软骨细胞上清液诱导BMSC向软骨细胞转化的实验研究

目的:体外定向诱导大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)向软骨细胞表型转化,并对诱导进行鉴定。方法:从SD大鼠中分别分离出BMSC和软骨细胞进行体外培养。收集软骨细胞培养上清液,作为BMSC诱导液从第2代开始进行诱导分化。7d后取出标本,甲苯胺蓝染色和Masson染色检测软骨基质的分泌,免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达。结果:镜下见细胞形态由梭形向多边多角形转化。甲苯胺蓝染色和Mas-son染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组化检测阳性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA呈阳性表达。结论:软骨细胞上清液可诱导BMSC向软骨细胞转化。     

肝细胞核因子6在小鼠肝内胆管发育过程中的表达

目的 探讨肝细胞核因子6(HNF6)在肝内胆管发育过程中的作用. 方法 用RT-PCR及免疫组织化学等方法 检测HNF6在小鼠胚胎发育的各个阶段以及成年肝中的表达. 结果 RT-PCR结果 显示,HNF6 mRNA的表达在E9d开始出现,与肝芽形成的时间吻合,E13d HNF6 mRNA的表达消失,E15d又重新出现,并一直维持到出生.免疫组织化学显示,CK19免疫反应在E13d开始出现,此时免疫反应阳性细胞在肝索内散在分布.E15d时在近肝门处的门管区丌始出现由单层的、CK19阳性细胞组成的胆管板,之后,阳性细胞反应主要分布于胆管板和小叶间胆管.E9～11d,多数肝索细胞呈HNF6阳性反应,E13d的肝索中未观察剑HNF6的表达.E15～17d,HNF6阳性反应的分布与CK19相似,成年小鼠肝的胆管上皮细胞仍呈HNF6阳性反应. 结论 HNF6可能与肝干细胞的特化关系不大,而与肝发育的启动、肝干细胞向胆管上皮细胞的分化及其分化状态的维持有关.     

身心因素与肠易激综合征患者生活质量的相关研究

目的调查肠易激综合征(IBS)患者生活质量状况并评估躯体及心理因素对它的影响。方法采用肠易激综合征生活质量量表(IBS-QOL)、临床症状问卷、艾森克人格问卷简式(EPQ-RSC)、简明心境问卷简式(POMS-SF)、医学应对问卷(MCMQ)对120例IBS患者进行测查,将IBS患者的心理健康水平(人格、情绪、应对)及躯体症状(肠道症状、肠外症状、睡眠障碍)与IBS患者生活质量进行相关分析。结果IBS患者IBS-QOL的8个因子和总分均显著降低(P<0.05),其中健康忧虑和饮食限制降低最为明显,除IBS症状外,肠外症状、睡眠障碍、精神心理异常在IBS患者中也很常见。心理因素中EPQ-RSC神经质(N)分、POMS中焦虑、抑郁等多项因子分及总分、MCMQ屈服积分与IBS-QOL总分呈负相关;躯体因素中IBS症状、肠外症状、睡眠障碍积分与IBS-QOL总分呈负相关。结论肠易激综合征患者的生活质量明显降低,除躯体症状外,心理功能失调也是决定患者生活质量的重要因素。     

视神经损伤后视网膜中GAP-43的表达及MDA、NO和ATPase的测定

目的通过对视神经损伤后,视网膜中生长相关蛋白-43(GAP-43)的表达及丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、三磷酸腺苷酶(ATPase)含量变化的分析,探讨上述物质在视神经损伤中的变化及作用。方法建立家兔视神经损伤的动物模型,利用免疫组织化学方法观察管内段视神经损伤后GAP-43的表达。利用生化分析方法测定视网膜中MDA、NO、ATPase的含量。结果视神经损伤后3d,可在视网膜的切片中看到GAP-43表达阳性的细胞,位于RGCs层,其胞体染成棕黄色,胞核无色;伤后5d阳性细胞增多,颜色加深;伤后7d阳性细胞数和积分光密度值达最高峰;伤后14d阳性反应下降,阳性细胞数下降,染色变浅。视神经损伤后1d视网膜MDA含量较对照组显著升高(P<0.01),第5天达到高峰,此后逐渐下降,至伤后14d仍高于对照组(P<0.05)。NO含量在伤后3d亦较对照组显著升高(P<0.05),于伤后5d达到高峰,伤后14d仍高于对照组(P<0.01)。ATP酶活性于伤后第1天d开始显著降低(P<0.01),5d后逐渐升高,伤后14d仍低于对照组(P<0.05)。MDA的含量与NO呈正相关(r=0.8644,P<0.01);ATP酶的活性变化与NO呈负相关(r=-0.9639,P<0.01),ATP酶的活性变化与MDA亦呈负相关(r=-0.9018,P<0.01)。结论脂质过氧化作用、NO毒性作用可能参与了视网膜的损伤过程。     

筑路工人的人格类型与心理健康水平

目的 探讨和分析筑路工人的人格类型和心理健康状况.方法 采用艾森克人格问卷(EPQ)和症状自评量表(SCL-90)对162名筑路工人的人格类型和心理健康水平的关系进行测评.结果 ①EPQ的E、N、P、L的得分均低于全国常模,并且稳定型人格尤其是外向稳定型人格是筑路工人的典型人格类型.②SCL-90的强迫、抑郁、焦虑3个因子的得分均高于全国常模,差异有统计学意义(P＜0.05);③不同人格类型筑路工人的心理健康水平存在明显差异,稳定型人格筑路工人的心理健康水平要明显好于不稳定型筑路工人.结论 筑路工人存在明显的心理健康问题,人格类型以外向稳定型为主.     

葡萄球菌蛋白A"ZZ"与EGFP的融合表达及活性测定

目的 将EGFP基因与葡萄球菌蛋白A（SPA）基因的龙结构域重组，尝试以融合标记的方式构建一种新型免疫亲和试剂。方法 利用基因工程技术将EGFP基因重组至pEZZ18质粒，构建原核分泌表达载体pEZZ-EGFP，通过竞争ELISA和荧光光谱测定其在大肠杆菌中表达产物ProZZEGFP的生物学活性。结果 pEZZ-EGFP在E．coli HB101中正确表达，所表达融合蛋白具有与哺乳动物IgG抗体结合的生物学活性和EGFP的荧光活性。结论 ProZZ—EGFP融合蛋白有忽结构域（SPA）和EGFP二者生物学特性，在免疫荧光测定中可作为一种通用亲和试剂。     

女性不孕症患者基础内分泌与其心理健康状况分析

目的探讨女性不孕症患者内分泌测定值与其心理健康状况的关系,为其心理治疗方案的制定提供实验依据。方法观察对象按其基础内分泌测定值分为3组。用症状自评量表(SCL-90)对观察对象及对照组进行测评。结论观察组与对照组比较的差异主要集中于总分及焦虑、抑郁、躯体化、人际关系、偏执、强迫、敌对几个因子上。高FSH组、高T组、高PRL组各组的心理问题严重程度不同,3组心理问题的严重程度依次为:高FSH组、高T组、高PRL组。     

Expression of recombinant mouse IL-1beta significantly down-regulates NK cell mediated cytotolysis against H22 hepatoma cells]

AIM: To investigate the effect of the expression of recombinant IL-1beta in H22 hepatoma cells on its response to NK cell mediated cytotoxicity. METHODS: BALB/c mouse was stimulated by 6% of starch. Total RNA was prepared from peripheral blood monocytes (PBMCs). IL-1beta gene (843 bp) was obtained by RT-PCR. The purified PCR product digested by Xho I and EcoR I was cloned into pIRES2-EGFP to construct the recombinant pIRES2-EGFP-mIL-1beta expression vector which was verified by PCR, restriction enzyme assay (Xho I and EcoR I) and DNA sequencing. Then the purified pIRES2-EGFP-mIL-1beta plasmid was transfected into H22 hepatoma cells by jetPEI. The expression level of recombinant IL-1beta was detected by RT-PCR and confocal microscopy. The cytotoxicity of wild-type spleenic NK cells against H22 cells was assessed by MTT assay. RESULTS: After the total RNA isolated from the starch stimulated BALB/c mouse PBMC, 843 bp IL-1beta gene in length was prepared by RT-PCR. The purified PCR product digested by EcoR I and Xho I was ligated by pIRES2-EGFP to create pIRES2-EGFP-mIL-1beta expression plasmid which was verified by PCR, restriction enzyme assay and DNA sequencing. Then pIRES2-EGFP-mIL-1beta was transfected into H22 hepatoma cells by jetPEI. RT-PCR and confocal microscopy assay showed these cells expressed high level of recombinant IL-1beta expression vector. In a 4-hour based MTT assay, IL-1beta in H22 cells was more resistant to NK92 cell mediated cytotoxicity compared with the cells transfected with pIRES2-EGFP. Meanwhile, the cytolytic capacity of the spleenic NK cells separated from wild-type mouse decreased about 10% when the ratio of effector to target was 40:1. CONCLUSION: The expression of proinflammatory cytokine IL-1beta can significantly down-regulate the cytolytic activity of NK cells against H22 hepatoma cells. It plays a crucial role in the immune escape of hepatoma from NK cell mediated innate immunity.     

关于临床教学中防范医疗纠纷思考

当前,在临床实践教学过程中,客观存在着临床带教老师履行带教义务与侵犯患者自主权的矛盾,医学生实践成才与侵犯患者隐私权的矛盾,这无疑给临床实践教学带来函 许多问题,为了维护患者的自主权,隐私权,有利于临床实践教学,防范医疗纠纷,必须完善医患权利和临床实践教学的法律、法规。     

家兔视觉诱发电位正常值观测

目的 观察家兔正常视觉诱发电位基本波型,测定其主波成分有关参数的正常值。