聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的价值

聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的价值姜艳，谭玉芹，鞠吉雨，冯永堂，王健（潍坊市第二人民医院潍坊２６１０４２潍坊医学院免疫学教研室）聚合酶链反应（ＰＣＲ）是具有灵敏、快速、特异的一基因诊断技术。我们对结核性胸膜炎的胸水标本行ＰＣＲ结核菌检测，同时用胸...     

PCR检测角膜内单疱病毒DNA的实验及临床研究

为了探索单疱病毒性角膜炎的发病机制和快速诊断ＨＳＫ。方法应用多聚酶链反应对感染的ＨＳＫ的２０只纯新西兰白兔和６０例ＨＳＫ患者的角膜进行了单疱病毒－１－ＤＮＡ检测。结果急性感染期的５只兔角膜和１２只人角膜均阳性；用稳定期４５ｄ的兔角供体行部分穿透性角膜移植术，术后５０ｄ１０只兔角膜中７只阳性，稳定期６个月－６年的１８只人角膜片，１２只阳性；３０例临床可疑ＨＳＫ角膜刮取物，２６例阳性；５只未感染ＨＳＫ     

穿孔素的免疫调节作用

穿孔素 (Perforin)是存在于CTL、NK细胞杀伤颗粒中的细胞毒性蛋白 ,在保护机体抗胞内病原体如细菌、病毒、寄生虫感染、抗肿瘤和同种排斥应答中起重要作用 ,是免疫系统重要的效应分子。近年来随着FHL病因的阐明 ,逐渐发现穿孔素也是一种重要的免疫调节分子。本文综述了穿孔素在病毒感染、肿瘤免疫、自身免疫病及GVHD中的调节作用 ,以及穿孔素免疫调节的作用机制。     

乙肝病毒前C基因突变株感染者细胞免疫功能的观察

目的 检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ基因突变体感染者的细胞免疫水平,探讨细胞免疫与前Ｃ基因突变的关系。方法 用多聚酶链反应（ＰＣＲ）结合地高辛标记的寡核苷酸探针杂交技术从６０名慢性乙肝患者中筛选出ＨＢＶ前Ｃ基因突变株感染者,ＨＢＶ野毒株感染者及ＨＢＶ已清除者各５人,用血源性ＨＢｓＡｇ和ＣＤ＾４＋Ｔ辅助细胞识别的抗原表位ＨＢｃＡｇ５０－６９合成多肽进行特异性淋巴结转移转化实验,结果 ＨＢＶ前Ｃ基因突     

核转录因子协同刺激物OCA-B作用研究进展

OCA-B,又称为BOB.1或OBF.1,为B淋巴细胞的特异性核转录因子协同刺激物,可通过与核转录因子POU家族中的Oct-1及Oct-2相互作用而激活免疫球蛋白基因,促进抗体的生成,此外OCA-B还与B细胞的活化及生发中心的形成有密切的关系。此外在T淋巴细胞中也可检测到OCA-B表达,说明OCA-B对T细胞亦可发挥调节基因转录的作用。本文主要对OCA-B的结构、分布及生物学作用的研究进展做一阐述。     

冬虫夏草抗角膜移植排斥反应实验研究的初步报告

用兔心脏血Ｔ淋巴细胞转化实验、角膜厚度计和扫描电镜等方法，对鸡→兔穿透性异种角膜移植的实验模型进行检测观察。结果：术后３周时，各组Ｔ淋巴细胞转化率均达峰值，冬虫夏草治疗组心脏血Ｔ淋巴细胞转化率为乃．６９±１．２７，空白对照组为２７．３２±２．３８，组间比较差异存在显著性（Ｐ＜０．０５）；在观察期内，冬虫夏草组植片透明率为６２．５％，而对照组植片出现明显排斥反应，植片透明率为零，植片厚度随混浊程度的加重而增加；电镜下观察冬虫夏草组的Ｄｅｓｃｅｍｅｔ膜内皮细胞优于对照组。结果提示：冬虫夏草在角膜移植术后能发挥免疫抑制剂的作用，并能强化激素的效果。     

卡介苗穿梭质粒pMSIFN-α2a的构建与鉴定

目的 构建分泌性表达IFN-α2a的卡介苗重组质粒。方法 分别以卡介苗（BCG）和IFN-α2a cDNA为模板，通过PCR扩增得到约117bp的BCG-Ag85B信号肽序列和495bp的IFN-α2a基因序列。将BCG-Ag85B信号肽序列与大肠杆菌．卡介苗穿梭表达载体pMV261重组，得到重组质粒pMS。再将IFN-α2a基因序列克隆至pMS中，得到重组质粒pMSIFN-α2a。结果 质粒pMSIFN-α2a用双酶切和PCR扩增及测序鉴定证实，克隆基因BCG-Ag85B和IFN-α2a正确插入载体pMV261。结论 重组质粒pMSIFN-α2a可望在BCG中分泌性表达细胞因子IFN-α2a，从而促进IFN-γ的释放，该质粒的构建成功为改造卡介苗、发展新型抗膀胱肿瘤疫苗奠定了基础。     

IL-12基因转染B细胞的抗原提呈功能研究

目的 以IL-12双亚基共表达载体pL35P40SN转染B细胞,并检测其对Th细胞发育分化和CTL功能的影响。方法 尼龙毛法分离T,B细胞,以pL35P40SN转染B细胞,并以ELISA检测其IL-12的分泌,以IFN-γ的合成分泌检测其对Th1细胞发育分化的影响,以^3H-TdR法检测其对CTL特异杀伤HepG2细胞功能的影响。结果 以pL35P40SN转染B细胞后,pL35P40SN基因转染的B细胞IL-12分泌量、Th应答细胞上清IFN-γ分泌量和CTL的杀伤功能显著高于pLXPXSN和未转染的细胞。结论 pL35P40SN转染B细胞后,可刺激Th1细胞发育分化和CTL的特异性杀伤功能。     

人caspase-1基因在肝癌细胞中的表达及对IL-1β水平的影响

目的:将人caspase-1基因真核表达载体转染肝癌细胞后观察其表达水平及对IL-1β水平的影响,为研究cas-pase-1与IL-1β的关系及其在慢性炎症与肿瘤中的作用提供依据。方法:利用阳离子聚合物(jetPEI)将pIRES2-EGFP-caspase-1重组表达载体和pIRES2-EGFP对照载体转染人肝癌细胞HepG2(HepG2/caspase-1、HepG2/mock),48小时后倒置相差荧光显微镜下观察表达情况,利用RT-PCR、Western blot方法检测两组细胞caspase-1表达水平,采用caspase-1底物显色分析研究的方法检测两组细胞中caspase-1的活性。夹心ELISA法检测细胞培养上清以及细胞裂解液中IL-1β的表达水平。结果:转染48小时后倒置相差显微镜下可见,pIRES2-EGFP-caspase-1和pIRES2-EGFP重组表达载体均能在HepG2细胞中高效表达;HepG2/caspase-1细胞中caspase-1 mRNA表达水平显著提高;经LPS刺激后,HepG2/caspase-1细胞中caspase-1总蛋白的水平明显升高;caspase-1的生物活性水平与对照组相比具有显著性差异(t=25.679,P<0.05);HepG2/caspase-1细胞培养上清中IL-1β的水平明显高于HepG2/mock组细胞(t=3.417,P<0.05),胞浆裂解液中的变化相对不显著(t=2.396,P>0.05)。结论:人caspase-1基因真核表达载体pIRES2-EGFP-caspase-1能够在肝癌细胞中高效表达caspase-1,且该重组表达载体在HepG2细胞中能提高活性IL-1β的表达。