新疆维吾尔族慢性乙型肝炎患者HBV基因型及亚型分析

目的探讨新疆维吾尔族(维族)慢性乙型肝炎患者中乙型肝炎病毒(HBV)基因型及基因亚型。方法用本实验室建立的HBV基因型及基因亚型特异性引物巢式聚合酶链反应(nPCR)法,对54份新疆维族慢性乙型肝炎患者血清样本进行HBV基因型及亚型分析。随机选取11株经nPCR法鉴定为D基因型的样本,同时进行PreS/S区及PreC/C区测序以鉴定D基因亚型。随机选取2株D型HBV进行基因组全长扩增并克隆测序。从GenBank下载75株各国HBVD1亚型参考序列,根据Kimuratwo-parameter法计算中国新疆地区与其他国家的HBVD1亚型株进化距离。结果新疆维族人群HBV感染以D基因型为主,占66.67%,同时存在B(5.56%)、C(5.56%)基因型及混合感染(22.22%)。新疆存在D1和D3两种亚型,以D1亚型为主。新疆D1亚型与中亚哈萨克斯坦、乌兹别克斯坦、蒙古等国及中东地区土耳其、伊朗、埃及等国的进化距离较近。结论新疆维族慢性乙肝患者中D基因型为优势株,主要为D1亚型,其进化距离与中亚中东等国较为接近。     

2009年猪源性甲型流感大流行的公共卫生介入管理

1918-1919年H1N1流感大流行导致全球几千万人死亡,社会动荡和经济损失惨不忍睹。其后近百年来,人类为减少流感大流行造成生命和财产损失不懈努力。公共卫生系统建设和流感公共卫生介入管理研究在其后H2N2和H3N2流感毒株大流行时得到进一步发展。2009年新的H1N1流感病毒株幽灵重现,公共卫生系统及其流感介入管理策略再一次面临挑战,以史为鉴,尊重科学,有条不紊,全球应战。本文就流感大流行的历史、这次流感病毒株的特点和公共卫生介入管理的依据、效果评价模型、实践与挑战以及当前和未来的发展策略简要阐述。     

HBV RNA病毒样颗粒的潜在临床意义

最近的研究结果证实慢性乙型肝炎患者血清中存在的HBV RNA为3.5 kb的前基因组RNA(pgRNA),这些pgRNA存在于形态结构类似于丹颗粒的病毒样颗粒中。由于pgRNA只能由位于感染的肝细胞核内的病毒共价闭合环状DNA(cccDNA),且其产生过程不受核苷(酸)类抗病毒药物的影响,因此血清病毒RNA应能够反映接受治疗的患者肝细胞内cccDNA的存在及转录活性。据此推测,血清病毒RNA可作为一个潜在的指导核苷(酸)类似物安全停药的指标。基于小样本停药队列研究的结果显示停药点血清中HBV RNA的确与慢性乙型肝炎停药后的病毒学反弹相关。     

国产丙型肝炎诊断试剂评价质控体系的建立

目的 建立丙型肝炎诊断试剂考评用质控体系.方法 收集自2009年2至6月期间4080份献血员血清标本,用酶免疫实验检测筛选出抗-HCV阳性和抗-HCV阴性的146份标本.分别使用2种进口(Murex、Ortho)和4种国产抗-HCV EIA试剂(分别为英科新创、中山生物、万泰和科华公司)对筛选出的标本进行重复检测;使用Chiron的RIBA HCV 3.0和HCV RNA PCR试剂进行确认试验;采用Roche和Abbott HCV RNA定量试剂进行HCV RNA定量检测,RNA阳性标本进行HCV基因型检测.选择不同强度的或不同含量的确认阳性和阴性的标本及系列稀释标本建立抗-HCV和HCV RNA诊断试剂评价质控体系.结果 构建了抗-HCV和HCV RNA诊断试剂评价质控体系.每种质控体系均由50份标本组成.分别包括20份抗-HCV/HCV RNA阳性标本、20份抗-HCV/HCVRNA阴性标本及10份用于灵敏度评价的系列稀释标本.阳性标本包括强、中和弱阳性,并包含国内常见HCV基因型和亚型.阴性标本包括样本吸光度值/临界值接近临界值的标本.结论 本研究所建立的质控体系背景资料丰富、检测结果稳定可靠,为新研制和改进后国产丙肝诊断试剂的性能评价提供参考数据.     

慢性乙型肝炎病毒DNA定量检测的临床意义

近年来,随着核酸及核酸类似物、聚乙二醇干扰素α等抗病毒药物的问世,使得慢性乙型肝炎临床抗病毒治疗取得了明显发展,同时对乙型病毒肝炎的实验室检测也提出了新的要求,促进了实验室诊断技术的发展.本研究着重讨论临床抗病毒治疗中乙型肝炎病毒DNA定量检测的应用和重要性,指出HBV DNA的定量检测病毒学应答对于判定抗病毒疗效、调整临床抗病毒治疗方案、停药后随访及预测预后等有重要意义.     

乙型肝炎表面抗原（HBsAg）胶体金试剂的研制

目的：研制乙型肝炎表面抗原（HBsAg)胶体金试剂,方法：用未加氢氧化铝佐剂的乙型肝炎血源疫苗原材料免疫BALB/c小鼠制备抗－HBs单克隆抗体,应用胶体金标记抗－HBs单克隆抗体,测定HBsAg胶体金剂试的稳定性,对该试剂进行临床考核及检定等,结果,经中国药品生物制品检定所检定,其灵敏度达到1ng/ml, 特异度为100％（20／20）,精密度为100％（10／10）,符合国家对HBsAg试剂僵的要求,临床考核合格,已通过国家药品监督管理局的新药评审,获国家新药证书,结论,HBsAg胶体金试剂可用于献血员HBsAg筛选,健康人群体检,乙型肝炎病毒（HBV）感染的流行病学调查和临床诊断。     

利用戊型肝炎病毒开放读码框架2截短多肽降低抗戊型肝炎病毒IgM检测中的假阳性

目的 研究用戊型肝炎病毒4型(HEV4-)开放读码框架(ORF)2主要免疫表位截短多肽排除抗-HEV IgM检测中发生假阳性的可行性.方法 用重组HEV-4 ORF2蛋白主要抗原决定簇多肽(459～607位氨基酸)及其截短多肽(472～607位氨基酸)为抗原分别包被ELISA板,用间接ELISA法分别检测35份HEV RNA阳性患者血清、69份健康人血清和117份可疑阳性血清标本的抗-HEV ISM,并用免疫印迹法(Western blot,WB)确认,逆转录(RT)-PCR检测HEV RNA加以比较.结果 WB检测结果显示,戊型病毒性肝炎患者血清中抗-HEV ISM仅与459～607多肽二聚体反应,而不与其单体及472～607多肽反应.间接ELISA法检测35份HEV RNA阳性患者血清抗-HEV IgM均能与459～607多肽反应,而不与472～607多肽反应;69名健康人血清与2种多肽都不反应.117份可疑阳性血清中,5份能同时与2种多肽反应,但450 nm吸光度(A450)值之差小于0.5.WB检测这5份血清抗-HEV IgM均阴性;RT-PCR检测HEV RNA为阴性,说明这5份血清为非特异性吸附引起的假阳性.结论 ORF2 459～607多肽可有效检测抗-HEV ISM,根据血清与2种多肽反应的A450差异,能有效排除因非特异性吸附导致的抗-HEV IgM假阳性.     

庚型肝炎病毒致病性的动物实验研究

为进一步了解庚型肝炎病毒 (ＨＧＶ)的致病性 ,对 3只国产猕猴 (Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ)于接种人ＨＧＶＲＮＡ阳性血清后进行了长达 2 0周的随访观察。现将结果报告如下。材料与方法3只猕猴购自我国广西壮族自治区 ,其中 2只为雄猴 ,1只为雌猴 ,年龄为 2～ 3岁。实验感染前采其静脉血 ,检测血清丙氨酸转氨酶 (ＡＬＴ)、血浆ＨＧＶＲＮＡ、外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)中ＨＧＶＲＮＡ ,并用光镜和免疫组化法检测肝活检标本。给猕猴接种的血清系取自一名ＨＧＶＲＮＡ阳性的急性非甲～非戊型肝炎患者 ,对该份血清作 10倍稀释后 ,用逆转录…     

急性散发性戊型肝炎的临床和流行病学特点分析

目的：探讨急性散发性戊型肝炎临床和流行病学特点。方法：收集我国6城市传染病院或综合医院传染科急性散发性肝炎729例，应用酶联免疫法（ELISA）检测抗－HAV IgM,HBsAg，抗－HBcIgM，抗－HCV和抗－HEV。结果：729例急性散发性肝炎中，12．3％（90／729）为戊型肝炎。93．3％（84／90）急性散发性戊型肝炎患的年龄为20－59岁。男性多于女性，男女之比为5：1。80％（72／90）病例发生在上年11月至次年5月。在发病前2月内，47．67％（40／84）患有在外就餐史，32．1％（27／84）有出差史，22．6％（19／84）有饮生水史。随访例患，2例（2．4％）死亡，82例（97．6％）康复，无一例发展为慢性。结论：在急性散发性肝炎中，戊型肝炎占12．3％，其主要临床和流行病学特点类似流行性戊型肝炎。