软骨脱细胞基质多孔支架与骨髓基质干细胞体外构建组织工程软骨的研究

目的 探讨关节软骨脱细胞基质多孔支架(CEDIS)与骨髓基质干细胞(BMSCs)体外培养组织工程软骨的可行性.方法 粉碎人关节软骨,脱细胞处理后差速离心法收集细胞外基质悬液,采用冷冻干燥技术制备三维多孔支架.扫描电镜观察其微观结构,并进行组织学观察,生化成分定量检测其胶原、氨基葡聚糖(GAG)、DNA含量,牛物力学方法测量其干性及覆水状态下压缩弹性模量;分离培养犬骨髓基质干细胞,TGF-β1成软骨诱导,PKH26标记,接种到支架上体外继续诱导培养,荧光显微镜及扫描电镜观察培养3 d后细胞在支架内的黏附、分布情况.结果 制备的CEDPS支架无细胞碎片残留,软骨细胞外基质特异性染色阳性,具有相互贯通的三维孔隙结构;支架生化成分定量检测:总胶原含量为(708.2±44.7)μg/mg,GAG含量为(254.7±25.9)μg/mg,DNA含量为(0.021±0.007)μg/mg;支架纵向压缩弹性模量E=(1.226 ±0.288)MPa,覆水后压缩弹性模量E=(0.052±0.007)MPa.荧光显微镜、电镜检查结果表明细胞广泛均匀的分布在支架内部,呈圆形或椭圆形,在支架上增殖显著,细胞基质分泌明显.结论 CEDPS支架在生化组成和结构上与软骨细胞外基质成分类似,去细胞彻底,具有良好生物力学特性,是一种较为理想的软骨组织工程支架载体;成软骨诱导的BMSCs与CEDPS支架在体外可初步构建类软骨样组织.

Abstract：

Objective To develop a novel cartilage ECM-derived porous scaffold(cEDPs)and investigate the attachment,proliferation and distribution of bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs) cultured in vitro within the scaffolds.Methods Cartilage microfilaments were prepared after pulverization and gradient centrifugation and prepared into suspension after acellularization treatment.The scaffolds were examined by histological staining,scanning electron microscope(SEM),biochemical and biomechanical analysis.After labeling with PKH26,the canine BMSCs were seeded onto the scaffolds.The attachment,proliferation and differentiafion of cells were observed by inveaed fluorescent microscope and SEM.Results On histology,most extracellular matrices were retained in the scaffold after the removal of cell fragments.Safranin O staining and immunfluorescence examination with collagen Ⅱ antibodies provided positive results.Biochemical analysis showed that the collagen content was(708.2 4±44.7)μg/mg,glycosaminoglycan(254.7 ±25.9)μg/mg and DNA(0.021±0.007)μg/mg.Mechanical testing showed the compression moduli(E)were(1.226±0.288)and(0.052±0.007)MPa ander dry and wet conditions respectively.Inverted fluorescent microscope and SEM showed moderate cell adhesion.chondrocyte-like morphology and matrix synthesis around cells. Conclusion The CEDPS retains most extracellular matrices after a thorough decellularization so as to possess an excellent microstructure with ideal biomechanical characteristics and a good biocompatibility. Thus it is a suitable candidate as an alternative cell-carrier for cartilage tissue engineering. Chondrogenic BMSCs and CEDPS may be used to construct cartilage-like tissue in vitro.     

中国高水平击剑运动员运动损伤流行病学调查分析

目的:探讨高水平击剑运动员运动损伤的发病特点。方法:国家击剑队52名队员,男26名,女26名;平均年龄21.9岁;平均身高男186.6 cm,女175.7 cm;平均入队时间7.9年。国际健将17名,国家健将28名。针对运动损伤发病部位、程度、特点等进行流行病学调查。结果:52名运动员中发生运动损伤48人,患病率92.3%,损伤共87人次,急性损伤29人次,慢性损伤23人次,急性转慢性35人次。列患病率前4位的为腰背肌筋膜炎23.0%,髌股关节软骨损伤19.2%,髌腱周围炎和踝腓侧副韧带损伤各11.5%。发病部位比例最高的为膝关节,其次为下腰部和踝关节。损伤原因主要有训练强度过大占42.5%,保护意识淡漠占18.4%,技术动作错误占16.1%。结论:高水平击剑运动员运动损伤患病率较高,损伤部位以膝关节、下腰部以及踝关节为主,其中腰背肌筋膜炎、髌股关节骨软骨损伤、肌腱末端病等患病率较高。训练强度高、保护意识淡漠是受伤的主要原因。     

髋部骨折内固定失败后的挽救技术

正2019年3月24日,在第十二届中国人民解放军总医院创伤骨科大会上,AO技术委员会(AOTK)成员、来自美国加州大学伯克利分校的Mark Lee教授应邀就"髋部骨折内固定失败后的挽救技术"进行了演讲,详细介绍通过内固定翻修术保全髋关节的相关技术和方法,给与会者以启迪。现征得Lee教授同意,将报告整理成文奉献给骨科同道以求共享。     

护理干预对高龄患者髋关节置换术后胃肠道反应的影响

目的：探讨护理干预对行髋关节置换的高龄患者术后胃肠道反应的作用。方法随机将100例行髋关节置换术的高龄患者分为2组，每组各50例，对照组采取常规护理，观察组实施改良护理干预措施，比较2组术后胃肠道反应的发生率。结果观察组50例患者术后出现恶心呕吐1例，腹胀1例，便秘1例，消化道反应发生率为6．00％，明显低于对照组20．00％（χ2＝4．33，P＜0．05），差异有统计学意义。结论高龄患者髋关节置换术术后胃肠道反应较多见，综合护理干预可有效预防胃肠道反应的发生。     

碳酸化羟基磷灰石水泥修复骨缺损的实验研究

目的通过动物实验观察一种新型的骨修复材料———碳酸化羟基磷灰石水泥修复骨缺损的效果。方法在10只杂种犬肱骨近端制作骨缺损动物模型,采用碳酸化羟基磷灰石水泥修复骨缺损,并以高温烧结羟基磷灰石陶瓷作为对照,分别于术后5天、4周、8周、12周和16周处死动物,通过X线和组织学观察其修复效果。结果碳酸化羟基磷灰石水泥完全充填骨缺损,界面与骨结合紧密,生物相容性良好,并且随着植入时间的延长可逐渐降解并被新生骨爬行替代,与骨整合为一体。而羟基磷灰石陶瓷不能紧密充填骨缺损,在实验期间与骨界面清晰,并且没有见到降解现象。结论碳酸化羟基磷灰石水泥具有原位固化性能,是一种较为理想的新型骨缺损修复材料。     

S-ROM股骨假体在髋关节翻修中应用的临床研究

目的 :探讨在髋关节翻修中使用S-ROM股骨假体重建股骨的中期临床效果。方法:回顾性分析2008年1月至2016年1月在髋关节翻修术中应用S-ROM假体进行股骨重建的患者21例21髋,男5例,女16例;年龄29~73岁,平均48.33岁。股骨翻修原因:无菌性松动13例,假体周围感染占位器植入术后4例,粗隆下截骨处骨不连2例,反复脱位1例,外伤致大粗隆骨折1例。初次关节置换原因:先天性髋关节发育不良12例(其中CroweⅣ型9例),股骨颈骨折5例,股骨头坏死2例,感染致股骨近端畸形2例。Paprosky股骨缺损分型:Ⅱ型11例,Ⅲa型9例,Ⅲb型1例。比较患者术前及末次随访时Harris髋关节评分及疼痛评分、髋关节屈曲度,记录患者术后末次随访时主观满意度。结果:手术时间125~290 min,平均189 min。术中出血量200~2 000 ml,平均867 ml。随访时间12~97个月,平均53.14个月。疼痛评分由术前17.14±9.56提高至末次随访的41.71±2.03(t=11.42,P=0.00);功能评分由术前24.01±11.02提高至末次随访的49.95±5.38(t=9.73,P=0.00);Harris髋关节评分由术前41.15±14.81提高至末次随访的91.67±5.83(t=15.33,P=0.00)。髋关节屈曲度由术前(93.10±27.27)°提高至末次随访的(121.90±16.62)°(t=4.59,P=0.00)。患者平均主观满意度9.48分(10分制),其中14例完全满意。末次随访X线片显示21例均为骨长入,其他股骨柄无明显松动或下沉。股骨近端袖套有5例周围形成骨锚定征。股骨近端术中骨折5例,3例为小粗隆骨折,2例为大粗隆骨折。因股骨髓腔狭窄,为预防假体植入发生骨折,小粗隆预捆扎钢丝4例。1例因外伤导致股骨假体远端斜行骨折,行切开复位锁定钢板内固定。其他患者无神经损伤、关节脱位、感染及下肢深静脉血栓形成等并发症发生。结论:S-ROM假体在PaproskyⅡ、Ⅲ型股骨缺损的髋关节翻修术中取得令人满意的结果,特别对于CroweⅣ型先天性髋发育不良等股骨近端畸形的翻修患者可以获得良好初始稳定性,减少并发症,实现远期生物固定。     

胸椎后伸提拉法与常规推拿治疗胸椎小关节紊乱的疗效对比

正胸椎小关节紊乱在西医及中医领域均主张保守治疗,西医以非甾体类镇痛药物为主,能起到一定的镇痛效果但症状反复~([1])。中医理论将其归类于"骨错缝"和"筋出槽"范畴。本院近年逐渐推广胸椎后伸提拉法治疗胸椎小关节紊乱,受到骨科医师及患者的一直好评,现进一步对比胸椎后伸提拉法与常规推拿治疗胸椎小关节紊乱的疗效差异,报道如下。1资料与方法1.1一般资料纳入2015年1月～2017年12月于本院诊治的82例胸椎小关节紊乱患     

个性化定制手术导板在全髋关节置换术中的应用

目的 设计并验证一种全髋关节置换术（total hip arthroplasty, THA）个性化定制手术导板（patient specific instrumentation, PSI）的安全性、有效性。方法 对患有髋关节疾病且须行THA的病人进行层厚为0.8 mm的三维CT扫描,获取该病人的CT数据。将数据导入三维手术规划软件中进行处理,根据病人术前影像学检查结果,利用计算机辅助技术（computer aided design, CAD）,由经验丰富的外科医生对CT图像进行分割并重建,获得骨盆及双下肢三维模型,并在此模型基础上进行三维手术规划。通过3D打印技术,制作病人个性化定制的手术导板,用于在术中提供相应手术操作的定位导航,使假体安放的实际位置和角度与术前计划一致。结果 导板与髋臼、股骨侧的骨骼标志性结构贴合度为100%,截骨高度与术前计划一致,均为股骨小转子上9 mm,髋臼杯磨锉、压配角度控制在外展40°,前倾20°,与术前计划一致。手术时间缩短至54 min,术中失血量减少至376.9 ml。结论 此个性化定制THA手术导板可精确贴合手术部位骨质,显著提高THA的精准性,具有良好的安全性、有效性。     

Metridia荧光素酶检测条件的优化

目的：探讨培养基pH、血清对Metridia荧光素酶（MLuc）检测的影响并尝试找到一种优化的检测条件。方法：构建表达MLuc的逆转录病毒载体,瞬时转染人宫颈癌细胞系HeLa,制备收获MLuc;利用化学发光仪检测不同条件下的培养基对MLuc发光性能的影响,并尝试通过不同缓冲液与试剂的组合代替培养基来获得最佳条件。结果：培养基pH变化导致MLuc发光值产生较大波动,血清的存在会导致检测背景;添加0.02%（V/V）NP-40的磷酸盐缓冲液（PBS）（pH=7.4）作为MLuc检测的缓冲体系代替培养基,其发光值大小相当,检测背景值由原来的600左右降低到20左右。结论：以添加0.02% NP-40的PBS作为MLuc检测的缓冲体系可消除培养基pH、血清的影响,使检测结果更加准确和灵敏。     

幼儿发育性髋关节脱位髋臼指数的MRI研究

目的 :了解幼儿发育性髋关节脱位髋臼指数与其实际髋臼状况的关系。方法 :对 3 2例平均年龄 17.5个月单侧发育性髋关节脱位患儿的双髋关节在冠状面上进行MRI扫描 ,测量MRI骨性髋臼指数、MRI软骨性髋臼指数 ,并与X线片上髋臼指数进行对比。结果 :正常侧X线片髋臼指数比MRI骨性髋臼指数平均小 2 .1° ,比MRI软骨性髋臼指数平均大 16.6°。脱位侧X线片髋臼指数比MRI骨性髋臼指数平均小 2 .4° ,比MRI软骨性髋臼指数平均大 2 6°。结论 :X线髋臼指数能够反映幼儿发育性髋关节脱位的骨与软骨的发育状况