肾生精方可改善少弱精子症模型大鼠的精子质量，其机制可能与抗氧化、调节性激素水平以及抑制生精细胞凋亡等多个途径有关。     

傅山《临产须知全集》辨伪

新发现的《临产须知》三卷初刻于清道光乙酉年(1825年),托名“傅青主先生秘传”,早于《傅青主女科》2年.本文认为《临产须知》非傅山所撰,对考证署名傅山的诸多医书如《产科四十三症》、《产后编》、《大小诸症方论》、《傅青主女科》之伪托真相皆具有重要意义.     

HPLC测定通关藤药材及消癌平片中通关藤苷A含量

目的 建立通关藤药材及消癌平片中通关藤苷A的高效液相色谱含量测定方法.方法 色谱柱:Sinochrom ODS-BP分析柱(250 mm× 4.6mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1％磷酸(41∶59);检测波长:230 nm.结果 通关藤苷A在0.996～ 19.92 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,r=0.999 95,平均加样回收率为96.6％,RSD =2.19％(n=6).结论 本方法操作简单,结果准确,稳定性和重复性好,可用于通关藤药材及消癌平片的含量测定及质量控制.     

桑叶调节PI3K/Akt/PPARα/CPT-1通路改善2型糖尿病大鼠肝脏糖脂代谢紊乱机制

目的 基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/过氧化物酶体增殖物激活受体α/肉毒碱棕榈酰基转移酶-1（PI3K/Akt/PPARα/CPT-1）信号通路探讨桑叶水提物对2型糖尿病（T2DM）大鼠肝脏糖脂代谢紊乱的作用及其机制。方法 高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素（STZ）方法制备T2DM模型,按血糖、体质量将造模成功大鼠随机分为模型组、二甲双胍（0.2 g·kg^-1）组和桑叶水提物（含生药4.0 g·kg^-1）组,连续给药8周,每周相同时间测定空腹血糖。苏木素-伊红（HE）染色、油红O染色观察肝脏组织形态学和脂肪变化;生化分析法测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨基酸氨基转移酶（AST）水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝脏磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、PI3K、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、Akt、PPAR-α、CPT-1蛋白表达。结果 给药8周后,与正常组比较,模型组大鼠血糖显著升高（P<0.01）;与模型组比较,桑叶水提物组大鼠血糖显著降低（P<0.01）。HE染色显示,正常组大鼠肝组织结构完整,肝细胞以中央静脉为中心呈放射状排列;模型组大鼠肝细胞损伤明显;与模型组比较,桑叶水提物组大鼠空泡变性程度显著降低,未见小胆管增生等病变。油红O染色显示,正常组大鼠肝细胞无明显脂肪变性、坏死,肝细胞几乎无脂滴;模型组大鼠肝内脂滴较正常组明显增加;桑叶给药可明显减少大鼠肝脏脂滴。模型组大鼠TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平较正常组显著升高（P<0.01）;桑叶水提物组大鼠TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平较模型组明显降低（P<0.05,P<0.01）。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组大鼠p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、PPARα和CPT-1的蛋白表达显著降低（P<0.01）;与模型组比较,桑叶水提物能明显增加p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、PPARα和CPT-1的蛋白表达（P<0.05,P<0.01）。结论 桑叶水提物可改善T2DM大鼠肝脏糖代谢紊乱,降糖机制可能与调控PI3K/Akt/PPAR-α/CPT-1信号通路有关。