SELEX技术中分离方法的研究进展

指数富集配体的系统进化(systematic evolution of ligandsby exponential enrichment,SELEX)技术是一种用特定的随机寡核苷酸文库,并结合体外PCR扩增,经过多轮筛选,筛选出能与靶分子高亲和、高特异性结合的寡核苷酸序列[该序     

酸浆醇提物对食管癌EC-1.71细胞增殖的抑制作用

目的:研究酸浆醇提物(ethanol extracts of Physalis alkekengi Linn.,EEP)对食管癌EC-1.71细胞增殖的抑制作用,探讨其可能的作用机制.方法:EEP作用于EC-1.71细胞后,采用倒置显微镜观察细胞形态的改变;采用细胞计数法观察其对细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞仪检测法...     

来氟米特和地塞米松对正常人外周血Th17和Th1细胞的免疫调节作用

目的:探讨来氟米特活性代谢产物A771726和地塞米松对正常人外周血辅助性T细胞Th17和Th1细胞亚群的免疫调节作用.方法:体外分离正常健康人外周血CD4+T淋巴细胞,分别与不同剂量的A771726(15、30、60 μg/ml)和地塞米松(10-6、10-7、10-8mol/L)体外共培养,采用流式细胞技术(FCM...     

CHEK2基因多态性与食管癌淋巴结转移的关系

目的:研究中国汉族人群中细胞周期检测点激酶2(checkpoint kinase 2,CHEK2)基因多态性与食管癌淋巴结转移风险性的关系.方法:采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术分析380例食管癌和380例非肿瘤对照CHEK2基因多态性,并分析85例有淋巴结转移的食管癌和270例无淋...     

骨髓活检在诊断及鉴别诊断真性红细胞增多症中的价值

目的:探讨骨髓活检在真性红细胞增多症(PV)诊断与鉴别诊断中的价值.方法:同步观察真性红细胞增多症37例患者骨髓涂片和活检切片.并与继发性红细胞增多症20例患者作比较,以正常人20例作对照.观察骨髓增生程度、增生优势细胞系、网硬蛋白积分.结果:PV组患者骨髓造血组织在切片中的增生度明显高于涂片,两者差异有统计学意义(P<0.05);与继发性红细胞增多症及正常对照组比较差异亦有统计学意义(P<0.05).PV组切片中增生优势细胞系分为累及三系的增生,累及二系(红系和粒系、红系和巨核系)的增生,仅累及红系单系的增生;继发性红细胞增多症组仅显示红系相对增生.PV组网硬蛋白纤维积分为1+及以上占83.8%,继发性红细胞增多症组及正常对照组均未见1+或l+以上,分别比较差异有统计学意义(均为P<0.05).结论:骨髓活检能准确反应骨髓组织的增生程度、增生优势细胞系、纤维增生程度,对PV的诊断及鉴别诊断有较高价值.     

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中糖酵解相关基因的表达

目的: 探讨糖酵解相关基因在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMC）中的表达及其意义。方法: 选取活动期RA患者19例,稳定期RA患者23例,采用Ficoll法分离PBMC,定量PCR检测糖酵解相关基因表达水平,并与健康对照进行比较。结果：与健康对照相比,活动期RA患者PBMC中糖酵解相关基因丙糖磷酸异构酶（triosephosphate isomerase,TPI）、烯醇化酶（enolase,ENO）、M型丙酮酸激酶（pyruvate kinase muscle,PKM）、单羧酸转运蛋白（monocarboxylic acid transporter member,MCT）表达量均增加(P<0.05),稳定期RA患者4种基因的表达略有升高,但差异无统计学意义。结论：RA患者存在糖酵解相关基因表达的改变。糖酵解反应有可能在RA疾病机制中具有重要的意义。     

外源性sall4基因在胃癌HGC27细胞株中的表达及鉴定

目的: 建立sall4稳定转染的HGC27细胞株,为sall4基因在胃癌发生发展中的作用研究奠定基础。方法: 采用脂质体介导法将pCMV6-entry-sall4及pCMV6-entry质粒转染至HGC27细胞,48 h后加入终质量浓度600 mg／L的G418 抗生素进行药物加压筛选,获得阳性单克隆细胞株,通过RT-PCR和蛋白质印迹检测细胞中sall4的表达情况。 结果: 成功构建了稳定过表达sall4的HGC27细胞株,稳定转染细胞株中sall4的mRNA和蛋白水平明显高于未转染组及转染空载体组。结论: 本实验成功筛选出sall4基因过表达的稳定转染胃癌细胞系。     

来氟米特对类风湿关节炎患者Th17细胞免疫调节的影响

目的： 探讨来氟米特活性代谢产物A771726对类风湿关节炎（RA）患者外周血Th17细胞的影响及意义。方法： 取RA患者外周血单个核细胞（PBMC）,采用免疫磁珠法阴选出CD4⁺T辅助细胞（helper T cell, Th）,将CD4⁺T细胞分别与不同剂量的A771726（15、30、60 μg/ml）和地塞米松（10^-6、10^-7、10^-8mol/L）共培养48 h,流式细胞术（FCM）检测RA患者外周血Th17/Th百分比;应用实时荧光定量逆转录聚合酶链技术(即RT-PCR)检测IL-17、ROR-γt mRNA水平。结果： 在体外,来氟米特对RA患者外周血CD4⁺ T细胞胞内IL-17、ROR-γt mRNA 表达无明显抑制作用,地塞米松可以使CD4⁺ T细胞胞内IL-17、ROR-γt mRNA 表达明显减少,随着药物浓度的增加抑制作用更加明显。来氟米特对Th17/Th无明显影响,地塞米松能降低Th17/Th细胞百分比。结论： 来氟米特对RA患者外周血Th17细胞无明显影响作用,而地塞米松则可显著降低Th17细胞在Th细胞中的比例。     

脂联素及其受体基因多态性与结直肠癌发生的相关性研究

目的： 研究脂联素及其受体基因多态性与结直肠癌易感性之间的关系。方法： 370例结直肠癌患者为实验组,370例健康体检者设为对照组。每例取全血3 ml,裂解红细胞后提取DNA。用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR RFLP）位点检测技术,检测脂联素基因多态性位点（rs266729、rs822395、rs822396、rs2241766、rs1501299）及其受体基因多态性位点(rs12733285、rs1342387)的基因型,比较两组各位点的基因型分布频率。结果： ① 实验组脂联素受体基因rs12733285位点CC、CT、TT基因型频率分别为91.89%、8.11%、0.0%,对照组分别为86.49%、13.51%、0.0%,两组基因型比较差异有统计学意义（χ2=5.61,P=0.018）。② 实验组脂联素受体基因rs1342387位点GG、AG、AA基因型频率分别为48.65%、38.92%、12.43%,对照组分别为37.84%、46.49%、15.68%,两组基因型分布频率差异有统计学意义（χ2=8.87, P=0.012）。③ 与CC基因型相比,脂联素受体基因rs1277285位点的CT基因型与结直肠癌的发生风险呈负相关（校正后OR＝0.56, 95% CI＝0.35～0.91）。与GG基因型相比,脂联素受体基因rs1342387位点的AG和AA基因型的个体可降低结直肠癌的发病风险（AG vs GG：校正后OR＝0.66, 95% CI＝0.48～0.90;AA vs GG：校正后OR＝0.62, 95% CI＝0.39～0.98;AG/AA vs GG：校正后OR＝0.65, 95% CI＝0.48～0.87）;④. 脂联素基因5个多态性位点的基因型频率在两组间差异无统计学意义（P均>0.05）。结论： 脂联素受体基因（rs12733285、rs1342387）的多态性可能与结直肠癌发病有关,脂联素受体基因多态性的检测为大肠癌的诊断及治疗提供了新的方法。     

高荧光细胞和血清腹水白蛋白梯度在恶性腹水诊断中的价值

目的 探讨高荧光细胞(HFC)和血清腹水白蛋白梯度(SAAG)诊断恶性腹水的价值.方法 选取202例出现腹水的患者,依据脱落细胞学检查结果分为恶性腹水组(36例)和良性腹水组(166例),分析HFC和SAAG在良、恶性腹水组中的分布差异.采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标单项及联合检测诊断恶性腹水的效能.结果...