含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究

目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中,G418筛选得到转入重组质粒并能表达目的基因的细胞系BHK-HBsAg;用具有rAAV包装功能的HSV-1- HSV1-rc/△UL2感染BHK-HBsAg,纯化后得到rAAV-HBsAg;ELISA检测重组病毒表面抗原基因在BHK-21细胞和293细胞中的表达;用rAAV-HBsAg免疫BalB/C小鼠,RIA法检测血清中表面抗体的滴度。结果ELISA法检测到混合细胞系BHK-HBsAg中HBsAg的表达量为(28.6±6.7)ng/5×106细胞;rAAV-HBsAg感染BHK-21细胞和293细胞后均能检测到HBsAg的表达,表达量随感染复数的增加而升高;rAAV-HBsAg免疫的BalB/C小鼠能产生表面抗体(抗-HBs抗体)。结论rAAV-HBsAg在体外能表达,免疫动物能诱导体液免疫反应的产生。rAAV-HBsAg有希望成为乙型肝炎候选疫苗,也可以进一步用于探索慢性乙型肝炎的免疫治疗。     

肾综合征出血热病毒76－118株的反转录及聚合酶链反应扩增、鉴定的初步研究

用反转录和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增了肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）７６－１１８株ＭＲＮＡ３＇－端２３７ｂｐ基因片段。制备了长臂光敏氨基已酸生物素标记的２３７ｂｐ探针。经琼脂糖电泳和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹，生物素－亲和素系统杂交和显色，对２３７ｂｐ扩增产物进行了特异性和灵敏性鉴定。ＰＣＲ技术与反转录技术相结合可用来对一些ＲＮＡ病毒进行研究和诊断，并能快速制备出质量较好的标记探针。     

轮状病毒蛋白的研究进展

轮状病毒是传染性胃肠炎的重要病原，完整病毒颗粒有三层蛋白壳（Ｃａｐｓｉｄ），本文简要综述组成病毒颗粒的六个结构蛋白和另外五个病毒复制过程中需要的非结构蛋白的生化特性及功能的研究进展。     

静脉注射海洛因成瘾者免疫功能状态的研究

<正> 本文通过对50例单纯iv海洛因成瘾者的研究表明,iv海洛因成瘾者外周血中免疫球蛋白IgG、IgM、IgD含量与对照组相比都有显著性的下降(P<0.001),C_4含量也有定的降低,但其变化没有显著性差异,C_3水平虽然较对照组有所升高,但其值几乎都在正常范围之内,对成瘾者异常感染检测结果表明,未发现HIVAb阳性者,但HCVAb和HBsAg阳性分别为76%和22%,与对照组相比有显著性差异(P<0.001);提示i v海洛因对人抗体和补体的生成有抑     

火殃簕、铁海棠、扭曲藤和红背叶对3-甲基胆蒽诱发小白鼠皮肤肿瘤的作用

作者研究了火殃簕,铁海棠,扭曲藤和红背叶对致癌物质3—甲基胆蒽(3—met—hycholanthrene,3—MC)诱发小白鼠背部皮肤肿瘤的促进作用。实验结果表明,小鼠在用药30周后,背部皮肤出现数量不等的乳头样肿瘤。火殃簕、铁海棠,扭曲藤和红背叶的促肿瘤发生率分别为10％,15％,13％和17％。而对照巴豆油组的肿瘤促发率为43％。单—3—甲基胆蒽组的肿瘤诱发率为0％。研究结果证明,火殃簕,铁海棠,扭曲藤和红背叶是一类较弱的促癌物质     

CT引导脑内植入携带人类酪氨酸羟化酶基因腺相关病毒载体治疗实验性帕金森病猴

目的 观察CT引导脑内注射入类酪氨酸羟化酶基因腺相关病毒载体(AAV—hTH)对神经细胞的转染能力，以及对帕金森病(PD)猴的治疗效应。方法 经右侧颈内动脉注射1-甲基4-苯基-1，2，3，6一四氢吡啶(MPTP)制作6只偏侧帕金森病恒河猴模型，经CT引导将AAV—hTH注入5只帕金森病猴右侧尾状核内，观测猴模型的行为学改变6个月以上，以高效液相色谱法(HLPC)测定转染后尾状核内多巴胺(DA)及其代谢产物含量，并以免疫组化检测法及逆转录-聚合酶链式反应(RT—PCR)方法检测酪氨酸羟化酶(TH)基因的表达情况。结果 CT引导定位穿刺有实时操作、定位精确、微创的优点。所有注射AAV—hTH的偏侧PD猴模型术后2周即有帕金森病症状改善，持续6个月以上，其中1只动物阿朴吗啡旋转实验示完全停止了帕金森病旋转现象，其余动物旋转次数较术前减少约42％～70％。实验侧与健侧尾状核区多巴胺及其代谢产物含量比值较未治疗模型增高。免疫组化染色见穿刺针道部位有大量TH阳性细胞；RT—PCR检测到实验侧尾状核区有TH-mRNA存在；而对照侧尾状核区、其他部位脑组织与心、肝、肾组织及未注射模型实验侧尾状核区均未见阳性发现。结论 CT引导立体定向穿刺PD猴尾状核注入AAV—hTH能使TH基因精确地在特定部位有效表达，提高尾状核区DA含量，改善模型猴症状，研究结果提示这是一种有效、安全的治疗PD非人类灵长类动物模型的方法。为临床基因治疗PD的研究提供了实验研究依据。     

Colti病毒及Colorado蜱热

Colorado蜱热（CTF）病毒属于呼肠孤病毒科Colti病毒属，是重要的虫媒病毒之一。在欧美等西方国家以蜱为虫媒，在我国和印度尼西亚Colti病毒以蚊子为媒介。本文就CTF的流行病学、临床特点、诊断技术的进展、CTF病毒的检测和部分已明确的dsRNA基因组节段的核苷酸序列作一综述。     

发现人类免疫缺损病毒-I膜蛋白与人类白细胞抗原存在同源性区域(论著摘要)

人类免疫缺陷综合征(AIDS).其病原因子是一组密切相关的嗜T淋巴细胞逆转录病毒(LAV.HTLV-Ⅲ或ARV等),即人类免疫缺损病毒-I(HIV-I).由env基因编码的约826个氨基酸的包膜蛋白(gp160),包括膜外的gp120和跨膜gp41两部分.研究表明,gp120是HIV吸附和穿入淋巴细胞或其它靶细胞.启动感染的关键结构,人类白细胞抗原(HLA),即人类主要组织相容性复合物(MHC)产物。     

肾综合征出血热细胞培养灭活疫苗的成功研制

肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）是严重危害我国人民生命健康的一种急性传染病，预防上迫切需要一种安全有效的疫苗。１９８１年我国首次成功地分离到该病的病原汉坦病毒后，即开始研制预防该病的灭活疫苗（１），迄今已成功研制出三种抗ＨＦＲＳ灭活疫苗，即两种细胞培养（地...     

用酶联免疫法对育龄妇女风疹抗体的监测

<正> 风疹是一种常见的急性病毒性传染病。以隐性感染较为普遍,症状较轻易被忽视;妊娠初期感染风疹病毒所致胎儿畸形已引起人们的重视,为此,作好风疹的监测和预防有着重要意义。风疹血清学检测工作既往都用血凝抑制法。本文同时用ELISA和HI两种方法检测风疹抗体水平,并比较其优越性,现将结果报告于下。